专利名称：香鳞毛蕨中绵马素bb在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及香鳞毛蕨中绵马素BB在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
癌症是死亡率极高的人类健康第二号“杀手”，开发和研制高效低毒的天然抗癌药物是目前乃至未来人类所需着重解决的重大科技任务之一。近年来随着分子肿瘤学、分子药理学的不断发展以及对肿瘤本质的逐渐阐明，药物、基因工程、组合化学、大规模快速筛选等先进技术的广泛应用，加速了新型抗肿瘤药物的开发。目前主要的抗肿瘤药物有:烷化齐[J，抗代谢药物，抗肿瘤抗生素，钼类抗肿瘤药物，激素类，抗肿瘤植物药，用于微管和微管蛋白的紫杉醇，用于拓扑异构酶的喜树碱，以及用于抑制肿瘤细胞DNA合成的三尖杉酯碱。然而普通的化学抗肿瘤药物存在着毒副作用较大的缺点，限制了临床应用，因此开发低毒的天然抗肿瘤药物已显现了巨大的潜力，并已日益成为国内外学者研究的焦点和热点，孕育着重大的科学发现。鳞毛蕨属中主要的药用植物为传统驱虫药，应用历史悠久，始载于《神农本草经》。除了传统的药理功效外，还具有良好的抗病毒、抗肿瘤、抗菌、消炎、止血及子宫收缩等活性。化学研究表明该属植物的有效成分为其特征性成分——间苯三酚类化合物(左丽,2004)。香鳞毛蕨D ryopteris frag rans L.为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,生长于海拔100021700m的山坡或岩石缝中，分布于东北、华北各省。从该植物中分离鉴定出的间苯三酚类化合物有80多种。民间广泛用其治疗多种皮肤病(沈志滨，2006)。

发明内容
本发明的目的是提供了香鳞毛蕨中绵马素BB在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明以人乳腺癌细胞、人肺癌细胞、人胃癌细胞、人前列腺癌细胞、人结肠癌细胞、人白血病细胞、人卵巢癌细胞、人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人脑胶质瘤细胞为研究对象，使用MTT法检测香鳞毛蕨中绵马素BB对肿瘤细胞的体外抑制作用，结果证明，绵马素BB对肿瘤细胞的抑制作用较明显。本发明通过裸鼠体内实体瘤抑瘤实验证明香鳞毛蕨中绵马素BB具有体内抗肿瘤活性。基于上述研究结果，本发明证实了香鳞毛蕨中绵马素BB具有治疗乳腺癌、前列腺癌、肝癌等癌症的潜在价值，可用于制备抗肿瘤的药物。本发明可以纯化的形式与药学上适当的载体一起被使用。可制成的药物剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、颗 粒剂、混悬剂、滴丸、口服液或粉针剂，还可以采用现代制药界所公认的控释或缓释剂型。根据本发明的药物组合物的给药途径可以是本领域普通技术人员普遍知道的任何一种。可以通过任何适当的方式给药，包括非肠道、静脉内、肌内、腹腔内给药，或者也可以通过用导管直接灌注给药。给药的剂量和频率依据年龄、性别、病人状态，同时服用其它药物、不良反应和临床医师考虑到的其它因素而定。本发明的优点:1.本发明以新鲜或者干燥香鳞毛蕨为原料，在不破坏植物生态平衡、不影响农业生产的基础上，对植物资源进行高效合理的利用。2.本发明中的香鳞毛蕨中绵马素BB具有低毒不易产生耐药性的特点，对肿瘤细胞的IC50值可达到10 μ Μ-20 μ Mo
具体实施方案实例一体外检测抗肿瘤活性试验细胞:人乳腺癌细胞(MCF-7)、人肺癌细胞(Α549)、人胃癌细胞(SGC-7901)、人前列腺癌细胞(PC-3)、人结肠癌细胞(HCT-8)、人白血病细胞(CEM)、人卵巢癌细胞(Η0-8910)、人宫颈癌细胞(Hela)、人肝癌细胞0fepG2)、人脑胶质瘤细胞(SHG-44)。均购自上海细胞库。实验材料:香鳞毛蕨中绵马素BB，本实验室制备；生理盐水，哈尔滨三联药业；紫杉醇，上海昊化化工有限公司。方法:(1)分别取处于指数生长期的肿瘤细胞，用含有10%胎牛血清的DMEM培养液稀释成20000个细胞/mL。(2) 96孔板每孔中加入200 μ L细胞悬液，置于37°C，5% CO2培养箱中培养24h。(3)将木豆叶中木豆芪酸I用DMSO溶解，每孔中加入一定浓度的药物，稀释至需要的工作浓度。同时以紫杉醇为阳性对照。(4)置于37°C，5% CO2培养箱中分别培养72h。(5)MTT用生理盐水配成5mg/mL溶液，每孔中加入20yL，置于37°C、5% CO2孵箱中孵育4h。(6)吸出上清，加入100 μ LDMSO溶解沉淀物，用振荡器摇匀IOmin测定0D570值。(7)按公式计算药物对肿瘤细胞的抑制率:公式:肿瘤细胞生长抑制率=(1-实验组OD/对照组0D) X 100%根据72h的实验数据，由OD值计算生长抑制率，将抑制率与药物浓度做图，得出剂量反应曲线，计算出IC50l(半数抑制浓度)值。表I绵马素BB对肿瘤细胞的体外半数抑制率
权利要求
1.本发明涉及一种香鳞毛蕨中绵马素BB在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于香鳞毛蕨中绵马素BB加入不同的赋形剂后可加工成任何一种药剂学上所说的剂型。
2.权利要求1所述的一种香鳞毛蕨中绵马素BB在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于所述的肿瘤包括:人乳腺癌MCF-7细胞、人卵巢癌H0-8910细胞、人前列腺癌PC-3细胞、人结肠癌HCT-8细胞、人肺癌A549细胞、人白血病CEM细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肝癌H印G2细胞、人脑胶质瘤SHG-44细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞。
3.权利要求1所述的一 种香鳞毛蕨中绵马素BB在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于所述的剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、口服液或粉针剂，以及用现代制药界所公认的控释或缓释剂型。
全文摘要
本发明涉及了香鳞毛蕨中绵马素BB在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明利用体外MTT法、体内裸鼠实验以及核磁共振检测证明绵马素BB对于多种肿瘤细胞均具有较好的活性，尤其是对MCF-7肿瘤细胞。并且绵马素BB加入不同的赋形剂后可加工成任何一种药剂学上所说的剂型。香鳞毛蕨中绵马素BB具有毒副作用小，疗效确切，安全可靠等特点。香鳞毛蕨资源丰富，采集方便，提取工艺简单，便于工业化生产。
文档编号A61K31/122GK103191086SQ20121000161
公开日2013年7月10日 申请日期2012年1月5日 优先权日2012年1月5日
发明者付玉杰, 高畅, 孙瑶, 祖元刚, 王薇, 姚丽萍 申请人:东北林业大学, 付玉杰