专利名称：一种乙酰谷酰胺注射液的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种脑功能改善药物乙酰谷酰胺注射液的制备方法，具体地说，涉及一种以乙酰谷酰胺为主成份的小容量注射剂，乙酰谷酰胺与磷酸盐缓冲液共同配制，经超声、冷藏、超滤等技术处理，得到乙酰谷酰胺超滤液，在避光条件下再与乙二胺四醋酸二钠溶液混合后，灌装，最后经过灭菌、灯检、包装制成小容量注射剂，属于化学药品制剂领域。该产品可以静脉滴注经临床试验证明可以静脉滴注，乙酰谷酰胺通过血脑-脊液屏障后分解为谷氨酸γ-氨基丁酸(GABA)，参与中枢神经系统的信息传递，参与蛋白质和糖类代谢，对细胞修复有重要作用，可改善神经细胞代谢，维持神经应激能力及降低血氨的作用，改善脑功能。主要用于肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等。
背景技术：
乙酰谷酰胺又名醋谷胺，亦称为脑素，是谷氨酰胺的乙酰化合物，为脑功能、神经功能改善药物，具有改善神经细胞代谢、维持神经应激机能及降低血氨的作用。通过血脑屏障，直接作用于大脑皮质，具有激活、保护和修复神经细胞的作用，改善脑的功能。促进大脑对氧和葡萄糖的利用，加强大脑能量代谢的运转，加快大脑功能恢复。在体内分布广泛，能透过血脑屏障，以脑、肝、肾浓度较高，在肾小管细胞内经谷氨酸分解，分解出氨而变成醋谷胺酸，氨从肾小管分泌排出，醋谷胺酸被吸收，参与体内代谢，目前，国内市场上的乙酰谷酰胺注射液有多家企业生产，均采用传统工艺配制而成，其存在的产品质量稳定性差，药液刺激性强，澄明度不合格率高，pH值下降，含量下降，疗效不稳定等问题始终无法解决。我公司乙酰谷酰胺注射液工艺的突破从根本上解决了上述问题。

发明内容
本发明的目的在于提供一种乙酰谷酰胺注射液的制备方法。
本发明所述的制备方法包括如下步骤先将乙酰谷酰胺与磷酸盐缓冲液共同配制，经超声、冷藏、超滤等技术处理，得到乙酰谷酰胺超滤液，在避光条件下再与乙二胺四醋酸二钠溶液混合后，灌装，最后经过灭菌、灯检、包装制成小容量注射剂。
本发明所述的制备方法具体过程如下
A)取配制量70～90％80～90℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至10～25℃，调pH5.0～6.0，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理10～30分钟，0～10℃冷藏12～48小时，用截留分子量1万～3万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量5～15％80～90℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.05～0.5％的活性炭，加热煮沸15～30分钟，降温至30～60℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理10～30分钟后定容，调pH值5.0～6.5，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
更为优选的制备方法包括如下步骤A)取配制量90％80℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至20℃，调pH5.5，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理15分钟，4℃冷藏24小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量10％80℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.1％的活性炭，加热煮沸20分钟，降温至50℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理10分钟后定容，调pH值5.5，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
上述制备方法中，采用截流分子量为1万的超滤膜超滤，是所配制药液中无效成份的控制步骤，所用超滤膜为市售产品。其生产商应为行业认可的生产单位。
上述制备方法中，避光条件是药液配制、灌装过程的关键步骤。
上述制备方法中，终端除菌过滤所使用的滤膜孔径为0.22μm。为使产品质量稳定，滤膜应尽可能由固定生产商供应。
上述制备方法中，为使产品质量稳定，所用pH值调节剂为30％氢氧化钠溶液，pH值严格控制在5.5～6.5。
本发明所述之乙酰谷酰胺注射液临床应用时静脉滴注，用5％或10％葡萄糖溶液250ml稀释后缓慢滴注。
本发明所述之乙酰谷酰胺注射液是脑功能、神经功能改善药物，具有改善神经细胞代谢、维持神经应激机能及降低血氨的作用。通过血脑屏障，直接作用于大脑皮质，具有激活、保护和修复神经细胞的作用，改善脑的功能。促进大脑对氧和葡萄糖的利用，加强大脑能量代谢的运转，加快大脑功能恢复。主要用于肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等。
本发明过程中乙酰谷酰胺与磷酸盐缓冲液共同配制并经冷藏、超声、超滤技术处理，同时严格控制pH值、温度、浓度、离子强度等工艺参数，确保了无效成份被完全去除，有效避免了乙酰谷酰胺的水解，减少了制剂中的有关物质，使制成的制剂稳定性好、刺激性小、澄明度改善、临床疗效确切。
具体实施例方式
下面用实施例进一步描述本发明，但所述实施例仅用于说明本发明而不是限制本发明。
实施例1A)取配制量70％80℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至15℃，调pH6.0，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理15分钟，4℃冷藏24小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量15％80℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.1％的活性炭，加热煮沸25分钟，降温至40℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理15分钟后定容，调pH值5.8，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
实施例2A)取配制量80％90℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至25℃，调pH5.7，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理30分钟，6℃冷藏12小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量15％80℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.2％的活性炭，加热煮沸15分钟，降温至50℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理10分钟后定容，调pH值6.2，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
实施例3A)取配制量75％85℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至20℃，调pH5.0，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理25分钟，6℃冷藏12小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量5％85℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.4％的活性炭，加热煮沸30分钟，降温至60℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理25分钟后定容，调pH值5.7，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
实施例4A)取配制量90％85℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至15℃，调pH5.4，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理10分钟，8℃冷藏48小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量10％85℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.05％的活性炭，加热煮沸25分钟，降温至30℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理30分钟后定容，调pH值6.1，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
实施例5A)取配制量85％80℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至20℃，调pH5.8，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理20分钟，5℃冷藏36小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液。
B)取配制量15％80℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.5％的活性炭，加热煮沸20分钟，降温至50℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。
C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理20分钟后定容，调pH值5.9，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
实验例1本实验例为本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的性状、pH值及注射剂项下有关的各项规定项目的检测。
性状本品为无色澄明液体，符合规定。
PH值取本品，依法测定(中国药典2000年版二部附录VIH)，pH值为4.5～7.0，符合规定。
其他符合注射剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版二部附录IB)。
实验例2本实验例为本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的定性测定。
鉴别取本品约5ml，加盐酸溶液(1→2)2ml，加热煮沸约30分钟，并不断补充水分，冷却后调节pH为5～6，去本品2ml，加茚三酮约2mg，放置或加热，溶液显蓝紫色，符合规定以上实验说明本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液中含有确定的组分。
实验例3本实验例为本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的含量测定。
含量测定精密量取本品适量(约相当于乙酰谷酰胺0.25g)置蒸馏瓶中，加入200ml水与20％氢氧化钠溶液75ml，加热蒸馏，馏出液导入含有甲基红-溴甲酚绿混合指示液数滴的4％硼酸溶液40ml中，先缓缓煮沸20分钟，随即增大火力，氨馏净，停止蒸馏，用硫酸滴定(0.5mol/L)滴定，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml硫酸滴定液(0.5mol/L)相当于18.82mg的C7H12N2O4。
标准规定含乙酰谷酰胺(C7H12N2O4)应为标示量的90％～110％。
通过三批的含量测定，结果见下表

实验例4本实验例为本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的安全性检查。
无菌取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录XIH)，符合规定。
热原按中国药典2000年版二部附录XID检查，符合规定。
长期毒性测定连续给药三个月观察血尿检查、病理检查均未见异常。
通过以上实验说明本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的安全性符合注射剂要求，无任何毒性作用，应用人体安全。
比较例1本比较例说明本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的澄明度优于用常规制备方法生产的。
澄明度判断标准
(1)未发现有异物或仅带微量白点者，作合格论。
(2)每瓶含短于0.5cm的毛和0.1～0.2mm的白点、白块或色点总数未超过5个者，作合格论。
(3)不合格率未超过5％，该批产品作合格论。有关概念白块系指用规定的检查方法，能看到有明显的平面或棱角的白色物质。
白点不能辨清平面或棱角的按白点计。
微量白点在规定的时间内仅见到3个或3个以下白点者。
异物包括玻璃屑、纤维、色点、色块及其它外来异物。
检查方法分别取采用本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液和采用常规工艺制备的产品各200支，按《澄明度检查细则和判断标准》和以上标准检查，结果见下表。

通过以上实验说明本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液的澄明度明显优于用常规制备方法生产的。
比较例2本比较例说明本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液在临床应用时刺激性较小。

比较例3
本比较例说明采用本发明所制备的多种微量元素注射液与采用常规制备方法生产的多种微量元素注射液通过六个月加速实验的稳定性比较，结果见下表。
标准规定含量含乙酰谷酰胺(C7H12N2O4)应为标示量的90％～110％。
pH值应为4.5～7.0澄明度合格率应不低于95％颜 色无色澄明液体 通过以上实验可以看出，发明组在经过加速实验六个月后，其含量、pH值、澄明度、颜色并未发生明显变化，而常规组的含量、pH值均有明显降低，澄明度、颜色均不符合规定，表明本发明所制备的乙酰谷酰胺注射液明显优于采用常规制备方法生产的。
权利要求
1.一种乙酰谷酰胺注射液的制备方法，所述的制备方法具体过程如下A)取新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温，调pH，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺超声处理后，遮光、冷藏，超滤，得超滤液；B)取新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入活性炭，加热煮沸，降温后脱炭过滤，得滤液；C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理，定容，调pH值，中间产品检验合格后，将药液经终端过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
2.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于包括如下步骤A)取配制量70～90％80～90℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至10～25℃，调pH5.0～6.0，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理10～30分钟，0～10℃冷藏12～48小时，用截留分子量1万～3万的超滤膜超滤，得超滤液；B)取配制量5～15％80～90℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.05～0.5％的活性炭，加热煮沸15～30分钟，降温至30～60℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液；C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理10～30分钟后定容，调pH值5.0～6.5，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
3.根据权利要求书1所述的制备方法，其特征在于包括如下步骤A)取配制量90％80℃新鲜注射用水，加入处方中的磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，搅拌溶解，降温至20℃，调pH5.5，避光，加入处方中的乙酰谷酰胺，超声处理15分钟，4℃冷藏24小时，用截留分子量1万的超滤膜超滤，得超滤液；B)取配制量10％80℃的新鲜注射用水，加入处方中的乙二胺四醋酸二钠，搅拌溶解，加入0.1％的活性炭，加热煮沸20分钟，降温至50℃后，用0.45μm滤膜脱炭过滤，得超滤液。；C)将上述两种药液在避光条件下混合，超声处理10分钟后定容，调pH值5.5，中间产品检验合格后，将药液经0.22μm滤膜除菌过滤，避光、冷藏、灭菌、灯检、包装，即得乙酰谷酰胺注射液成品。
4.根据权利要求书1、2、或3A)中注射用水量为配制量的70～90％，配制产品时其温度控制在10～25℃。
5.根据权利要求书1、2、或3所述的B)中活性炭的量为0.05～0.5％，煮沸时间为15～30分钟，脱炭温度为30～60℃。
6.根据权利要求书1、2或3所述的制备方法，其特征在于配制产品时pH控制在5.5～6.5。所用pH值调节剂为30％氢氧化钠溶液。
7.根据权利要求书1、2或3所述的制备方法，其特征在于超声处理的时间为10～30分钟。超声所使用的超滤膜为截留分子量1万～3万的超滤膜。
8.根据权利要求书1、2或3所述的制备方法，其特征在于在配制过程中的条件为避光。
全文摘要
本发明公开了一种脑功能改善药物乙酰谷酰胺注射液的制备方法。本方法将乙酰谷酰胺与磷酸盐缓冲液共同配制，经超声、冷藏、超滤等技术处理，得到乙酰谷酰胺超滤液，在避光条件下与乙二胺四醋酸二钠溶液共同配制、灌装，再经灭菌、灯检、包装后制成乙酰谷酰胺小容量注射剂。本工艺过程中乙酰谷酰胺与磷酸盐缓冲液共同配制并经冷藏、超声、超滤技术处理，同时严格控制pH值、温度、浓度、离子强度等工艺参数，确保了无效成份被完全去除，有效避免了乙酰谷酰胺的水解，减少了制剂中的有关物质，使制成的制剂稳定性好、刺激性小、澄明度改善、临床疗效确切。主要用于肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等。
文档编号A61P25/00GK1830425SQ20051005146
公开日2006年9月13日 申请日期2005年3月8日 优先权日2005年3月8日
发明者郭智华 申请人:巴里莫尔制药(通化)有限公司