专利名称：一种水包油型复方杉木油纳米乳组合物及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药领域，涉及一种可以抗菌消炎，消毒防腐，舒经活络，的复方杉木油、肉桂醛、牛至油药物新剂型，特别涉及一种黄色或无色澄清的水包油型复方杉木油纳米乳组合物及其制备方法。
背景技术：
杉木(Cunninghamia Lanceolata(Lamb)Hook)，是杉科杉树的多年生常绿乔木， 杉木味辛，微温，祛风止痛，散瘀止血，民间主要用于治疗慢性气管炎、胃痛、风湿关节痛， 外用跌打损伤，烧烫伤，外伤出血，过敏性皮炎等。从杉木中提取的杉木精油中的柏木脑 (Ce2drol)是杉木精油抗蚁、抗螨、抗菌的主要活性成分.杉木精油中含有α2杜松醇 (a2cadi2nol)，具有较强的抗螨活性。经研究发现杉木心材精油对水、空气食品中常见菌表现出强烈的抑菌生物活性。肉桂醛(Cirmamaldehyde)通常称为桂醛，无色至淡黄色油状液体，具有强烈的肉桂气味。天然存在于斯里兰卡肉桂油、桂皮油、藿香油、风信子油和玫瑰油等精油中。具有杀菌消毒防腐作用，特别是对真菌有显著疗效。已有相关研究表明对22种条件致病性真菌进行肉桂醛抗真菌实验，肉桂醛是抗真菌的活性物质，主要是通过破坏真菌细胞壁，使药物渗入真菌细胞内，破坏细胞器而起到杀菌作用。对其精油的药理作用在国内外已开展了一定的研究。牛至又名止痢草、土香薷、小叶薄荷，为唇形科牛至属多年生草本植物。牛至味辛、 性凉、无毒，全草可入药，具有清热解表、理气化湿、利尿消肿之功效。临床用于预防流感、治疗黄疸、中暑、发热、呕吐、急性胃肠炎、腹痛等症，其散寒解表功用胜于薄荷。美国农业部的 “植物化学和植物物种学”背景资料表明，牛至含有41多种抗菌化合物，是一种潜在的天然抗生素和药物生长促进剂。将其用于本发明不仅起到有效抑菌作用，还能够促进其他药物发挥更强的药理作用。但是，由于水油不相溶，且传统的杉木油，肉桂醛精油一般为外用涂抹，不易透皮和吸收。

发明内容
针对上述现有技术中存在的问题与缺陷，本发明的目的在于提供一种药物稳定性高，生物利用度高，并且溶解度高、缓释性好的水包油型复方杉木油纳米乳组合物。实现上述发明目的的技术方案是复方水包油型杉木油纳米乳组合物，它是由下列质量百分比的物质组成
表面活性剂30. 00% 45. 00%、杉木油0. 10% 10. 00%、牛至油0. 10% 6. 00%, 肉桂醛0. 109Γ10. 00，余量为蒸馏水，上述物质的质量百分比之和为100%。本发明涉及的表面活性剂是非离子表面活性剂，表面活性剂主要有天然表面活性剂和合成表面活性剂，天然表面活性剂无毒，价廉，但存在批间差异，对大生产很不利， 天然表面活性剂降低界面张力的能力不强。合成表面活性剂分为离子型表面活性剂和非离子型表面活性剂两大类，离子型表面活性剂有胺或季胺盐、脂肪酸盐、脂肪醇磺酸盐等，这类表面活性剂由于溶血作用强，而且使用受到PH值的限制。非离子表面活性剂可以与多种助表面活性剂合用，而离子型表面活性剂有强亲水性，需与清油的助表面活性剂合用以增强其增容作用。非离子型表面活性剂在PH值在3 10内均适用，受离子强度、无机盐、酸、 碱的影响小，本身毒性和刺激性小，能与大多数药物配伍，应用最广。HLB值在4 7的表面活性剂可制备W/0型纳米药物，HLB值在8 18的表面活性剂可制备0/W型纳米药物，考虑到纳米药物的易形成性和和稳定性，本发明选用的表面活性剂是HLB介于10 16之间的非离子型表面活性剂，或者与一种HLB < 10的非离子型表面活性剂复配。可选用的表面活性剂有聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL HLB=13. 5)，聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cren^phor RH40 HLB=14 16)，聚氧乙烯山梨醇油酸酯(Tween-80 HLB=Il),中的一种或两种混合物。由于本发明所用药物杉木油、牛至油、肉桂醛本身就是一种有机油溶剂，与所选表面活性剂、蒸馏水一起构成性质稳定的纳米乳，故不再使用其他油相。确定上述油做为本发明油相制成水包油型复方杉木油纳米乳组合物。本发明还有一个目的是提供上述复方杉木油纳米乳组合物的制备方法，具体包括以下步骤
1)称取表面活性剂、杉木油、肉桂醛、牛至油，蒸馏水备用；
2)将杉木油、肉桂醛、牛至油混合并充分搅拌均勻；
3)在室温下将表面活性剂加入步骤2)制备的油相中搅拌均勻，然后缓慢向混合物中滴加蒸馏水，不断搅拌直至体系呈透明的液体即可。本发明的复方杉木油纳米乳组合物具有良好的抗菌消炎，舒经活络等功效，可做成喷雾或直接涂抹于患处。本发明的水包油型复方杉木油纳米乳组合物与现有技术相比，具有以下优点
1)热力学稳定性高，制备时操作比较简单，澄清透明，不分相、不沉淀，贮存稳定性提
尚；
2)透光性好，任何不均勻性或沉淀物的存在易被发现，感观品质提高；
3)粒径小，在广IOOnm之间，透皮效果好，渗透能力强，能渗透进皮肤发挥药效易于吸收。4)缓释效果好，能延缓杉木油、肉桂醛、牛至油活性成分的消退时间，从而提高了上述精油的的生物利用度。5)方法工艺简单，适合规模化生产。实验例1复方杉木油纳米乳组合物稳定性测定实验
本发明经透射电子显微镜检测，液滴直径分布在1 IOOnm之间，外观为黄色或无色的透明液体，具有很好的稳定性 1)经时稳定性
经时稳定性是指纳米乳在室温自然变化条件下贮藏时，外观随时间延长而发生变化的程度。该复方纳米乳组合物持久透明，未发现浑浊或沉淀，则说明经时稳定性好。2)光稳定性试验取适量复方纳米药物液和空白纳米药物液装入青霉素玻璃瓶内，放置于日光下照射10d，于ld，3d，5d，10d取样。结果表明，复方纳米药物液仍保持澄清透明，颜色为黄色或无色，无变化。空白纳米药物液仍澄清透明，呈黄色或无色，未出现分层，浑浊等不稳定现象。)热贮稳定性
将复方杉木油纳米乳组合物置于试管，密封，置于37°C恒温水浴箱中贮存14天，该液热贮后外观透明。4)抗冷冻稳定性
将该复方杉木油纳米乳组合物在冰箱中_4°C保存一周后。恢复至室温。如果纳米乳在_4°C成固体，恢复至室温，恢复至透明，且放置一周后继续透明，则认为抗冷冻性好。)离心加速稳定性
将该复方杉木油纳米乳组合物置于试管，密封，在15000r/min的转速下离心20分钟， 没有分层，仍澄清透明。以下通过药效学对比试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。试验例2 复方杉木油纳米乳组合物与单方精油抑菌效果对比试验
本发明所制备的复方杉木油纳米乳组合物具有显著的抑菌消炎作用，其所含杉木油、 牛至油、肉桂醛等活性成分均能广泛的抑制大多数革兰氏阳性、阴性菌种，且肉桂醛对真菌也具有一定的抑菌效力，杉木油对空气食品中常见的菌表现有强烈的抑制活性。此外，本发明还具有舒经活络、消毒防腐等功效，对过敏性皮炎、流感有一定的防治作用。由于抑菌作用方便在体外进行定量研究实验验证，下面通过测定复方纳米乳组合物的抑菌圈和MIC值来进一步验证其的抑(抗)菌效果，方法如下 1)抑菌圈测定
采用纸片扩散法，分别将10%的复方杉木油纳米乳组合物、10%的杉木油单方精油、10% 的肉桂醛单方精油、10%的牛至油单方精油供试样，无菌条件下，将圆滤纸片(d = 6mm)浸入已称取好的试样中，取出自然风干后，贴到涂抹适宜菌液浓度菌悬液的培养基平板上， 每皿(d = 9 cm) 3片，各供试液3个重复，分在3个培养皿中完成，每皿中央以丙酮作对照，平皿置于培养箱适温下培养，观察结果。以出现抑菌圈提取物视为具有抑菌效果并测定抑菌圈大小。)最低抑菌浓度(MIC)测定
本实验将不同浓度的抑菌剂混合溶解于营养肉汤培养基中，然后接种细菌，通过细菌生长与否，确定抑(抗)菌剂抑制受试菌生长的最低浓度，即最小抑菌浓度(MIC，the minimum inhibitory concentration)。实验菌株选用革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌，革兰氏阴性菌大肠杆菌和伤寒沙门氏菌。肉汤培养基按肉浸液1%、蛋白胨1%、氯化钠0. 5%、蒸馏水IOOml配置，pH调试为7. 4.从菌种管移种后，于肉汤管内转接2次，以l T24h培养物作为使用菌种，将细菌浓度稀释为IX IO8个/ml，作为试验用细菌悬液。含抗菌剂培养基配置将复方杉木油纳米乳组合物用蒸馏水稀释成0. lmg/m广10mg/ml不同浓度的受试液， 取各稀释度受试液Iml加入到含Iml双倍浓度营养肉汤的试管中。取0. Iml细菌悬液接种于含复方杉木油纳米乳的营养肉汤的试管中，作为实验组样本。以同样方法接种细菌于不含任何药物的营养肉汤的试管中，作为阴性对照组样本。以同样方法接种细菌于含空白纳米乳的营养肉汤的试管中，作为空白纳米乳对照样本。以同样方法接种细菌于含清凉油的营养肉汤试管中，作为阳性对照组样本。将载药纳米乳样本、空白纳米乳样本、阳性对照组样本及阴性对照组样本放置37°C培养箱中，培养48小时，观察结果并记录。以各实验组完全没有菌生长所对应的抑(抗)菌剂浓度为该样品对应受试菌的MIC。
实验结果抑菌圈测定
表1复方纳米乳与单方精油抑菌效力对比(抑菌圈直径mm)
权利要求
1.一种水包油型复方杉木油纳米乳组合物，其特征在于，由下列质量百分比的原料组成表面活性剂30. 00% 45. 00%、杉木油0. 10%~ 10. 00%、牛至油0. 10% 6. 00%、 肉桂醛0. 109Γ10. 00，其余量为蒸馏水，上述原料的质量百分比之和为100%; 所述的是非离子型表面活性剂，是Tween-80，RH40，EL40中的任何一种。
2.根据权利要求1所述的复方杉木油纳米乳组合物，其特征在于所述的纳米乳组合物的液滴直径在1 IOOnm之间。
3.权利要求1所述复方杉木油纳米乳组合物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤1)称取表面活性剂、杉木油、肉桂醛、牛至油，蒸馏水备用；2)将杉木油、肉桂醛、牛至油混合并充分搅拌均勻；3)在室温下将表面活性剂加入步骤2)制备的油相中搅拌均勻，然后缓慢向混合物中滴加蒸馏水，不断搅拌直至体系呈透明的液体即可。
全文摘要
本发明公开了一种水包油型含杉木油、牛至油、肉桂醛的纳米乳剂，该制剂由表面活性剂30.00％～45.00％、杉木油0.10％～10.00％、牛至油0．10％～6.00％、肉桂醛0.10%~10.00%，余量为蒸馏水。本发明的水包油型复方杉木油纳米乳组合物，外观为黄色或无色透明液体，液滴直径分布在1～100nm之间，具有很好的稳定性、浸润性，透皮效果好，提高杉木油、牛至油、肉桂醛的生物利用度，延缓其在体内的药物代谢时间。本发明具有抗菌，消炎，杀螨，防腐等功效。本发明药物载体无毒性，无刺激性，安全性高，制备简单，成本低，无需特殊仪器即可大量生产，便于推广，在医药领域有广阔的市场前景。
文档编号A61K31/11GK102397325SQ20111037379
公开日2012年4月4日 申请日期2011年11月22日 优先权日2011年11月22日
发明者兰莹, 欧阳五庆, 王辉玲 申请人:西北农林科技大学