专利名称：：百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途，属于医药领域。
背景技术：
：广霍香，Pogostemoncablin(Blanco)Benth，是唇形科刺蕊草属植物，多年生草本，全草药用。其味辛，微温，归脾、胃、肺三经，具有芳香化浊、开胃止呕、发表解暑的功能。广霍香的药用成分主要是其挥发油，称广霍香油(patchoulioil)，具有调节消化道功能、胃肠平滑肌解痉和抗菌作用。其主要成分是广霍香醇(patchoulialcohol,百秋李醇)，具有f丐离子拮抗作用(ChemPharmBu11，1989,37(2):345-348)。广霍香醇属三环倍半萜类化合物，可结晶，熔点5556%，沸点140°C(1.06kPa)，旋光度-97.4°(c=24，氯仿)，不溶于水，溶于醇、醚和常用有机溶剂。分子式C15H260，CAS登记号为5986-55-0，分子量为222.37，化学名为(lR-(lalpha，4beta,4-alpha,6beta，8-alpha))-Octahydro-4，8a,9，9-tetramethyl-l<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage3</formula>,6-methano-l(2H)-naphthol，结构式如下老年痴呆病是一种以进行性认知功能减退为主要临床症状的慢性中枢神经系统退行性疾病。其发病率随着年龄增长而急剧上升，我国65岁以上老年人的患病率为1%5%,85岁以上达到20%40%。老年痴呆的病理改变包括广泛的神经元丢失、脑内出现无数神经元纤维缠结(neurofibrillarytangles)和老年斑(senilepl叫ue)等。目前已上市的老年痴呆治疗药物如安理申、他克林等，可以在一定程度上改善或缓解轻度患者的痴呆症状，但不能阻止或逆转病变的进一步发展。
发明内容本发明要解决的技术问题是提供百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途。本发明要解决的另一个技术问题是提供一种防治老年性痴呆症的药物组合物。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途。一种防治老年性痴呆症的药物组合物，由活性成分百秋李醇和药学接受的辅料组成。所述药学接受的辅料包括但不限于药学上可接受的稀释剂、防腐剂、溶剂、乳化剂、佐剂和/或载体。所述防治老年性痴呆症的药物或药物组合物为口服制剂、注射剂、经肺、鼻剂、经皮或其他方式给药剂型。所述口服剂型包含但不限于胶囊、片剂、丸剂、锭剂、颗粒剂、脂质体等。本发明中的百秋李醇购自中国药品生物制品检定所，纯度达98%以上。在细胞水平，采用流式细胞术检测百秋李醇抗P淀粉样蛋白(A0)致PC12凋亡作用以及对原代海马神经元轴突生长促进作用。在动物水平，采用小鼠跳台试验和Morris水迷宫试验观测其对东莨菪碱所致老年痴呆模型小鼠学习记忆的促进作用。结果显示，百秋李醇对神经细胞具有保护及营养作用，能够改善老年痴呆模型小鼠学习记忆能力。本发明的优点是本发明经过广泛深入的研究，在筛选抗老年性痴呆病的药物中出人意料地发现百秋李醇具有神经保护及营养作用。进一步研究发现其对老年痴呆模型小鼠学习记忆有促进作用。因此，可将百秋李醇用于制备防治老年痴呆病的药物。以百秋李醇为活性成分的药物在临床上可能会有显著疗效，从而产生巨大的社会效益和经济效益。下面结合具体实施方式对本发明发明作进一步说明，并非对本发明的限定，依照本领域公知的现有技术，本发明的实施方式并不限于此，因此凡依照本公开内容所作出的本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。具体实施例方式实施例1:百秋李醇抗凋亡作用一.材料1.百秋李醇，购自中国药品生物制品检定所，纯度达98%以上。2.Ae25~35，购自Sigma公司。3.AnnexinV-FITC，FITC标记的膜联蛋白V，购自晶美生物工程有限公司。4.PI溶液，碘化丙啶溶液。5.大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)细胞株，本室传代保存。二.方法采用流式细胞术检测百秋李醇对抗八025~35导致大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡作用。实验分组如下对照组；Ae25~35处理组；不同剂量药物组。取100W的细胞悬液于流式管中，加入AnnexinV-FITC和PI溶液(20W/ml)混匀，室温避光孵育15分钟，加400WPBS，流式细胞仪分析。三.结果与正常组比，Ae2EM5处理模型组凋亡率明显增加，且有统计学意义(P〈0.01);各加药组凋亡率与模型组比显著降低(P〈0.01)，百秋李醇有抗AP:25,致PC12细胞凋亡作用。表l-百秋李醇抗AP2535致PC12细胞的凋亡作用<table>complextableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注〃与对照组比P〈0.01;A与模型组比P〈0.01实施例2:百秋李醇促进原代培养海马神经元轴突生长作用一.材料1.百秋李醇，购自中国药品生物制品检定所，纯度达98%以上。2.胰酶，浓度为0.25%，购自Sigma公司3.DMEM/F-12培养基，购自Gibco公司。4.神经生长因子(NGF)，购自北京圣日医药科技发展有限责任公司。5.胎牛血清，购自Gibco公司。6.N2，购自Gibco公司。7.B27,购自Gibco公司。8.阿糖胞苷，购自哈尔滨博莱制药有限公司。9.SD大鼠乳鼠，出生12h内，早$兼用，分为对照组和不同剂量药物组，购自军事医学科学院实验动物中心。二.方法大鼠乳鼠经体积分数为75%乙醇消毒后，断头置于含解剖液的平皿中，分离出全脑，解剖显微镜下分离海马组织。将其置于0.25%胰蛋白酶中并用剪刀剪碎。每隔4min吸取胰酶至含血清离心管中，并加入新鲜胰酶直至无肉眼可见的组织块。200目金属筛网过滤后以1000rpmmin—'离心10min。将其重悬于10%胎牛血清的DMEM/F-12种植液，接种于预先包被多聚赖氨酸的24孔板，培养过夜后换为3%胎牛血清、1%N2、腦7和3ng'mL-'阿糖胞苷的DMEM/F-12培养液。加入终浓度质量分数为0.05、0.5、5yg'mL—'百秋李醇，同时加入2ngm1/1神经生长因子(NGF);对照组仅加2ngmL—1的NGF。2d后于荧光显微镜下拍照，并统计轴突长度，方法为每组10张，每张测量各神经元轴突长度，求和后除以其神经元总数。三.结果百秋李醇本身对原代海马神经元轴突生长无促进作用，但在2ng*mL—'NGF存在下可明显促进其轴突生长，其轴突长度明显长于对照组(P<0.01)。结果表明，在极低浓度NGF存在下，百秋李醇0.055ug*mL—'的浓度范围内对原代海马神经元轴突生长有促进作用(表2)。表2:<table>complextableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注n=10^与对照组比P〈0.01实施例3:百秋李醇对老年痴呆模型小鼠学习记忆的促进作用一.材料1.百秋李醇，购自中国药品生物制品检定所，纯度达98%以上。2.东莨菪碱，徐州莱恩药业有限公司生产。3.昆明小鼠，体重1416g，雌性，分为正常对照、东莨菪碱组和不同剂量药物组，小鼠按体重均衡的原则随机原则分组，每组10只，购自军事医学科学院实验动物中心。二.方法采用小鼠跳台试验和Morris水迷宫试验观测百秋李醇对东莨菪碱所致老年痴呆模型小鼠学习记忆的促进作用。小鼠按体重均衡的原则随机原则分组。给药7d后，造模并进行试验。1.小鼠跳台试验将动物放置在平台上，适应环境3min，然后通以36V电压，训练5min。24h后测验，记录第一次跳下平台的潜伏期、5min内的错误次数和总电击时间，以此作为记忆成绩。2.Morris水迷宫试验试验前一天先将小鼠放入水迷宫中自由游泳2min以适应环境。每日上午训练前15min腹腔注射东莨菪碱5mg'kg—1，每天给药一次。第一天小鼠训练3次，每次分别从3个不同入水点将小鼠面向容器壁放入水中游泳，若小鼠在90s内不能找到水下平台，则将其直接置于平台上并停留30s。第二天开始每天上下午各训练一次，记录小鼠入水后爬上平台所用的时间、路经轨迹等作为检测小鼠对空间和线索学习的指标，24小时后按步进行复测，共训练3天。每组取4只鼠脑组织做免疫组化测定胆碱能Mi受体水平，每只鼠做两张切片，免疫组化采用SABC法，DAB显色，最后用苏木素进行核复染。每组取一张切片作为阴性对照(一抗用PBS代替)。数据分析时，每张切片按海马和皮层相同部位选取5个视野，结果用MIAS医学图像分析管理系统4.0进行处理，分析平均光密度和积分光密度。三.结果1.小鼠跳台试验跳台结果显示，与正常组比，模型组5min内错误次数明显增加，潜伏期显著縮短。与模型组比，百秋李醇组错误次数明显减少，但潜伏期有增加的趋势但无统计学差异(见表3)。表3:百秋李醇对东莨菪碱小鼠学习记忆障碍模型跳台成绩的影响组别齐'J量(mg-kg-1)错误次数(n)潜伏期(s)正常对照组—0.2±0.4259.9±95.2东莨菪碱组55.0±1.7"*8.3±2.3***百秋李醇低剂量组501.5±1.2#110.0±94.4百秋李醇高剂量组1001.0±1.1##141.2±137.8注与正常组相比，***P<0.001;与模型组相比#<0.05,辨O.Ol.2.Morris水迷宫试验Morris水迷宫结果显示，随着训练次数的增加，各组小鼠找到平台的潜伏期逐渐縮短。与对照组相比，模型组(东莨菪碱5mgkg—1)各次训练成绩均显示出显著差异。百秋李醇组从第5次训练开始与模型组显示出显著差异。结果如表4所示表4:百秋李醇对东莨菪碱小鼠学习记忆障碍模型水迷宫上台潜伏期的影响潜伏期(s)对照组东莨菪碱百秋李醇百秋李醇__(100mgkg")(50mgkg懇1)第1次60.10±29.5386.94±9.49*81.53±20.5887.38±6.64第2次40.32±31.0389.08±1.85***70.50±31.2582.46±11.23第3次40.43±27.3077.73±26.37**55.42±31.2269.87±22.16第4次24.87±10.4176.52±28.31***52.28±33.5359.81±24.90第5次19.80±12.0478.43±1.74***32.07±16.53,44.49±33.24##第6次15.22±7.4983.30±20.15***31.77±23.97###34.03±10.58###第7次17.19±12.8660.02±30.74**28.02±10.58##32.70±19.24#注与正常组相比*P<0.05,**P<0.01，***P〈0.001;与模型组相比#P<0.05，P<0.01，###PO.OOl。第l一3次为第一天训练结果，第4、5次为第二天训练结果，第6、7次为第三天训练结果。平均光密度结果显示，与正常对照组相比，模型对照组平均光密度值显著下降，说明细胞染色程度下降，胆碱能M1受体水平降低。而百秋李醇组平均光密度值均比模型组有所提高，说明药物可能使M1受体水平提高。积分光密度结果亦显示模型组比正常对照组显著降低，而百秋李醇组比模型组显著升高。说明药物组阳性细胞染色水平的整体水平升高，即抗原总量水平升高，结果见表5。表5:百秋李醇对东莨菪碱造成小鼠获得性学习记忆障碍模型脑组织M！受体水平的影响组别平均光密度积分光密度正常对照0.21±0.041077.70±612.46东莨菪碱模型0.15±0.04***261.24±103.28***百秋李醇100rag'kg—10.18±0.05抑858.88±165.8柳#百秋李醇50mgkg—10.17±0.03tt673.44±171.66#抑注与正常组相比，***PO.001;与模型组相比#P<0.05,##P<0.01，###P<0.001。权利要求1.百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途。2.—种防治老年性痴呆症的药物组合物，其特征在于由活性成分百秋李醇和药学接受的辅料组成。3.根据权利要求2所述的一种防治老年性痴呆症的药物组合物，其特征在于所述药学接受的辅料为药学上可接受的稀释剂、防腐剂、溶剂、乳化剂、佐剂和/或载体。4.根据权利要求2所述的一种防治老年性痴呆症的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为口服制剂、注射剂、经肺、鼻剂、经皮或其他方式给药剂型。5.根据权利要求4所述的一种防治老年性痴呆症的药物组合物，其特征在于所述口服剂型为胶囊、片剂、丸剂、锭剂、颗粒剂或脂质体。全文摘要本发明公开了百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途，属于医药领域。百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途。本发明的优点是本发明经过广泛深入的研究，在筛选抗老年性痴呆病的药物中出人意料地发现百秋李醇具有神经保护及营养作用。进一步研究发现其对老年痴呆模型小鼠学习记忆有促进作用。因此，可将百秋李醇用于制备防治老年痴呆病的药物。以百秋李醇为活性成分的药物在临床上可能会有显著疗效，从而产生巨大的社会效益和经济效益。文档编号A61K31/045GK101194899SQ20071017634公开日2008年6月11日申请日期2007年10月25日优先权日2007年10月25日发明者徐风华,栾复新,黄晓舞申请人:中国人民解放军总医院