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弹性纤维形成促进剂的制作方法
专利名称:弹性纤维形成促进剂的制作方法
技术领域:
本发明涉及将藻类或植物的提取物作为有効成分的弹性纤维形成促进剂。
背景技术:
提取藻类或植物而得的萃取物的使用伴随着最近追求天然的意向的提高,而存在优选代替石油系合成成分的趋势。而且,已研究了天然物的提取物的各种各样的生理活性,并进行了应用。褐藻类、红藻类、绿藻类等藻类的提取成分富含作为藻类特有的有効成分的粘多糖藻类、矿物质、维生素等。粘多糖包括海藻酸、角叉胶、琼脂等,已知其具有作为食物纤维的作用、特定的生理活性。例如,已报告发现红藻类的海人草具有弹性蛋白酶阻碍作用(专利文献I),除此以外,公开了来自褐藻类和红藻类的多糖藻类具有预防和/或修复组织·细胞的障碍的功能(专利文献2)。进而,还公开了从褐藻类、红藻类和绿藻类中得到的海藻提取物具有美白效果,能够对肌肤减轻斑点、雀斑,改善干燥肌、湿疹 皮肤粗糙,进而还对肌肤赋予光泽 张力(专利文献3) ο另夕卜,尤其是已知红藻类的柏桉藻科(Bonnemaisoniaceae科)的刺海门冬的提取物具有细胞赋活、抗炎作用、抗菌作用这3种功能(专利文献4)、具有真皮纤维芽细胞中的胶原蛋白产生促进作用(专利文献5和6)。另一方面,植物萃取物中也含有各种维生素藻类、矿物质藻类、糖藻类、油脂成分等,已知具有各种生理活性。作为其例子,可举出当药提取物、陈皮提取物、扁桃提取物、人参提取物、豌豆提取物、虎耳草提取物、桑提取物等中所含的、黑色素产生抑制作用、抗炎症作用、抗过敏作用、抗氧化作用等生理活性(专利文献7),从Orobanchaceae科植物提取而得的弹性蛋白酶阻碍剂(专利文献8)等。专利文献专利文献I :日本特开2009-046428号公报专利文献2 :日本特开2008-273919号公报专利文献3 :日本特开2001-139419号公报专利文献4 :日本特开2009-196969号公报专利文献5 :日本特开平10-330280号公报专利文献6 :日本特开平10-330281号公报专利文献7 :日本特开2002-293747号公报专利文献8 :日本特开2009-263279号公报
发明内容
本发明发现了迄今未知的藻类或植物的提取物的新的生理活性,其目的在于提供适合的用途。解决课题所需的手段本发明人为了解决上述课题进行了深入的研究,结果发现了藻类或植物的提取物具有弹性纤维形成促进能力,从而完成了本发明。S卩,本发明涉及含有藻类或植物的提取物作为有効成分的弹性纤维形成促进剂。上述藻类优选为红藻类和/或绿藻类。对于上述弹性纤维形成促进剂而言,上述红藻类为所述红藻类为选自属于顶丝藻目(Acrochaetiales)、紫球藻目(Porphyridiales)、红毛菜目(Bangiales)、海索面目(Nemaliales)、红盾藻目(Erythropeltidales)、弯枝藻目(Compsopogonales)、隐丝藻目(Cryptonemiales)、珊瑚藻目(Corallinales)、掌藻目(Palmariales)、石花菜目(Gelidiales)、Rhodogorgonales 目、厕脂藻目(Hildenbrandiales)、柏安藻目 (Bonnemaisoniales)、串珠藻目(Batrachospermales)、杉藻目(Gigartinales)、龙须菜目(Gracilariales)、红皮藻目(Rhodymeniales)、伊谷藻目(Ahnfeltiales)和仙菜目(Ceramiales)的红藻类中的至少一种红藻类。对于上述弹性纤维形成促进剂,上述红藻类为选自红翎菜科(Solieriaceae)J^藻科(Gigartinaceae)、海膜科(Halymeniaceae)、石花菜科(Gelidiaceae)和柏按藻科(Bonnemaisoniaceae)中的至少一种红藻类。对于上述弹性纤维形成促进剂,所述红藻类为选自麒麟菜(Eucheumamuricatum)、嫩杉藻(Gigartina tenella)、角又菜(Chondrus elatus)、稀毛娱蚁藻(Grateloupia sparsa(Okamura)Chiang)、石花菜(Gelidium)和剌海门冬(AsparagopsisArmata)中的至少一种红藻类。对于上述弹性纤维形成促进剂,所述绿藻类是选自团藻目(Volvocales)、环藻目(Sphaeropleales)、銷藻目(Oedogoniales)、胶毛藻目(Chaetophorales)、胶毛藻目(Chaetopeltidales、)、丝藻目(Ulotrichales)、石药目(Ulvales)、刚毛藻目(Cladophorales)、顶管藻目(Acrosiphoniales)、小球藻目(Chlorellales)、Microthamniales 目、Trebouxiales 目、Prasiolales 目、溪藻目(Mamiellales)、Monomastigales 目、Dolichomastigales 目、管枝藻目(Siphonocladales)、藤藻目(Caulerpales)、橘色藻目(Trentepohliales)、Oltmannsiellopsidales 目、松藻目(Codiales)、习习藻目(Bryopsidales)、Chlorodendrales 目、Dolichomastigales 目、Nephroselmidales目和域枝藻目(Dasycladales)中的至少一种绿藻类。对于上述弹性纤维形成促进剂,上述绿藻类是选自石莼目(Ulvales)石莼科(ulvaceae)的盘苔(Blidingia minima)或边缘盘苔(Blidingia marginata)中的至少一种。对于上述弹性纤维形成促进剂,其在植物萃取物中被发现,所述植物为选自松科、芸香料、蓼科、茜草科、紫葳科、唇形科、豆科和鼠李科中的至少一种植物。本发明还涉及含有上述中任一种弹性纤维形成促进剂的弹性纤维形成促进用组合物。本发明的弹性纤维形成促进用组合物中含有藻类或植物的提取物,换算为干燥重量,优选含有所述藻类或植物的提取物O. 000001 99重量%、更优选含有O. 00001 30重量%、进一步含有约O. 0001 10重量%、特别优选含有O. 001 5重量%。
上述弹性纤维形成促进用组合物可以为化妆品。上述弹性纤维形成促进用组合物可以为食品。本发明另外还涉及藻类和/或植物的提取物在制备弹性纤维形成促进剂中的应用。本发明另外还涉及藻类和/或植物的提取物在弹性纤维形成促进剂中的使用方法。上述藻类优选为红藻类或绿藻类。所述红藻类优选为选自属于顶丝藻目(Acrochaetiales)、紫球藻目(Porphyridiales)、红毛菜目(Bangiales)、海索面目(Nemaliales)、红盾藻目 (Erythropeltidales)、弯枝藻目(Compsopogonales)、隐丝藻目(Cryptonemiales)、珊瑚藻目(Corallinales)、掌藻目(Palmariales)、石花菜目(Gelidiales)、Rhodogorgonales目、厕脂藻目(Hildenbrandiales)、柏安藻目(Bonnemaisoniales)、串珠藻目(Batrachospermales)、杉藻目(Gigartinales)、龙须菜目(Gracilariales)、红皮藻目(Rhodymeniales)、伊谷藻目(Ahnfeltiales)和仙菜目(Ceramiales)的红藻类中的至少一种红藻类。所述红藻类优选为选自红翔菜科(Solieriaceae)、杉藻科(Gigartinaceae)、海膜科(Halymeniaceae)、石花菜科(Gelidiaceae)和柏按藻科(Bonnemaisoniaceae)中的至少一种红藻类。所述红藻类为选自麒麟菜(Eucheumamuricatum)、嫩杉藻(Gigartina tenella)、角又菜(Chondrus elatus)、稀毛娱蚁藻(Grateloupia sparsa(Okamura) Chiang)、石花菜(Gelidium)和剌海门冬(Asparagopsis Armata)中的至少一种红藻类。所述绿藻类是选自团藻目(Volvocales)、环藻目(Sphaeropleales)、鞘藻目(Oedogoniales)、胶毛藻目(Chaetophorales)、胶毛藻目(Chaetopeltidales、)、丝藻目(Ulotrichales)、石药目(Ulvales)、刚毛藻目(Cladophorales)、顶管藻目(Acrosiphoniales)、小球藻目(Chlorellales)、Microthamniales 目、Trebouxiales 目、Prasiolales 目、溪藻目(Mamiellales)、Monomastigales 目、Dolichomastigales 目、管枝藻目(Siphonocladales)、藤藻目(Caulerpales)、橘色藻目(Trentepohliales)、Oltmannsiellopsidales 目、松藻目(Codiales)、习习藻目(Bryopsidales)、Chlorodendrales 目、Dolichomastigales 目、Nephroselmidales 目和域枝藻目(Dasycladales)中的至少一种绿藻类。上述绿藻类优选为盘苔(Blidingia minima)或边缘盘苔(Blidingia margmata)。上述植物优选为选自松科、芸香料、蓼科、茜草科、紫葳科、唇形科、豆科和鼠李科中的至少一种植物。根据本发明,可提供将藻类或植物的提取物作为有効成分的弹性纤维形成促进齐U。进而,可提供含有这类的弹性纤维形成促进剂的弹性纤维形成用组合物,其为化妆品或食品。
图I是在使用培养细胞进行的体外评价中,将含有种类不同的红藻类的提取物或绿藻类的提取物的弹性纤维形成促进剂的效果与对照(上左端)进行比较,并通过荧光显色所显示的照片。图2是将图I的照片中的各个样品的荧光量数量化而得的曲线图。图3是将含有植物的方儿茶(学名Uncaria gambir Roxb ;日文了七> Y夕)萃取物的弹性纤维形成促进剂的效果(右)与对照(左)比较,并通过荧光显色所显示的照片。图4是将图3的照片中的各个样品的荧光量数量化而得的曲线图。图5是在使用了培养细胞进行的体外评价中,将含有种类不同的藻类的提取物或植物的提取物的弹性纤维形成促进剂的效果与对照比较,并将荧光显色的量数量化而得的曲线图。
具体实施例方式皮肤、血管、肺等特定的脏器、韧带等的弹力提高或维持不仅通过细胞、还通过包括细胞外基质在内的组织结构来确保。细胞相对于伸缩等对外部强度的耐受性较弱,因此在细胞周围形成细胞外基质,从而确保了组织的形状。作为细胞外基质,有胶原蛋白纤维、粘多糖(透明质酸、角质素硫酸、硫酸乙酰肝素、软骨素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等)、弹性纤维(弹性纤维)等。虽然胶原蛋白纤维、粘多糖相对于外部强度无法伸缩,但是弹性纤维具有即使拉伸也能够复原的特性、即弹性,在需要伸缩功能的动脉、肺、皮肤的组织中弹性纤维是重要的因子。可认为弹性纤维是弹性蛋白在微纤维这样的纤维的周围进行沉积 交联而形成的。弹性纤维的代谢回转非常慢,因此,产生因年龄的增加等导致弹性纤维劣化、断裂的结果,或者由于从炎症细胞分泌的蛋白酶等外在的要因而导致的弹性纤维劣化、断裂的结果,皮肤的松弛,动脉硬化,肺非正常增大而导致的肺气肿等。在动脉中,弹性纤维占大动脉的质量的一半左右,吸收脉压(收缩期压-扩张期压)。若弹性纤维的功能降低,则动脉变成硬的血管,脉压上升。脉压的上升会使心脏病的预后恶化。期待弹性纤维能够再生的状态或疾病有肺气肿、血管损伤、皮肤松弛症、创伤、弹性纤维劣化(例如由年龄增加或紫外线引起的劣化、皮肤的松弛)、皮肤粗糙、动脉硬化、大动脉瘤、加龄黄斑变性症、会阴疝气、肛门疝气、脑底动脉瘤、消化管运动障碍、褥疮等,利用本发明的弹性纤维形成促进剂,能够改善、预防需要弹性纤维的伸缩功能的疾病或状态。本发明所述的弹性纤维形成促进能力是指在微纤维的周围促进弹性蛋白进行沉积、交联的能力,不管其促进的程度如何,只要与不实施这种处置的情况相比,呈弹性蛋白的沉积在某种程度上得到促进的状态即可。在本发明中,发现了藻类或植物的提取物具有促进形成这类弹性纤维的作用。来自藻类或植物的提取物可以单独使用I种或者组合使用2种。作为这类的藻类或植物,没有特别限定,另外,只要不损害有效成分的弹性纤维形成促进作用,提取物是指来自藻类或植物的水可溶性成分、酸可溶性成分、碱可溶性成分、有机溶剂可溶性成分等。在本发明中,作为具有促进形成这类弹性纤维的作用的成分,只要为提取自藻类的提取物的成分即可,没有特别限定。例如,可以含有在红藻类的提取物中含有的角叉胶、硅。
角叉菜胶(cairageenan,力9 ¥ f - > )在日语中也称作力9 ¥ f >、力9夕·、于>、力9 V 二 >、且主要为从沙菜科、红翎菜科、嫩杉藻科的红藻类的海藻类中提取而得的多糖类,大致可分为I型、K型和λ型这三种。t型角叉菜胶具有有流动性的粘性且可形成弹力较弱的凝胶,K型角叉菜胶形成硬脆的凝胶,λ型角叉菜胶在冷水中可溶而形成粘稠的水溶液、且没有凝胶化能力。在本发明中使用的角叉菜胶适合使用t型、λ型或K型中的任一种。在本发明中,在使用角叉菜胶的情况下,可以为直接从红藻类等中提取的粗提取物,进而可以为对其进行精制处理而得的提取物,也可以为通过合成而得的提取物。在此,角叉菜胶的提取法可以与上述海藻类提取物的调制方法相同。角叉菜胶的主要成分为直链含硫的多糖藻类的一种,是由D-半乳糖(或3,6-无水-D-半乳糖)和硫酸构成的阴尚子性_分子化合物。在某方式中,本发明的弹性纤维形成促进剂例如含有在藻类中富含的硅等矿物质作为有效成分的一种。硅大多包含在骨、关节、血管、皮肤、毛发、齿、爪等中,是维持生命所不可欠缺的微量元素。还具有使存在于人体的组织内的胶原蛋白变强的作用,进而还具有 在骨的形成的初期阶段有助于钙的胶原蛋白沉着且使骨变强的作用。有如下的报告若硅减少,则骨、爪变脆,或脂肪易于附着在血管中。本发明所述的藻类特别是指红藻类或绿藻类,这些红藻类或绿藻类的提取物是利用常规的方法从红藻类或绿藻类中提取的萃取物。在此,红藻类例如是指属于顶丝藻目(Acrochaetiales)、紫球藻目(Porphyridiales)、红盾藻目(Erythropeltidales)、弯枝藻目(Compsopogonales)、掌藻目(Palmariales)、Rhodogorgonales 目、柏安藻目(Bonnemaisoniales)、串珠藻目(Batrachospermales)、伊谷藻目(Ahnfeltiales)、红毛菜目(Bangiales)(其中的 Bangia Fuscopurpurea、Bangia gloiopeltidicola)、海索面目(Nemaliales)(其中的 Dermonema pulvnatum、Dichotomaria falcata、Scinaia japonica、Scinaia Cottonii、Gloiophloea okamurae、Galaxaura Fastigiata、Helminthocladia australis、Namalion vermiculare)、隐丝藻目(Cryptonemiales)(其中的 Grateloupia filicina)、珊瑚藻目(Corallinales)(其中的 Calliarthronyessoensis、Fosliella zostericola、Serraticardia Maxima)、石花菜目(Gelidiales)(其中的 Acanthopeltis japonica、Gelidiella acerosa、Geridium amansii、Geridium japonicum、Gelidium pacificum、Pterocladia capillacea、Beckerellasubcostata)、胭脂藻目(Hildenbrandiales)(其中的 Hildenbrandia rubra)、桕安藻目(Bonnemaisoniales)(其中的 Asparagopsis taxiformis、Delisea japonica)、Gigartinales 目(其中的 Caulacanthus OkamuraiΛ Tylotus lichenoides、Neodilseayendoana、Pikea californica、Gloiopeltis complanata、Gloiopeltis furcata、Gigartina intermedia、Gigartina teedii、Gigartina tenella、Chondrus elatus、Chondrus giganteus、 Chondrus ocellatus、 Chondrus verrucosus、 RhodoglossumPulcherum、Gloiosiphonia capillaris、Cryptohemia luxurians、Gratepoupia angusta、Grateloupia articulata、Carpopeltis asiatica、Carpopeltis carnosa、Grateloupiacatenata、Carpopeltis divaricata、Grateloupia divaricata、Grateloupia elata、Grateloupia elliptica、Grateloupia lanceolata、Grateloupia livida、Prionitispatens、Grateloupia ramosissima、Cryptonemia schmitziana、Cyrtymenia sparsa、Grateloupia turuturu、Carpopeltis affinis、Grateloupia okumurai、Polyopespolyideoides、Carpopeltis flabellata、Carpopeltis cornea、Carpopeltis crispata、Hypnea charoides、Hypnea chordacea、Hypnea cornuta、Hypnea flagelliformiHypneaflexicaulis、Hypneajaponica、Hypnea saidana、Hypnea variabilis、Callophylliscrispata、Chondrococcus hornemannii、Nemastoma lancifolia、Gigartina ochotensis、Peyssonnelia caulifera、 Phacelocarpus japonicus、 Ahnfeltia concinna、Gymnogongrus flabelliformis、Ahnfeltia paradoxa、Stenogramma interrupta、Plocamium recurvatum、 Plocamium telfairiae、 Chondrococcus hornemannii、Chondrococcus japoicus、 Sarcodia ceylanica、 Schizymenia dubyi、 Meristothecapapulosa、Solieria robusta、龙须菜目(Gracilariales)(其中的 Gracilaria compress、Gracilaria incurvata、Gracilaria rhodocaudata、Corallopsis opuntia、Gracilariatextorii、Gracilaria verrucosa、红皮藻目(Rhodymeniales)(其中的 Champiaparvula、Coeloseira pacifica、Ceratodictyon spongiosum、Chrysymenia wrightii、Lomentaria catenata、Lomentaria hakodatensis、Coelarthrum mue11eri、Coelothrixirregularis、Rhodymenia intricata、仙菜巨(Ceramiales)(其中的 Campylaephora crassa、Campylaephora hypnaeoides、Centroceras clavulatum、Ceramium japonicum、Ceramium kondoi、Ceramium paniculatum、Ceramiu tenerrimum、Griffighsia japonica、Griffithsia subcylindrica、Herpochondria corallinae、Microcladia elegans、Psilothallia dentata、Spyridia elongata、Wrangelia argus、Acrosorium flabellatum、Acrosorium polyneurum、Acrosorium uncinatum、Erythroglossum pinnatum、Nienburagiajaponica、Acanthophora orientalis、Acrocystis nana、Benzaitenia yenoshimensis、Chondria crassicaulis、Chondria dasyphylla、Digenea simplex、pterosiphoiafibrillosa、Laurencia intermedia、Laurencia japonensis、Laurencia nipponica、Laurencia okamurae、Laurencia papillosa、Laurencia pinnata、Laurencia saitoi、Laurencia undulate、Leveillea jungermannioides、Rhodomela larix、Polysiphoniasenticulosa、Symphyocladia ratiuscula、Symphyocladia marchantioides)的藻类,以上括号中表不学名,以下同。其中,在本发明中特别优选使用的红藻类是属于红翎菜科(Solieriaceae)、杉藻科(Gigartinaceae)、海膜科(Halymeniaceae)、石花菜科(Gelidiaceae)和柏按藻科(Bonnemaisoniaceae)的红藻类,代表性地可以举出红翔菜科的粗壮红翔菜(学名Solieria robusta)、麟麟菜、耳突卡帕藻(Kappaphycus cottonii)、Eucheumaokamurae (日文才力今1J寸 < )、Betaphycus gelatinum、Eucheuma serra、Eucheuma cupresoideum,嫩杉藻科可代表性地举出嫩杉藻、角又菜,Carpopeltisasiatica( A力于/ Jj )科可代表性地举出Cyrtymenia sparsa,石花菜科可代表性地举出石花菜,桕桉藻科可代表性地举出剌海门冬。绿藻类是指属于团藻目(Volvocales)、环藻目(Sphaeropleales)、鞘藻目(Oedogoniales)、胶毛藻目(Chaetophorales)、胶毛藻目(Chaetopeltidales、)、小球藻目(Chlorellales)、Microthamniales 目、Trebouxiales 目、Prasiolales目、溪藻目(Mamiellales)、Monomastigales 目、Dolichomastigales 目、橘色藻目(Trentepohliales)ΛOltmannsielIopsidales 目 ΛChlorodendrales 目 ΛDolichomastigales目、Nephroselmidales 目、丝藻目(Ulotrichales)(其中的 Collinsiella cava、Collinsilella tuberculata)、石药目(Ulvales)(其中的 Ulva arasakii Chihara、Ulvaconglobata、Ulva fasciata、Enteromorpha intestinal is、Enteromorpha linza、Ulvapertusa、Ulva reticulata、Letterstedtia japonica)、冈丨J毛藻目(Cladophorales)(其中的 Anadyomene wrightii、Chaetomorpha aerea、Chaetomorpha crassa、Chaetomorphalinum、 Chaetomorpha spiralis、 Cladophora conchopheria、 Cladophora japonica、Cladophora ohkuboana、Cladophora sakaii、Cladophora wrightiana)、丁页管藻目(Acrosiphoniales)(其中的 Urospora penicilliformis)、管枝藻目(Siphonocladales)(其中的 Boodlea coacta、Boergesenia forbesii、Dictyosphaeria cavernosa、Valoniaaegagropila、Valonia aegagropila、Valonia ventricosa)、藤藻目(Caulerpales)(其中的 Caulerpa brachypus、Caulerpa fergusoni、Caulerpa okamurai、Avrainvillealacerata、 Chlorodesmis formosana、 Chlorodesmis comosa、 Udotea javensis)、 松藻目(Codiales)(其中的 Codium arabicum、Codium barbatum、Codium coarctatum、Codium contractum、Codium cylindricum、Codium fragile、Codium intricatum、Codium latum Suringarλ Codium mamillosum、 Codium pugniformis、 Codium divaricatum、习习藻目(Bryopsidales)(其中的 Bryopsis harveyana、Bryopsis maxima、Bryopsistriploramosa)、域枝藻目(Dasycladales)(其中的 Bornetella ovalis、Neomerisannulata、Acetaburaria dentate、Acetabularia ryukyuensis、Halicoryne wrightii)等的藻类。没有特别限定,代表性地示出石莼目(Ulvales)石莼科(Ulvaceae)盘苔属(Blidingia)的盘苔(Blidingia minima)、边缘盘苔(Blidingia marginata)。本发明中的弹性纤维形成促进作用在植物萃取物中被发现,所述植物萃取物特别优选为选白松科、芸香料、蓼科、茜草科、紫葳科、唇形科、豆科和鼠李科中的至少一种植物的萃取物。另外,特别优选为松科云杉属的云杉、芸香料柑橘属的酸橙、蓼科的蓼蓝(学名Polygonum tinctorium)、菌草科的方儿荼(Uncaria gambir Roxb)、紫葳科的斑叶钟花树(夕< r ^ f ¥ /寸)、唇形科的黄芩、豆科的甘草、和鼠李科的枣(Ziziphusjujuba)中的至少一种植物的萃取物。在此,上述植物的部位没有特别限定,例如特别优选使用的是来自酸橙的果皮,蓼蓝的叶,甘草的根以及枣的果实部位的提取物。本发明的藻类或植物的提取物所具有的优异的弹性纤维形成促进能力是指在微纤维的周围促进弹性蛋白进行沉积、交联的能力,不管其促进的程度如何,只要与不实施这种处置的情况相比,呈弹性蛋白的沉积在某种程度上得到促进的状态即可。以下,对本发明的内容详细地进行说明。藻类或植物的提取物可以使用来自天然物的粗提取液,还可以使用从粗提取液中分离精制而得的提取液。作为得到藻类或植物的提取物的方法,没有特别限定,可釆用通常的提取法。粗提取液例如可通过利用剪裁机·切片机·切割机·削皮机等将全部藻类或全部植物的特定的部位切细,对切细后的藻类和植物使用单独或者组合水、热水或有机溶剂而得的溶剂进行提取而得到。作为有机溶剂,可举出甲醇、乙醇、I-丙醇、2-丙醇、I-丁醇、2-丁醇等醇类,醋酸甲、醋酸乙酯等酯类,丙酮等酮类,甲醛、二甲基亚砜等。
另外,溶剂可以使用室温或常温的溶剂,还可以使用加热溶剂、热溶剂(将溶剂加热至沸点附近)。进而,能够在酸、碱的条件下进行提取。作为酸,可举出盐酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸,或者醋酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸、蚁酸、丙酸等有机酸。作为碱,优选使用碱性无机盐,可例示出氢氧化钾、氢氧化钠等。另外,还可利用冷冻干燥粉末化法、高压法、超高压法。举出粗提取物的提取条件的一例。在提取溶剂为有机溶剂的情况下,只要为溶剂的沸点以下即可,提取温度就没有特别限定,优选在I 100°c、更优选在20 100°C的范围搅拌I 24小时、优选搅拌I小时 10小时。另外,在提取溶剂为水的情况下,提取时的温度没有特别限定,有时还利用基于加压热水进行提取的方法,因此优选为约O 200°C、更优选为约20 130°C。另外,反应时间没有特别限定,优选设定为数秒 数天,更优选设定为30分钟 6小时。 反应温度和反应时间根据溶剂的种类和浓度适当选择即可。只要如上所述地进行提取,就能够充分地提取具有弹性纤维形成能力的成分。对得到的提取物进行离心分离,得到其上清液作为提取液。在所述的提取液中含有水可溶性、酸可溶性、碱可溶性或有机溶剂可溶性的多糖部分。作为由粗产物对藻类或植物的提取物进行分离精制的方法,例如有如下方法添加西吡氯铵等季铵盐,使藻类或植物的提取物沉淀,利用醇溶液进行清洗的方法;利用使用DEAE纤维素等阴离子交换树脂等的色谱法的方法。如上所述进行提取、精制而得的藻类或植物的提取物溶液可以直接使用,也可以用稀释液进行稀释或进行浓缩而用作萃取物,进而还可通过冷冻干燥等形成干燥粉末物,或调制为糊状使用。在本发明中,作为如上所述提取、精制而得的藻类或植物的提取物,可以直接使用,但是在含有有机溶剂的情况下,优选通过减压蒸馏等将有机溶剂除去。另外,在本发明中,该提取液可以使用液状的,但是根据需要,可以通过进行减压干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等干燥处理而将液体分减少或除去,从而使用形成为浓缩液状、半固体状、固体状或粉末状的提取物。作为本发明中的藻类或植物的提取物,还可使用市售品。例如,作为红藻类的提取物,可例示来自刺海门冬(Asparagopsis armata)的嫩芽的细胞提取物PHYK0SIL2000 (EXSYM0L ΜΟΝΑΚΟ 制)、刺海门冬(Asparagopsis armata)的提取物 AsparcidP (EXSYM0L ΜΟΝΑΚΟ 制)、皱波角叉菜(Chondrus crispus)的提取物 GELALG(BiotechMarine 公司制)、胶石花菜(Gelidium carti Iagineum)的提取物 RH0DYSTER0L S/BDI CAPRI LAT (Biotech Marine 公司制)、条斑紫菜(Porphyra yezoensis)的提取物IPF-100K、7 iv ^ 7 ^ )V {均为ICHIMARU PHARC0S公司制),作为绿藻类的提取物可例不来自石药科(ulvaceae)的盘苔(Blidingia minima)的提取物 SAVE MARINE (BiotechMarine公司),作为植物萃取物,可例示配合酸橙果皮萃取物和松科的云杉萃取物而得的云杉液B (ICHIMARU PHARC0S公司),配合寥科的寥蓝叶的萃取物籃> 一口 > (株式会社林原生物化学研究所)、菌草科的方儿茶(Uncaria gambir Roxb)提取物即7 T A 2 7夕; ·了七”夕BdCHIMARU PHARC0S公司)、唇形科的黄芩、豆科的甘草根和鼠李科的枣果实萃取物而得的7 9 '巧一''/ (白色)(丸善株式会社)等,但并不限于此。将本发明的藻类或植物的提取物作为有效成分的弹性纤维形成促进剂可用于预防、治疗或改善需要弹性纤维再生的状态或疾病,例如肺气肿、肺纤维症、血管损伤、皮肤松弛症、创伤、弹性纤维劣化(例如因年龄增加或紫外线而引起)、皮肤固化症、皮肤粗糙、动脉硬化、大动脉瘤、加龄黄斑变性症、会阴疝气、肛门疝气、脑底动脉瘤、消化管运动障碍、褥疮等,除此以外,还可用于预防、改善皮肤的松弛、褶皱这样的美容目的。另外,本发明的弹性纤维形成促进剂还可用作具有弹性纤维的再生能力的细胞的培养用试药等。进而,在人工皮肤、皮肤模型、人工血管等人工组织的制作中发挥作用。进而,还可考虑针对尚未充分弄清楚的弹性纤维自身的研究的应用,在非常广泛的范围中有用。本发明的弹性纤维形成剂可以医药品、非药品、食品、化妆品等可广泛地利用的任意制剂或组合物的形态供于使用,优选为可作为功能性食品或化妆品加以利用的制剂或组合物。含有本发明的弹性纤维活性促进剂的组合物在采用医药品、非药品、食品、化妆 品中的任一种形态的情况下,藻类或植物的提取物的含量换算成干燥重量,例如设定为O. 000001 99重量%即可,更优选设定为约O. 00001 30重量%、进一步优选设定为约O. 0001 10重量%、特别优选设定为O. 001 5重量%。如果在上述范围,则在医药品、非药品、食品、化妆品的使用中可显现充分的弹性纤维形成作用,可得到改善或预防皮肤的伸缩性的效果。在将本发明用于医药品或健康食品的用途中时,藻类或植物的提取物的给药量对于成人每日,换算成干燥重量,优选设为O. 0001 10g/kg,更优选设为O. 001 5000mg/kg。如果为上述范围,则能够改善或预防需要弹性纤维的伸缩功能的疾病或状态。内服用形态作为本发明的有效成分的藻类或植物的提取物还可与在药学上被许可的载体配合,制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂等固体制剂,或者糖浆剂、注射剂等液状制剂,从而经口或非经口地给药。进而,可举出坐剂、贴剂、吸入剂、点滴剂、经皮吸收剂、经黏膜吸收剂。上述制剂可以含有常规方法的添加剂。作为在药学上被许可的载体,可使用惯用的各种有机或无机载体物质作为制剂原料,可配合固体制剂中的赋形剂、润滑剂、结合剂、崩解剂;液体制剂中的溶剂、溶解助剂、悬浊剂、等张剂、缓冲剂、无痛化剂等。另外,根据需要还可使用防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂等制剂添加物。作为赋形剂的优选的例子,例如可举出D-山梨醇、甘露醇、木糖醇等糖醇,葡萄糖、白糖、乳糖、果糖等糖类,结晶纤维素、羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠、磷酸氢钙、小麦淀粉、水稻淀粉、玉米淀粉、马铃薯淀粉、糊精、环糊精、轻质硅酸酐、氧化钛、硅酸铝酸镁、滑石、高岭土等。作为结合剂的优选例,例如可举出甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素等纤维素衍生物,聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、丙烯酸系高分子、明胶、阿拉伯胶、支链淀粉、α化淀粉、琼脂、胺黄树胶、海藻酸钠、海藻酸丙二醇酯等。作为崩解剂的优选例,例如可举出淀粉、低取代度羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、羟丙基淀粉、部分α化淀粉等。作为溶剂的优选例,例如可举出注射用水、醇、丙二醇、聚乙二醇、芝麻油、玉米油等。
作为润滑剂的优选例,可举出硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸聚烃氧基酯、棕榈醇、滑石、固化油、蔗糖脂肪酸酯、二甲基聚硅氧烷、蜜蜡、白蜂蜡等。作为溶解助剂的优选例,例如可举出聚乙二醇、丙二醇、D-甘露醇、苯甲酸苄酯、乙醇、三氨基甲烷、胆固醇、三乙醇胺、碳酸钠、柠檬酸钠等。作为悬浊剂的优选例,例如可举出硬酯酰三乙醇胺、月桂基硫酸钠、月桂基氨基丙酸、卵磷脂、杀藻铵、苄索氯铵、单硬脂酸甘油酯等表面活性剂;例如举出聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素等亲水性高分子等。作为等张剂的优选例,例如可举出氯化钠、甘油、D-甘露醇等。作为缓冲剂的优选例,例如可举出磷酸盐、醋酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐等缓冲液等。作为无痛化剂的优选例,例如可举出苄醇等。作为防腐剂的优选例,例如可举出对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苄醇、苯乙醇、脱氢乙酸、山梨酸等。作为抗氧化剂的优选例,例如可举出亚硫酸盐、抗坏血酸等。作为制造本发明的液状制剂或固形制剂的方法,只要包括将藻类或植物的提取物 与制剂原料混合,制造液体制剂或固体制剂的工序,没有特别限定,可使用公知的方法。固体制剂制备例例如,可例示出如下方法将含有藻类或植物的提取物和制剂原料的制剂组合物进行混炼,使其通过网筛,从而将成型的挤出造粒物粉碎、整粒的方法;在上述制剂组合物中加入混炼水,利用立式造粒机进行成型,在搅拌造粒后,利用COMIL研磨机进行粉碎·过筛的方法;利用辊式加压机将上述制剂组合物压缩后,利用辊式造粒机进行粉碎过筛的方法;以及搅拌造粒后进行流动干燥的方法。另外,例如在通过直接打片进行制造的情况下,在将含有藻类或植物的提取物和制剂原料的制剂组合物混合后,直接投入到打片机中进行打片即可。皮肤外用剂形态将本发明的藻类或植物的提取物作为有效成分的弹性纤维形成促进剂可采用公知的形态作为化妆品或非药品的外用剂形态。作为这样的形态,例如可举出液体剂、悬浊齐 、乳剂、膏剂、软膏剂、凝胶剂、涂剂、洗剂、气雾剂、粉末剂、泥罨剂、使药液浸渗在无纺布等片材中的片材剂、唇棒这样的棒剂等。其中,优选以液体剂、悬浊剂、乳剂、膏剂、软膏剂、凝胶剂、洗剂、凝胶剂的形态使用。通过形成上述的形态,能够充分地发挥弹性纤维形成效果。皮肤外用剂中,除了添加藻类或植物的提取物外,在不损害本发明的效果的范围内,可以配合添加在外皮用剂(化妆品、非药品、医药品)中公知的添加剂,例如可配合表面活性齐U、油分、醇类、保湿剂、增稠剂、保存剂(防腐剂)、抗氧化剂、螯合剂、PH调整剂、稳定剂、分散剂、香料、着色剂、色素、珍珠光泽赋予剂、血行促进成分、保湿成分、紫外线吸收成分、紫外线散射成分、清洗成分、抗菌成分、收敛成分、维生素类、氨基酸类、抗老化成分、抗炎症成分、美白成分、角质软化成分、细胞赋活成分、水等。添加剂可以单独使用I种,或者组合使用2种以上。另外,化妆料组合物的具体用途没有特别的限定,可举出化妆水、乳液、乳霜、美容液、防晒用化妆品、面膜、护手霜、身体乳液、身体乳霜这样的基础化妆品;洗面奶、卸妆产品、身体香波、洗发香波、护发素这样的清洗用化妆品;粉底、隔离霜、唇霜、口红、腮红这样的化妆用化妆品;沐浴乳等。作为基剂或载体,可举出流动石蜡、角鲨烷、凝胶化烃(Plastibase等)、地蜡、α-烯烃低聚物、轻质流动石蜡这样的烃;甲基聚硅氧烷、交联型甲基聚硅氧烷、高聚合甲基聚硅氧烷、环状硅酮、烷基改性硅酮、交联型烷基改性硅酮、氨基改性硅酮、聚醚改性硅酮、聚甘油改性硅酮、交联型聚醚改性硅酮、交联型烷基聚醚改性硅酮、硅酮·烷基链共改性聚醚改性硅酮、硅酮·烷基链共改性聚甘油改性硅酮、聚醚改性支链硅酮、聚甘油改性支链硅酮、丙烯酸硅、苯基改性硅酮、硅酮树脂这样的硅酮油;乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素这样的纤维素衍生物;聚乙烯吡咯烷酮;角叉菜胶;聚乙烯丁酸酯;聚乙二醇;二噁烷;丁二醇己二酸聚酯;豆蘧酸异丙酯、辛基十二醇肉豆蘧酸酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸棕榈酯、异壬酸异壬酯、四2-乙基己酸季戊四醇酯这样的酯类;糊精、麦芽糖糊精这样的多糖类;乙醇、异丙醇这样的低级醇;乙二醇单甲醚、乙二醇单乙醚、乙二醇单丙醚、二乙二醇单甲醚、二乙二醇单乙醚、二乙二醇单丙醚、二乙二醇单丁醚、丙二醇单乙醚、丙二醇单丙醚、二甘醇单乙醚、二甘醇单丙醚这样的二醇醚;聚乙二醇、丙二醇、1,3_ 丁二醇、丙三醇、异丙二醇等多元醇;水等水系基剂等。基剂或载体可以单独使用I种或组合使用2种以上。
作为抗氧化剂,可举出二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、山梨酸、亚硫酸钠、抗坏血酸、异抗坏血酸、L-半胱氨酸盐酸盐等。作为表面活性剂,例如可举出失水山梨糖醇单异硬脂酸酯、失水山梨糖醇单月桂酸酯、失水山梨糖醇单棕榈酸酯、失水山梨糖醇单硬脂酸酯、双甘油失水山梨糖醇五-(2-乙基己酸)酯、双甘油失水山梨糖醇四-(2-乙基己酸)酯这样的失水山梨糖醇脂肪酸酯类;单硬脂酸丙二醇酯这样的丙二醇脂肪酸酯类;聚氧乙烯固化蓖麻油40(HC0-40)、聚氧乙烯固化蓖麻油50(HC0-50)、聚氧乙烯固化蓖麻油60(HC0-60)、聚氧乙烯固化蓖麻油80等固化蓖麻油衍生物;聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单月桂酸酯(Polysorbate20)、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单硬脂酸酯(Polysorbate60)、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单油酸酯(Polysorbate80)、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇异硬脂酸酯这样的聚氧乙烯失水山梨糖醇脂肪酸酯类;聚氧乙烯单椰油脂肪酸甘油酯;甘油烷基醚;烷基葡糖苷;聚氧乙烯十六烷基醚这样的聚氧化烯烷基醚;硬脂酰胺、油胺这样的胺类;聚氧乙烯·甲基聚硅氧烷共聚物、月桂基PEG-9聚二甲基硅氧乙基二甲基硅氧烷、PEG-9聚二甲基硅氧乙基二甲基硅氧烷这样的硅酮系表面活性剂等。作为增稠剂,例如可举出瓜尔胶、刺槐豆胶、角叉菜胶、黄原胶、羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧基乙烯基聚合物、丙烯酸甲基丙烯酸烷基酯共聚物、聚乙二醇、膨润土、(丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸Na)共聚物、(丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮)共聚物等。作为保存剂,可举出苯甲酸、苯甲酸钠、脱氧乙酸、脱氧乙酸钠、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸苄酯、对羟基苯甲酸甲酯、苯氧基乙醇等。作为pH调节剂,可举出无机酸(盐酸、硫酸等)、有机酸(乳酸、乳酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、琥珀酸、琥珀酸钠等)、无机盐基(氢氧化钾、氢氧化钠等)、有机盐基(三乙醇胺、二异丙醇胺、三异丙醇胺等)等。作为螯合剂,可举出EDTA · 2钠盐、EDTA 钙· 2钠盐等。
作为稳定剂,可举出聚丙烯酸钠、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚等。添加剂可单独使用I种或组合使用2种以上。本发明的外用组合物在不损害本发明的效果的范围内可含有其他的有效成分。作为有效成分的具体例,例如可举出保湿成分、抗炎症成分、抗菌成分、维生素类、肽或其衍生物、氨基酸或其衍生物、细胞赋活成分、抗老化成分、血行促进成分等。作为保湿成分,可举出甘油、1,3-丁二醇、丙二醇、聚乙二醇、双甘油、海藻糖这样的多元醇;透明质酸钠、肝素类似物质、软骨素硫酸钠、胶原蛋白、弹性蛋白、角蛋白、几丁质、壳聚糖这样的高分子化合物;甘油、天冬氨酸、精氨酸这样的氨基酸;乳酸钠、尿素、批咯烷酮羧酸钠这样的天然保湿因子;神经酰胺、胆固醇、磷脂质这样的脂质;母菊萃取物、金缕梅萃取物、茶萃取物、紫苏萃取物这样的植物提取萃取物等。作为抗菌成分,可举出氯己定、水杨酸、杀藻胺、利凡诺(acrinol)、乙醇、苄索氯 铵、甲酚、葡糖酸及其衍生物、聚乙烯吡酮碘、碘化钾、碘、异丙基甲基酚、三氯卡班、三氯生、感光素101号、感光素201号、对轻苯甲酸酯(parahydroxybenzoate)、苯氧基乙醇、I, 2-戍
二醇、盐酸烷基二氨基甘氨酸等。作为维生素类,可举出dl- α -生育酚、醋酸dl- α -生育酚、琥珀酸dl_ α -生育酚、琥珀酸dl-α-生育酚钙等维生素E类;核黄素、黄素单核苷酸、黄素腺嘌呤二核苷酸、核黄素丁酸酯、核黄素四丁酸酯、核黄素5’ -磷酸酯钠、核黄素四烟酸酯等维生素B2类;烟酸dl-α-生育酚、烟酸苄酯、烟酸甲酯、烟酸β-丁氧基乙酯、烟酸1-(4_甲基苯基)乙酯等烟酸类;抗坏血酸原Α、抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯、L-抗坏血酸二棕榈酸酯等维生素C类;甲基橙皮甙、维生素D2、维生素D3等维生素D类;维生素Κ1、维生素Κ2等维生素K类、Y-谷维素、二苯甲酰硫胺素、二苯甲酰硫胺素盐酸盐;硫胺素盐酸盐、硫胺素十六烷基盐酸盐、硫胺素硫氰酸盐、硫胺素月桂基盐酸盐、硫胺素硝酸盐、硫胺素单磷酸盐、硫胺素赖氨酸盐、硫胺素三磷酸盐、硫胺素单磷酸酯磷酸盐、硫胺素单磷酸酯、硫胺素二磷酸酯、硫胺素二磷酸酯盐酸盐、硫胺素三磷酸酯、硫胺素三磷酸酯单磷酸盐等维生素BI类;盐酸吡哆醇、乙酸吡哆醇、盐酸吡哆醛、5’-磷酸吡哆醛、盐酸吡哆胺等维生素Β6类;维生素Β12、羟钴胺、钴胺素辅酶等维生素Β12类;叶酸、蝶酰谷氨酸等叶酸类;烟酸、烟酰胺等烟酸类;泛酸、泛酸钙、泛酰醇(泛醇)、D-泛醇(D- ^ f4 > )、D-泛硫乙胺、辅酶A、泛醇乙醚等泛酸类;生物素、^ 'y >等生物素类抗坏血酸、抗坏血酸钠、脱氧抗坏血酸、抗坏血酸磷酸酯钠、抗坏血酸磷酸酯镁等抗坏血酸衍生物这样的维生素C类;肉毒碱、阿魏酸、硫辛酸、乳清酸等维生素样作用因子等。作为肽或其衍生物,可举出角蛋白分解肽、水解角蛋白、胶原蛋白、来自鱼的胶原蛋白、去端肽胶原蛋白、明胶、弹性蛋白、弹性蛋白分解肽、胶原蛋白分解肽、水解胶原蛋白、羟丙基氯化铵水解胶原蛋白、弹性蛋白分解肽、贝壳硬蛋白分解肽、水解贝壳硬蛋白、丝蛋白分解肽、水解丝蛋白、月桂酰水解丝蛋白钠、大豆蛋白分解肽、水解大豆蛋白、小麦蛋白、小麦蛋白分解肽、水解小麦蛋白、酪蛋白分解肽、酰基化肽(棕榈酰低聚肽、棕榈酰五肽、棕榈酰四肽等)等。作为氨基酸或其衍生物,可举出甜菜碱(甘氨酸三甲内盐)、脯氨酸、羟基脯氨酸、精氨酸、赖氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、β -丙氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷酰胺、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、白氨酸、异白氨酸、缬氨酸、组氨酸、牛磺酸、Y -氨基丁酸、Y -氨基-β -羟基丁酸、肉毒碱、肌肽、肌氨酸等。本发明的弹性纤维形成促进剂还可作为密封在植入片和微胶囊中的传递系统等缓释性制剂使用。该缓释性制剂可使用能够防止从体内迅速地除去的在药剂上能被容许的公知的载体进行制备。具体而言,例如可使用乙烯醋酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、胶原蛋白、多元醇酯、和聚乳酸等生物分解性或生物适应性聚合物。上述聚合物为公知的,可利用常规方法由本领域技术人员容易地制得。另外,作为在药剂上能被容许的其他的载体,还可使用脂质体的悬浊液等。上述脂质体没有特别限定,可举出包括磷脂酰胆碱、胆固醇和PEG衍生磷脂酰乙醇(PEG-PE)的脂质组合物等。为了使其达到适于使用的尺寸,可使其通过适当的孔径大小的过滤器,进行调制后,由逆相蒸发法进行精制而获得。食品含有本发明的藻类或植物的提取物的弹性纤维形成促进剂可以通过包含在食品或功能性食品中而被供于使用。作为这类食品或功能性食品,可例示出米饭;荞面、乌冬面、粉丝、中华面、方便面、杯面的各种面类;清凉饮料、碳酸饮料、营养饮料、果实饮料、乳酸 饮料、运动饮料等饮料;咖喱粉、炖菜、各种汤类;冰淇淋、冰果子露、刨冰等冷冻点心;糖、小甜饼干、糖果、口香糖、巧克力、糖块、零食、饼干、果冻、果酱、奶油、其他烧果(日文焼菓子)等点心类;鱼糕、鱼肉山芋饼、火腿、香肠等水产·畜产加工食品;加工乳、发酵乳等乳制品;色拉油、天妇罗油、人造黄油、蛋黄酱、起酥油、淡奶油、色拉调料等油脂和油脂加工食品;沙司、色拉调料、大酱、酱油、调味汁等调味料;汤、炖菜、沙拉、家常菜、鱼粉、腌制品;其他形态的健康·营养辅助食品等。进而,也可以制备含有本发明的弹性纤维形成剂的营养辅助食品(散剂、颗粒剂、软胶囊、硬胶囊、片剂、咀嚼片、速崩片、糖浆、液体剂等)。另外,在宠物等动物用的饵中可以含有本发明的弹性纤维形成剂。在食品中根据需要可加入添加物。作为这样的添加物,例如可举出葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖、山梨糖、甜菊苷、甜茶苷、玉米糖浆、乳糖、甘露醇、糊精、柠檬酸、柠檬酸钠、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、L-抗坏血酸、dl-α -生育酚、异抗坏血酸钠、甘油、丙二醇、甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、失水山梨糖醇脂肪酸酯、阿拉伯胶、角叉菜胶、酪蛋白、明胶、果胶、琼脂、维生素C、维生素B类、维生素E、烟酰胺、泛酸钙、氨基酸类、钙盐类、表面活性剂、色素、香料、保存剂等。可利用本发明的弹性纤维形成促进剂在体外作成人工弹性纤维、还能够将本发明的弹性纤维形成促进剂用于针对弹性纤维的研究中。还能够使用本发明的弹性纤维形成促进剂,在体外形成弹性纤维,用于人工弹性纤维的培养用试药、人工皮肤、皮肤模型、人工血管等人工组织的制作。在应用于这类体外的研究、实施的情况下,还优选直接使用藻类或植物的提取物。本发明的弹性纤维形成促进剂还可含有DANCE表达增强因子(DANCE诱导因子)。可使用DANCE表达增强因子,例如可举出南天藤(Caesalpinia crista)萃取物、四角豆萃取物、植酸及其生理学上被许可的盐、以及L-羟基脯氨酸及其生理学上被许可的盐等DANCE表达增强因子;DANCE表达载体、或DANCE诱导因子表达载体等。实施例接下来,通过试验例、实施例等对本发明具体进行说明,但本发明并不限于以下实施例。〔制造例I〕(通常的红藻类提取物的提取)红藻类的提取物使用市售的PHYK0SIL 2000 (EXSYM0L ΜΟΝΑΚΟ制、柏桉藻科红藻类的提取物)。利用试验例I中所示的培养液进行调制以使添加后的最终浓度达到培养液整体的O. 001重量%。〔制造例2〕(通常的红藻类提取物的提取)作为红藻类的提取物,直接使用市售品Asparcid P(EXSYM0L ΜΟΝΑΚΟ制、柏桉藻科红藻类的提取物;刺海门冬)。利用试验例中所示的培养液进行调制,以使添加后的最终浓 度达到O. 001重量%。〔制造例3〕(通常的绿藻类提取物的提取)作为绿藻类的提取物,直接使用市售品SAVE MARINE (Biotech Marine公司、绿藻类提取物;石莼目盘苔属的盘苔)。利用在试验例I中表示的培养液,调制成添加后的最终浓度O. 001重量%。〔制造例4〕(藻类和植物的提取物)使用表I所示的市售的制品,同样地为了测定弹性纤维形成能力,而制备各种提取物。表I
弹性纤维形成原料(不包括褐藻)成分的名称I SD
FBS (-)~ —100~47~
云杉液B__云杉萃取物/酸橙果皮萃取物__1696.9
藍/k一口只(产品名)^蓝叶萃取物24035.4
IPF-10QK—条斑紫菜萃取物185~ 0~
y AA(产品名)i斑紫菜萃取物16417.2
万儿茶萃取物371 22.4
D
SEVE MARINE盘苔萃取物270^ ^43.2
mc° T°LS/B胶石花菜萃取物
GELALG_皱波角叉菜萃取物272 11.4
PHYLOSIL2000_刺海门冬萃取物440 _20.0
ASPARCID P刺海门冬萃取物57324.6
I。一、 一~Γ~ΓΤ77黄芩提取物/甘草根萃取物/枣果实萃17Ω
7 7 77 — >^<白色>取物179 7.0〔试验例I〕(弹性纤维形成促进的评价试验)无血清下的实验在24孔板的底部放置显微镜盖玻片(从Fisherbrand购入),在它的上面,在每I孔中播种皮肤纤维芽细胞7. 5 X IO4个,利用次代用培养基(DMEM(Dulbecco’ s ModifiedEagle Medium,从 Invitrogen 购入)、10 %牛胚胎血清(FBS、从 JRH Bioscience 购入)、2mM的谷氨酸、100units/mL的盘尼西林、100g/mL的链霉素),在37°C、5% CO2下进行培养。进而,使用不含血清的弹性纤维形成培养基,即,使用DMEM/F12、2mM的谷氨酸、100units/mL的盘尼西林、100g/mL的链霉素,每I孔中播种人纤维芽细胞7. 5 X IO4个,在于该无血清培养基中分别以达到培养物整体的O. 001重量%的方式加入或者不加入制造例I 4的调制物的状态下,在37°C、5%C02下培养4周。4周培养后,进行弹性纤维的荧光免疫染色。详细而言,利用ImL的PBS清洗3次后,使用100%甲醇在_20°C下固定20分钟。进而,利用PBS清洗后,使用含有2% BSA的PBS,在室温下进行I小时的封闭,然后使用抗弹性蛋白多克隆抗体(从Elastin Products Company购入)作为I次抗体,使用Alexa488_抗兔子IgG抗体(从Invitrogen购入)作为2次抗体。将I次抗体在室温下孵化I小时以上后,用PBS清洗,将上述2次抗体在室温下孵化I小时。用PBS清洗后,使用4%多聚甲醛在室温下固定10分钟,再次用PBS清洗,然后使用Hoechst33258(从Dojindo购入),在室温下反应5分钟,再次用PBS清洗,然后利用Aqua Poly/Mount (从Poluscience购入)将样品固定在载玻片上。观察是利用荧光显微镜1X71 (Olympus)进行的。其结果如图I 图5所
/Jn ο
图I和图3是将作为弹性纤维的弹性蛋白荧光染色的图。在本荧光染色法中,不仅弹性蛋白,而且细胞质染色也同时被染色,因此,在对照中,发现了斑点状的荧光发色,这是将细胞质染色而得到的,而不是将弹性蛋白染色而得到的。另一方面,对于红藻类的提取物或绿藻类的提取物而言,与对照相同地将细胞质染色为斑点状,但是在整个照片确认到明显的纤维状的荧光染色。由此,红藻类的提取物或绿藻类的提取物糖被确认具有明显的弹性纤维即弹性纤维形成促进效果。确认出红藻类的提取物、绿藻类的提取物和对照的细胞数没有变化。进而,为了将荧光量数值化,使用的是Image J (用于数值化的图像软件)。其结果如图2、图4和图5所示。在制造例I中得到的提取物和制造例2中得到的提取物显示出具有优异的弹性纤维形成促进作用。另外,使用制造例3中得到的提取物的情况,虽然未发现制造例I和2中的纤维形成,但是与对照相比,发现了促进了弹性蛋白沉着。这表明促进弹性纤维(弹性蛋白纤维)的形成。〔组合物调制例I〕化妆品组合物以下的化妆品组合物在实施例中的数值的单位为“重量%”。表2ILM
权利要求
1.一种弹性纤维形成促进剂,其含有藻类和/或植物的提取物作为有效成分。
2.根据权利要求I所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述藻类为红藻类或绿藻类。
3.根据权利要求2所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述红藻类为选自属于顶丝藻目(Acrochaetiales)、紫球藻目(Porphyridiales)、红毛菜目(Bangiales)、海索面目(Nemaliales)、红盾藻目(Erythropeltidales)、弯枝藻目(Compsopogonales)、隐丝藻目(Cryptonemiales)、珊蝴藻目(Corallinales)、掌藻目(Palmariales)、石花菜目(Gelidiales)、Rhodogorgonales 目、胭脂藻目(Hildenbrandiales)、柏安藻目(Bonnemaisoniales)、串珠藻目(Batrachospermales)、杉藻目(Gigartinales)、龙须菜目(Gracilariales)、红皮藻目(Rhodymeniales)、伊谷藻目(Ahnfeltiales)和仙菜目(Ceramiales)的红藻类中的至少一种红藻类。
4.根据权利要求3所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述红藻类为选自红翔菜科(Solieriaceae)、杉藻科(Gigartinaceae)、海膜科(Halymeniaceae)、石花菜科(Gelidiaceae)和柏按藻科(Bonnemaisoniaceae)中的至少一种红藻类。
5.根据权利要求4所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述红藻类为选自麒麟菜(Eucheuma muricatum)、嫩杉藻(Gigartina tenella)、角又菜(Chondrus elatus)、稀毛娱蚁藻(Grateloupia sparsa (Okamura) Chiang)、石花菜(Gelidium)和刺海门冬(Asparagopsis Armata)中的至少一种红藻类。
6.根据权利要求2所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述绿藻类是选自团藻目(Volvocales)、环藻目(Sphaeropleales)、鞘藻目(Oedogoniales)、胶毛藻目(Chaetophorales)、胶毛藻目(Chaetopeltidales、)、丝藻目(Ulotrichales)、石药目(Ulvales)、刚毛藻目(Cladophorales)、顶管藻目(Acrosiphoniales)、小球藻目(Chlorellales)、Microthamniales 目、Trebouxiales 目、Prasiolales 目、溪藻目(Mamiellales)、Monomastigales 目、Dolichomastigales 目、管枝藻目(Siphonocladales)、厳藻目(Caulerpales)、橘色藻目(Trentepohliales)、Oltmannsiellopsidales 目、松藻目(Codiales)> 习习藻目(Bryopsidales)、Chlorodendrales 目、Dolichomastigales 目、Nephroselmidales 目和续枝藻目(Dasycladales)中的至少一种绿藻类。
7.根据权利要求6所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述绿藻类为盘苔(Blidingia minima)或边缘盘苔(Blidingia marginata)。
8.根据权利要求I所述的弹性纤维形成促进剂,其中, 所述植物为选自松科、芸香料、寥科、茜草科、紫葳科、唇形科、豆科和鼠李科中的至少一种植物。
9.一种弹性纤维形成促进用组合物,其含有权利要求I 8中任一项所述的弹性纤维形成促进剂。
10.根据权利要求9所述的弹性纤维形成促进用组合物,其为化妆品。
11.根据权利要求9所述的弹性纤维形成促进用组合物,其为食品。
12.一种藻类和/或植物的提取物在制备弹性纤维形成促进剂中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用,其中, 所述藻类为红藻类或绿藻类。
14.根据权利要求13所述的应用,其中, 所述红藻类为选自属于顶丝藻目(Acrochaetiales)、紫球藻目(Porphyridiales)、红毛菜目(Bangiales)、海索面目(Nemaliales)、红盾藻目(Erythropeltidales)、弯枝藻目(Compsopogonales)、隐丝藻目(Cryptonemiales)、珊糊藻目(Corallinales)、掌藻目(Palmariales)、石花菜目(Gelidiales)、Rhodogorgonales 目、胭脂藻目(Hildenbrandiales)、柏安藻目(Bonnemaisoniales)、串珠藻目(Batrachospermales)、杉藻目(Gigartinales)、龙须菜目(Gracilariales)、红皮藻目(Rhodymeniales)、伊谷藻目(Ahnfeltiales)和仙菜目(Ceramiales)的红藻类中的至少一种红藻类。
15.根据权利要求13所述的应用,其中, 所述红藻类为选自红翔菜科(Solieriaceae)、杉藻科(Gigartinaceae)、海膜科(Halymeniaceae)、石花菜科(Gelidiaceae)和柏按藻科(Bonnemaisoniaceae)中的至少一种红藻类。
16.根据权利要求13所述的应用,其中, 所述红藻类为选自麒麟菜(Eucheuma muricatum)、嫩杉藻(Gigartina tenella)、角又菜(Chondrus elatus)、稀毛娱蚁藻(Grateloupia sparsa (Okamura) Chiang)、石花菜(Gelidium)和剌海门冬(Asparagopsis Armata)中的至少一种红藻类。
17.根据权利要求13所述的应用,其中, 所述绿藻类是选自团藻目(Volvocales)、环藻目(Sphaeropleales)、鞘藻目(Oedogoniales)、胶毛藻目(Chaetophorales)、胶毛藻目(Chaetopeltidales、)、丝藻目(Ulotrichales)、石药目(Ulvales)、刚毛藻目(Cladophorales)、顶管藻目(Acrosiphoniales)、小球藻目(Chlorellales)、Microthamniales 目、Trebouxiales 目、Prasiolales 目、溪藻目(Mamiellales)、Monomastigales 目、Dolichomastigales 目、管枝藻目(Siphonocladales)、藤藻目(Caulerpales)、橘色藻目(Trentepohliales)、Oltmannsiellopsidales 目、松藻目(Codiales)、习习藻目(Bryopsidales)、Chlorodendrales 目、Dolichomastigales 目、Nephroselmidales 目和域枝藻目(Dasycladales)中的至少一种绿藻类。
18.根据权利要求13所述的应用,其中, 所述绿藻类为盘苔(Blidingia minima)或边缘盘苔(Blidingia marginata) □
19.根据权利要求13所述的应用,其中, 所述植物为选自松科、芸香料、蓼科、茜草科、紫葳科、唇形科、豆科和鼠李科中的至少一种植物。
全文摘要
本发明发现了藻类或植物的提取物的生理活性,并将其用于新的用途。本发明涉及制备含有藻类或植物的提取物、尤其是红藻类、绿藻类或特定的植物的提取物作为有效成分的弹性纤维形成促进剂。所述提取物从选自顶丝藻目、紫球藻目、红毛菜目、海索面目、红盾藻目、弯枝藻目、隐丝藻目、珊瑚藻目、掌藻目、石花菜目、Rhodogorgonales目、胭脂藻目、柏安藻目、串珠藻目、杉藻目、龙须菜目、红皮藻目、伊谷藻目和仙菜目的红藻类;团藻目、环藻目、鞘藻目、胶毛藻目、胶毛藻目、丝藻目、石莼目、刚毛藻目、顶管藻目、小球藻目、Microthamniales目、Trebouxiales目、Prasiolales目、溪藻目、Monomastigales目、Dolichomastigales目、管枝藻目、蕨藻目、橘色藻目、Oltmannsiellopsidales目、松藻目、羽藻目、Chlorodendrales目、Dolichomastigales目、Nephroselmidales目和绒枝藻目的绿藻类;以及选自松科、芸香料、蓼科、茜草科、紫葳科、唇形科、豆科和鼠李科植物中的至少一种或者它们的组合中得到。
文档编号A61K36/72GK102920631SQ20121028057
公开日2013年2月13日 申请日期2012年8月8日 优先权日2011年8月10日
发明者高木恭子, 佐藤康成 申请人:乐敦制药株式会社
产品知识
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