专利名称：一种抗肿瘤药物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂及其制备方法和应用，具体地说是一种抗肿瘤药物及其制备方法和应用。
背景技术：
近年来，抗肿瘤新药的研究与应用突破了多年徘徊发展的局面，出现了快速发展的强劲势头，主要表现在1)抗肿瘤化疗新药的研制与应用步骤明显加快化疗新药紫杉醇、多烯紫杉醇、草酸钼、乐钼、健择、异长春花碱、开普拓、希罗达、阿里米塔等药物的上市， 显著提高了多种肿瘤治疗的效果；幻人源化抗体研究快速升温自从美国FDA批准人源化单克隆抗体Here印tin治疗Her-2表达阳性的乳腺癌以来，针对⑶20、表皮生长因子受体、 血管内皮细胞生长因子等单克隆抗体作为抗肿瘤新药陆续获得美国FDA批准用于临床，提高了部分肿瘤的治疗效果；幻分子靶向药物研制的成功随着对肿瘤生物学行为认识的不断深入，人们可以有针对性地设计与肿瘤密切相关的分子靶点阻断剂，以特异性地抑制肿瘤细胞的生长，如C225、Avastin、STI571、Iressa等；4)靶向载体的迅速发展将化疗药物或毒素采用长循环脂质体微球、热敏脂质体微球、多聚物载药纳米粒等载体包裹，形成智能药物，提高肿瘤治疗的靶向性，减少毒性反应。以上四大领域均有大批在研项目，其中有些已经成为发达国家肿瘤一线、二线治疗新的标准药物。我国临床肿瘤学起步虽然较晚，但由于与美欧发达国家频繁的学术交流，所以在发达地区的大型医院临床肿瘤治疗水平与发达国家是接轨的。这就造成了以下局面中国人一旦不幸得了肿瘤以后，病人自己或社会必须耗去大笔药费从国外制药企业进口极其昂贵的抗肿瘤新药用于治疗。病人不堪经济重负、社会不堪经济重负。即使在美国本土，昂贵的抗肿瘤新药也使美国的社会保险业不堪重负，更何况我国！我国民族制药业目前大多只能仿制国际上部分超过专利保护期的药物，比较而言，滞后、被动。努力开发具有我国独立自主知识产权的抗肿瘤新药一直是我国医药学者们孜孜不倦努力研究的重要方向。抗肿瘤化疗药物大多来源于天然药物，然后才经过修饰、人工合成等加工过程。中药是源于我国的独特的天然药物宝库。在我国，中药制剂治疗恶性肿瘤十分普遍，但是被现代医学证实具有肯定抗癌作用的药物不多，其抗癌作用能够与化疗药物相媲美的更少。如果在中医药理论的指导下，通过大样本的临床验证和基础实验进行中药复方制剂抗肿瘤作用的研究，无疑是我国抗肿瘤新药研究的优势所在。

发明内容
发明目的本发明的第一目的在于提供一种抗肿瘤药物，该中药对于消化道肿瘤有明显的抑制生长的作用。本发明的第二目的是为了提供上述抗肿瘤药物的制备方法。本发明的第三目的在于提供上述抗肿瘤药物在制备抗肿瘤中药复方制剂中的应用。
技术方案为了解决上述第一目的，本发明所采用的技术方案为一种抗肿瘤药物，它包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为4 1 1 4。为了解决上述第二目的，本发明所采用的技术方案有三个，他们分别是一是超微粉碎的方法首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净，干燥；然后将洗干净的乌梅、五味子放入超微粉碎机中粉碎20分钟，得到500目的超粉，即得到所述药物。二是复方水提液的制备方法首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用蒸馏水热回流提取1. 5 2. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述蒸馏水的重量是原料药总重量的6 30倍。三是复方醇提液的制备方法首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用体积浓度为70%的乙醇热回流提取1. 5 2. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物； 其中所述乙醇的重量是原料药总重量的6 30倍。上述抗肿瘤药物在制备抗肿瘤中药复方制剂中的应用。有益效果与现有技术相比，本发明的优点是五味子性能收敛固涩、益气生津、 补肾宁心，能增强机体免疫力，促进机体的抗癌机能，能抑制肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡。乌梅与五味子配伍，共收扶正抗癌之效，且能明显延长荷瘤鼠的生存时间；价格低廉， 制备、服用方便，适于推广使用。
具体实施例方式以下通过乌梅五味子复方对吐2荷瘤小鼠的抑瘤作用和生存期影响的实验来进一步阐述本发明所述中药的有益效果。本实验将研究不同方法提取的乌梅五味子复方对小鼠移植性肝癌H22实体瘤的抑制作用，并观察乌梅五味子超微粉碎复方对荷瘤小鼠生存期的影响。一.实验材料1.实验动物腹水型H22肝癌小鼠，南京中医药大学提供。实验小鼠，普通级ICR小鼠80只，雌雄各半，体重18-22g，由扬州大学实验动物中心提供，合格证号SCXK(苏)，2007-0001。2.实验药物乌梅五味子复方水提液组(乌梅与五味子的生药重量比为1 1)由江苏省中医院制剂部提供，批号101010，制备方法是首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用蒸馏水热回流提取 1. 5 2. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°c保存，即得到所述药物；其中所述蒸馏水的重量是原料药总重量的10倍。乌梅五味子复方醇提液组(乌梅与五味子的生药重量比为1 1)由江苏省中医院制剂部提供，批号101011，制备方法首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用体积浓度为70%的乙醇热回流提取1. 5 2. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述乙醇的重量是原料药总重量的10倍。乌梅五味子复方超微粉碎组(乌梅与五味子的具体配比是1 1):由江苏省中医院制剂部提供，批号101012制备方法是按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净，干燥；然后将洗干净的乌梅、五味子放入超微粉碎机中粉碎 20分钟，得到500目的超粉，即得到所述药物。5-FU(5-氟尿嘧啶)由天津金耀氨基酸有限公司提供，批号0904152。三.实验方法1.接种小鼠常规饲养，另取传代保种10d，生长旺盛的吐2荷瘤小鼠，处死后，在超净工作台中从腹腔抽出瘤液，用生理盐水按1 3比例制成肿瘤细胞悬液，计数并调节细胞数为 ΙΧΙΟ11/!，每只小鼠接种0. 2mL·以上操作须在无菌条件下尽快完成。2.实验动物分组(1)乌梅五味子复方对H22实体瘤小鼠的肿瘤抑制作用将50只大鼠随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、乌梅五味子复方水提液组、乌梅五味子复方醇提液组、乌梅五味子复方超微粉碎组，每组10只。(2)乌梅五味子复方对H22实体瘤小鼠的生存期的影响将30只大鼠随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、乌梅五味子复方超微粉碎组，每组10只。3.造模及实验方法(1)乌梅五味子复方对H22实体瘤小鼠的肿瘤抑制作用小鼠接种后，随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、乌梅五味子复方水提液组、乌梅五味子复方醇提液组、乌梅五味子复方超微粉碎组，每组10只。接种后次日给药，中药各组每日灌服给药O.anl/lOg，每日1次，连续10d。5-FU组隔日灌胃给药 0. lml/10g体重，连续10d。阴性对照组每日灌服生理盐水O.anl/lOg。末次给药后次日称体重、脱颈椎处死动物、剖瘤称重。按下列公式计算肿瘤抑制率。肿瘤抑制率=(对照组平均瘤重-药物组平均瘤重)/对照组平均瘤重X 100 %判断标准肿瘤抑制率> 30%，经统计学处理有明显差异者为有抗肿瘤作用。(2)乌梅五味子复方对H22实体瘤小鼠的生存期的影响造模第2天开始用药，直至对照组出现第一只动物死亡为止。中药组每日灌服给药O.anl/lOg体重，每日1次，5-FU组隔日灌胃给药0. lml/10g体重。记录小鼠存活时间， 计算各组平均生存时间，按下列公式计算生命延长率生命延长率=(药物组平均生存时间-对照组平均生存时间)/对照组平均生存时间X 100%4.药效评价按照国家卫生部药政管理局制定的治疗恶性肿瘤的中药药效评价标准(1)对照组小鼠肿瘤均值不得低于肿瘤抑制率在30%以上，与对照组比较有显著性差异； (3)给药组动物平均体重下降(与自身对照)不得超过15%;(4)动物死亡数不超过20%。5.统计处理实验数据均以“ s表示，采用SPSS13. 0统计软件进行统计学处理，方差齐性检验后，组间比较用t检验。三.实验结果1.乌梅五味子复方对H22实体瘤小鼠的肿瘤抑制作用阳性对照组(5-FU组)、乌梅五味子复方水提液组、乌梅五味子复方醇提液组、乌梅五味子复方超微粉碎组肿瘤抑制率分别为27.08% (P < 0. 05),33. 05% (P < 0. 05)、 34. 44% (P <0.05)。复方醇提液组、复方超微粉碎组有明显抗肿瘤作用(见表1)。表1乌梅五味子复方对H22小鼠肿瘤瘤重的影响
组别剂量体·￡ (g)-瘤重(g)抑瘤率(g/kg)给药前给药后(%)阴性对照组19.51±0.830.05±0.941.84±0.695-Fu 组0.02519.12±0.8726.27±1.350.44±0.26*76.05乌梅五味子复1019.39±1.1526.14±1.371.34±0.63*27.08方水提液组乌梅五味子复1019.12±0.8727.67±1.451.23±0.46*33.05方醇提液组乌梅五味子复619.03±0.5429.08±0.791.21±0.46*34.44方超微粉碎组* 与阴性对照组比，(P < 0. 05)；2.乌梅五味子复方对H22实体瘤小鼠生存时间的影响5-Fu组、乌梅五味子复方超微粉碎组的生命延长率分别为_15.05、27.6% (P < 0. 05)，表示乌梅五味子复方可延长小鼠的生存时间(见表2)。表2乌梅五味子复方对H22小鼠生命延长率的影响
剂量体重(g)生存时间生命延长
组别-
(g/kg) 给药前给药后(d) 率(％)
阴性对照组 21.08±1.26 33.16+6.0527.9士 6.24
5-Fu 组 0.025 20.96±2.19 27.51+523.7±3.71 -15.05
乌梅五味子复 6 21.39±1.19 25.31±4.8335.6±8.43 27.6
方超微粉碎组* 与阴性对照组比，(P < 0. 05)；结论现代研究表明，收涩药味多酸涩，多含靴质、有机酸及其它无机盐，具有明显的收敛作用，其广泛的药理作用也主要与这些具有收敛作用的成分有关。其收敛成分与粘膜、创面接触后，能使表层蛋白质沉淀和凝固，从而形成一种保护层，使对粘膜、创面的刺激减轻， 并能促进疮面愈合，因而具有止泻、敛疮作用据报道其中一些收涩药具有抗肿瘤作用，如沈红梅等经过体外抗肿瘤及体内免疫调节实验，结果表明，乌梅具有抑制人原始巨核白血病细胞和人早幼粒白血病细胞生成的作用；乌梅《本经》:“下气，除热烦满，安心，止肢体痛，偏枯不仁，死肌，去青黑痣，蚀恶肉，”《本经逢原》“乌梅酸收，益精开胃，能敛肺涩肠，止呕敛
汗，定喘安蛔，......恶疮裔肉，己烧灰研敷，恶簧自消，此即《本经》去死肌恶肉之言。”五
味子性能收敛固涩、益气生津、补肾宁心，属补益之品，能增强机体免疫力，促进机体的抗癌机能，能抑制肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡。两药配伍，共收扶正抗癌之效，且能明显延长荷瘤鼠的生存时间。以下通过实施例来进一步阐述本发明。实施例1 一种抗肿瘤药物，它包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为1 1。它的制备方法为首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净，干燥；然后将洗干净的乌梅、五味子放入超微粉碎机中粉碎20分钟， 得到500目的超粉，即得到所述药物。实施例2 与实施例1基本相同，所不同的是原料药的重量比乌梅、五味子按生药重量比为4 1。实施例3 —种抗肿瘤药物，它包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为1 1。它的制备方法为首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用蒸馏水热回流提取2小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述蒸馏水的重量是原料药总重量的10倍。实施例4 一种抗肿瘤药物，它包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为1 4。它的制备方法为首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用蒸馏水热回流提取1. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述蒸馏水的重量是原料药总重量的8倍。实施例5 与实施例3基本相同，所不同的是原料药的配比和制备该药物时所用的蒸馏水量和提取时间，其中乌梅、五味子按生药重量比为3 2，蒸馏水的重量是原料药总重量的30倍，提取时间为2. 5小时。实施例6 与实施例4基本相同，所不同的是制备该药物时所用的蒸馏水量，蒸馏水的重量是原料药总重量的6倍。实施例7 —种抗肿瘤药物，它包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为1 1。它的制备方法为首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用体积浓度为70%的乙醇热回流提取2小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述乙醇的重量是原料药总重量的10倍。实施例8 与实施例7基本相同，所不同的是原料药的配比、制备该药物时所用乙醇的用量和提取时间，其中乌梅、五味子按生药重量比为2 3;乙醇的重量是原料药总重量的8倍；提取时间为1.5小时。实施例9 与实施例7基本相同，所不同的是原料药的配比、制备该药物时所用乙醇的用量和提取时间，其中乌梅、五味子按生药重量比为4 1 ；乙醇的重量是原料药总重量的30倍；提取时间为2. 5小时。实施例10 与实施例7基本相同，所不同的是原料药的配比、制备该药物时所用乙醇的用量和提取时间，其中乌梅、五味子按生药重量比为3 2;乙醇的重量是原料药总重量的6倍；提取时间为1.5小时。
权利要求
1.一种抗肿瘤药物，其特征在于，它包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为4 1 1 4。
2.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净，干燥；然后将洗干净的乌梅、 五味子放入超微粉碎机中粉碎20分钟，得到500目的超粉，即得到所述药物。
3.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用蒸馏水热回流提取1. 5 2. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述蒸馏水的重量是原料药总重量的6 30倍。
4.根据权利要求3所述的抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，所述蒸馏水的重量是原料药总重量的8 10倍。
5.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，首先按生药重量比称取乌梅、五味子，然后用蒸馏水分别将乌梅、五味子冲洗干净；然后将冲洗干净的乌梅、五味子用体积浓度为70%的乙醇热回流提取1. 5 2. 5小时，滤去药渣，将滤液浓缩成干浸膏，-20°C保存，即得到所述药物；其中所述乙醇的重量是原料药总重量的6 30倍。
6.根据权利要求5所述的抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，所述乙醇的重量是原料药总重量的8 10倍。
7.权利要求1所述的抗肿瘤药物在制备抗肿瘤中药复方制剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种抗肿瘤药物及其制备方法和应用，该药物包括由如下原料药制成乌梅、五味子按生药重量比为4∶1～1∶4。它有三种制备方法，分别是超微粉碎的方法、复方水提液的制备方法和复方醇提液的制备方法。本发明的优点是五味子性能收敛固涩、益气生津、补肾宁心，能增强机体免疫力，促进机体的抗癌机能，能抑制肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡。乌梅与五味子配伍，共收扶正抗癌之效，且能明显延长荷瘤鼠的生存时间；价格低廉，制备、服用方便，适于推广使用。
文档编号A61K36/736GK102335258SQ20111030230
公开日2012年2月1日 申请日期2011年9月30日 优先权日2011年9月30日
发明者刘沈林, 吴坚, 邹玺 申请人:南京中医药大学附属医院