专利名称：透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，特别是将透明质酸作为一种用于提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状组合物中的主要功效成份的应用。
背景技术：
透明质酸是人和动物体内不可缺少的一种高分子生物粘多糖物质，主要构成为葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖。透明质酸广泛存在于人和动物体内的各种组织和细胞外基质及细胞信息传递蛋白聚糖链中，从结缔组织、皮肤、血清、眼玻璃体中都无处不在。透明质酸由美国学者Meyer和Palmer于1934年首先从牛眼中分离出来，经几代学者的研究，真正形成规模化生产则是在90年代由Hatanaku等发明了用生物发酵法制取透明质酸的方法以后。已有对透明质酸的应用，大多侧重于眼科、外科创伤、护肤，以及肝功能检测等疾病的临床诊断。我国对透明质酸的开发利用主要局限于眼科和保湿护肤等外用方面。本发明人经过多年潜心研究实验，首次发现了透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的显著功效，并将其应用于保健食品，并在应用中取得了良好的成效。

发明内容
本发明的目的是提供一种透明质酸的新用途，即透明质酸在提高人体免疫力，改善免疫力缺乏症状方面的应用，特别是以透明质酸为功效成份的组合物，该组合物可用于许多领域，例如药品、保健品、食品等，且这些产品无毒副作用，提高人体免疫力效果明显。
本发明的创造性在于首次发现了透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的显著功效，并提供了实现这种功效的方法。本发明的透明质酸可采用口服的方法，例如口服液，也可以是其他剂型，例如片剂，胶囊等形式。本发明提供的组合剂，除含有一定量的透明质酸作为主要功效成份，也可含有药学或食物学中可接受的载体，如果是片剂等可加赋形剂，方法为混合，造粒，压片等。本发明提供的透明质酸制剂中的其它组份可以是甜味剂，调味剂，填充剂和其它辅助功效成份。本发明中的透明质酸也可以作为食品添加剂加到食品中使用，例如用作各种饮料的营养添加剂，或固体食品的营养添加剂。
本发明中透明质酸的应用方法主要包括给免疫力下降或已经具有免疫力缺乏症状的人服用一定量的透明质酸，其用量为成人每人每天1克～0.001克。优选为每人每天0.2克-0.01克。更优选为每人每天0.1克-0.03克。
本发明中，由透明质酸作为主要功效成份制得的口服液和其它剂型，经国家有关卫生防病中心和有关研究机构作了多项免疫调节作用实验和毒性实验，该检验系依据“保健食品功能学评价程序和检验方法”进行，具体实验如下一、免疫调节作用实验1、透明质酸制剂对小鼠细胞免疫功能的影响表1透明质酸制剂对小鼠迟发型变态反应(足趾增厚法)的影响(均值±标准差)

由表1可见，低、中剂量组小鼠攻击前后足趾厚度差值与对照组比较差异均有显著性(p＜0.05)表2透明质酸制剂对小鼠迟发型变态反应(耳肿胀法)的影响(均值±标准差)

由表2可见，各剂量组小鼠左右耳重量差值与对照组比较差异无显著性(p＜0.05)2、透明质酸制剂对体液免疫的影响表3透明质酸制剂对小鼠半数溶血值(HC50)的影响(均值±标准差)

由表3可见，各剂量组小鼠半数溶血与对照组比较差异无显著性(p＜0.05)表4透明质酸制剂对小鼠抗体生成细胞的影响(均值±标准差)


由表4可见，各剂量组小鼠抗体生成细胞数与对照组相比，明显增加，差异均有显著性(p＜0.05)表5透明质酸制剂对小鼠碳廓清试验的影响(均值±标准差)

由表5可见，各剂量组小鼠吞噬指数与对照组比较，差异无显著性(p＞0.05)3、小结经口给予不同剂量的透明质酸制剂20天后，迟发型变态反应足趾增厚法中，低、中两个剂量组与对照组相比，攻击前后足趾厚度差值明显增加，差异有显著性(p＜0.05)。抗体生成细胞试验中，低、中、高三个剂量组与对照组相比抗体生成细胞明显增加，差异有显著性(p＜0.05)。其它各剂量组试验均未见免疫抑制现象。检验结果表明，本样品具有免疫调节作用。
二、动物毒性实验1、透明质酸制剂对大鼠体重、总食物利用率的影响由表1、表2可见，以0.075、0.15、0.30g/kg.bw的透明质酸制剂掺入饲料中喂饲大鼠30天，动物未出现拒食现象，各剂量组动物体重及食物利用率与对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表1、透明质酸制剂对大鼠体重影响

表2、透明质酸制剂对大鼠总食物利用率的影响剂量 动物数 体重增重 进食量 食物利用率性别(g/kg.bw) (只)(g) (g)(％)0 10134.60±20.49 525.80±30.1825.60±3.580.075 10133.90±16.20 533.90±33.1325.06±2.42雄0.1510135.00±28.44 523.60±56.2125.62±3.490.3 10132.50±23.29 529.40±55.3424.97±3.320 1095.90±31.68471.80±54.8620.17±5.330.075 1097.60±13.15467.80±67.1821.04±2.85雌0.151097.20±28.93477.90±59.9020.00±3.540.3 1096.60±22.12480.30±35.7520.17±4.542、透明质酸制剂对大鼠血液学指标和WBC的影响由表3、表4可见各组动物的血红蛋白、红细胞总数、白细胞计数及其分类和WBC均在正常值范围之内。
表3、透明质酸制剂30天喂养试验血液学检查结果剂量 动物数 血红蛋白 红细胞计数 白细胞计数性别(g/kg.bw) (只) g/L ×1012/L ×109/L0 10104.13±33.44 5.04±1.71 7.61±4.760.075 10124.00±22.21 5.90±0.72 9.80±2.96雄0.15 10121.88±22.24 6.17±1.23 10.10±4.000.310116.00±24.67 6.01±1.31 8.91±3.520 10121.10±14.34 5.94±0.54 9.40±1.290.075 10121.25±30.12 6.57±0.20 10.95±4.67雌0.15 10132.22±16.87 6.81±0.70 11.72±2.580.310107.00±30.80 5.06±1.58 6.74±4.30表4、透明质酸制剂对大鼠WBC的影响剂量 动物数性别中性％淋巴％ 单核％(g/kg.bw)(只)0 10 4.67±3.1587.97±4.799.14±3.370.075 10 6.90±2.1783.45±3.459.65±1.85雄0.15 10 5.89±1.8485.56±2.678.55±1.460.310 4.56±2.3887.45±3.587.99±2.03
0 106.32±2.2584.52±1.769.15±1.850.075 106.84±2.7983.71±4.279.45±2.07雌0.15105.40±1.9086.01±2.108.59±1.720.3 103.40±1.9789.81±4.106.79±2.343、透明质酸制剂对大鼠生物指标的影响由表5可见各组动物的转氨酶、尿素氮、胆固醇、血糖、总蛋白及白蛋白均在正常值范围内。
表5、透明质酸制剂30天喂养试验末期生化检验结果性别剂量动物数 转氨酶尿素氮 胆固醇 血糖总蛋白 白蛋白(g/kg.b) (只) (U/L) (mmol/L)(mmol/L)(mmol/L) (g/L) (g/L)010101.88±13.93 9.25±0.79 2.29±0.37 2.50±1.08 71.79±6.48 39.03±3.250.0751076.00±14.94 8.58±0.89 2.58±0.58 2.06±0.41 68.01±3.98 38.27±2.16雄0.15 1074.40±9.777.55±1.06 2.56±0.61 2.27±0.48 64.81±2.80 36.51±1.700.3 1076.25±13.83 7.80±1.46 2.52±0.28 2.75±0.54 65.29±3.29 37.20±1.8401076.33±19.26 10.15±1.92 2.35±0.43 2.60±0.75 71.04±2.81 38.98±2.410.0751061.90±16.52 10.47±1.37 2.24±0.40 2.68±1.31 69.53±1.90 38.49±1.22雌0.15 1070.38±19.13 10.67±1.50 2.40±0.63 2.77±0.39 70.20±3.63 39.31±0.790.3 1064.00±8.909.51±1.63 2.13±0.34 3.26±0.45 65.42±3.21 37.37±1.744、对大鼠脏体系数的影响由表6可见，大体及组织学检查未发现异常，解剖时亦未发现膀胱、肝总管结石。将对照组和高剂量组动物的肝、肾、胃、脾及十二指肠做病理学检查，未见有意义的病理改变。脏体比值亦在正常值范围内。
表6、透明质酸制剂对大鼠脏体系数的影响剂量动物数肝/体 肾/体 脾/体性别(g/kg.bw) (只) (％) (％) (％)0 10 3.37±0.360.68±0.060.31±0.070.075 10 3.32±0.210.72±0.070.28±0.06雄0.15 10 3.15±0.220.70±0.080.28±0.080.3 10 3.14±0.370.72±0.050.34±0.070 10 3.58±0.310.77±0.070.31±0.070.075 10 3.39±0.790.74±0.080.29±0.03雌0.15 10 3.42±0.190.75±0.060.31±0.060.3 10 3.40±0.610.82±0.150.32±0.105、透明质酸制剂对小鼠脏器/体重比值的影响由表7可见，各剂量组小鼠脾脏、胸腺/体重比值与对照组比较，差异无显著性。
表7透明质酸制剂对小鼠脏器/体重比值的影响(均值±标准差)组别 动物数胸腺/体重比值脾脏/体重比值P值(ml/kg.bw)(只)(mg/g) (mg/g)对照 154.27±0.72 5.75±0.941.67 153.92±0.94 6.06±1.15＞0.055.00 154.03±0.83 5.57±0.74＞0.0515.00 153.82±0.51 5.56±0.72＞0.056、30天喂养试验小结以0.075、0.15、0.30g/kg.bw的透明质酸制剂掺入饲料中喂饲大鼠30天。在试验期间，各组动物长发育良好，体重、增重及食物利用率与对照组相比，差异均无显著性(P＞0.05)；血液学、生化指标及脏体比值均在正常值范围之内；大体解剖及病理组织学检查均未见异常。表明本品未见明显的亚慢性毒性作用。
7、急性毒性试验和三项遗传毒性试验小结经透明质酸制剂对两种性别大、小鼠经口急性毒性试验，LD50均大于15g/kg.bw。根据急性毒性分级，透明质酸制剂属无毒物；经三项遗传毒性试验(Ames试验，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸染色体试验)，结果均为阴性。
三、人体研究实验透明质酸口服液制剂，经500余人平均3个月以上的连续服用，普遍反应效果良好，特别是在增强人体免疫功能，改善人体免疫力缺乏症状方面效果显著，同时未有一人反映出现毒副作用。
透明质酸口服液使用效果评价表

参加本评价试验的服用者共38人，年龄为35-85岁，每人每天服用1-2支透明质酸口服液，每支容量10ml，每支透明质酸含量为0.05克，连续服用一个月。
具体实施例方式
。
实施例1软胶囊在食用油(橄榄油)90g中加入超精细透明质酸粉5g，搅拌后制成悬浮液，灌入软胶囊成型，每粒软胶囊净重为0.5g或1g，其中含透明质酸0.025g或0.05g，用量日服1--2次，每次1--2粒。
实施例2片剂将透明质酸5g，营养成份如芦荟粉或人参粉5g，与低聚糖90g混合均匀后压制成型，每片净重0.2g--0.5g，其中含透明质酸0.01g--0.025g，用量为日服1--2次，每次1--3片。
实施例3口服液将透明质酸5g与纯水870g混合，搅拌均匀，将上述物料与芦荟粉等20g、蜂蜜或糖100g，柠檬酸5g(用于调PH值4---4.5)，混合搅拌，然后灭菌，灌装，制得口服液产品，每瓶10ml或20ml，其中含透明质酸0.05g或0.1g，每日服1---2次，每次一瓶。
本发明的优点本发明提供一种透明质酸的新用途，即透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，它包括给免疫力下降或已经具有免疫力缺乏症状的人服用透明质酸，或者是服用以透明质酸为功效成份的组合物，其剂型可以是口服液、片剂、泡腾片、胶囊。该组合物可加工成药品、保健品、食品等，产品无毒副作用，提高人体免疫力效果明显。
权利要求
1.一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用。
2.一种用于提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的方法，包括给免疫力下降或已经具有免疫力缺乏症状的人服用一定量的透明质酸。
3根据权利要求1所述的一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，其特征在于它是以透明质酸为功效成份的组合物。
4.据权利要求3所述的一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，其特征在于给免疫力下降或已经具有免疫缺乏症状的人服用一定量的含有透明质酸的组合物。
5.根据权利要求2或4所述的一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，其特征在于给免疫力下降或已经具有免疫缺乏症状的人服用一定量的含有透明质酸的组合物，其中透明质酸的用量以成人计为1克～0.001克/天/人。
6.根据权利要求5所述的一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，其特征在于给免疫力下降或已经具有免疫缺乏症状的人服用一定量的含有透明质酸的组合物，其中透明质酸的用量以成人计为0.2克～0.01克/天/人。
7.根据权利要求6所述的一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，其特征在于给免疫力下降或已经具有免疫缺乏症状的人服用一定量的含有透明质酸的组合物，其中透明质酸的用量以成人计为0.1克～0.03克/天/人。
8.根据权利要求3所述的一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用，其特征在于所述的以透明质酸为功效成份的组合物，其剂型可以是口服液、片剂、泡腾片、胶囊。
全文摘要
本发明提供了一种透明质酸在提高人体免疫力、改善免疫力缺乏症状方面的应用。它包括给免疫力下降或已经具有免疫力缺乏症状的人服用透明质酸，或者是服用以透明质酸为功效成分的组合物，其剂型可以是口服液、片剂、泡腾片、胶囊。该组合物可加工成药品、保健品、食品等，产品无毒副作用，提高人体免疫力效果明显。
文档编号A61K31/728GK1498626SQ02146200
公开日2004年5月26日 申请日期2002年11月4日 优先权日2002年11月4日
发明者张晓崧 申请人:张晓崧