专利名称：一种连翘酯苷脂质体的制备方法
技术领域：
本发明涉及药物制剂领域，具体是一种中药有效成分连翘酯苷脂质体的制备方法。
背景技术：
连翘酯苷为咖啡酸衍生物，具有多种药理活性。研究发现连翘酯苷对多种致病菌有极强的抑制作用，且具有抑制磷酸二酯酶(cAMP)及其抗真菌作用；实验表明从青翘提取的连翘酯苷对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径可达18mm左右；连翘酯苷对合胞病毒、腺病毒 3型、腺病毒7型、柯萨奇B组病毒3型和5型均有抑制作用，且能诱生α干扰素，协同其抗病毒等作用；通过建立动物发热模型证明连翘酯苷还具有一定解热功效；此外，连翘酯苷还具有较强的清除活性氧能力，并对由·0Η引发的DNA损伤有保护作用；连翘酯苷除具有抗菌、抗病毒、解热、抗氧化能力之外，有人将其作为抗肿瘤化疗增敏减毒药物和抗艾滋病增敏减毒药物使用，来提高机体免疫力，降低化疗药引起的血细胞下降、肝肾损伤等副作用。脂质体类似于生物膜结构，本身具有两亲性，生物相容性好，经修饰改良后的脂质体又具有了靶向性高、稳定性好、缓释可控、安全可靠等优点，在一定程度上解决了药物应用的许多难题。研究发现连翘酯苷虽具有明显的抗菌抗病毒活性，但其在体内的半衰期却很短， 利用脂质体载药优势，通过脂质体包载连翘酯苷来提高药物的生物利用度。

发明内容
本发明目的是提供一种生物利用度高度、包封率高的一种连翘酯苷脂质体的制备方法。连翘酯苷脂质体的制备，其特征在于包括下列步骤(1)按处方量称取蛋黄卵磷脂、胆固醇、抗氧化剂。将蛋黄卵磷胆固醇、抗氧化剂用有机溶剂溶解。(2)按处方量称取连翘酯苷，加入磷酸盐缓冲液溶解。(3)将溶解的连翘酯苷与药用辅料混合超声后于旋转蒸发仪上减压蒸发，除去有机溶剂。(4)待有机溶剂挥发完全后，加磷酸盐缓冲液水化处理。所述步骤中的(3)，连翘酯苷溶液与溶解的药物辅料体积比为1 2 3。所述步骤中的(3)，连翘酯苷溶液与药物辅料混合后超声时间在5min IOmin左
右ο所述步骤中的(3)，旋转蒸发时的转速为30rpm 90rpm，水浴温度控制在20°C 30 0C，压力控制在 0. 06MPa 0. 08MPa。所述步骤中的O)，所用磷酸盐缓冲液的pH为6. 8 7. 4之间。本发明连翘酯苷脂质体中连翘酯苷含量检测条件为高效液相色谱(HPLC)外标法。
色谱条件为AgilentZORBAX SB-C18 柱 Q5(toimX4· 6讓，5 μ m)；流动相乙腈-水-冰醋酸(体积比20 80 0. 25)；流速1.0mL/min;检测波长325nm;柱温25°C。本发明连翘酯苷脂质体的制备方法简单，所得连翘酯苷脂质体包封率在80%以上。对制得的连翘酯苷脂质体加冻干保护剂后可冻干制备粉针。
具体实施例方式实施例1称取连翘酯苷IOmg.，蛋黄卵磷脂640mg，以胆固醇、磷脂1 2的比例称取胆固醇 320mg，加入4%的维生素E。将磷脂、胆固醇、维生素E溶于3ml的乙醚，IOmg的连翘酯苷溶于Iml的磷酸盐缓冲液(pH6. 8)，两者混合后超声5min-10min使之形成均勻乳液后，旋转减压蒸发。水浴温度25°C，转速60rpm，压力控制在0. 06-0. 08MPa。待50min后加5ml磷酸盐缓冲液(PH6. 8)水化20min后滤膜过滤得连翘酯苷脂质体乳液，得包封率为85. 52%。实施例2称取连翘酯苷16mg，蛋黄卵磷脂320mg，以胆固醇、磷脂1 8的比例称取胆固醇 40mg，加入4%的维生素E，将磷脂、胆固醇、维生素E溶于3ml的乙醚，IOmg的连翘酯苷溶于Iml的磷酸盐缓冲液(pH6. 8)，两者混合后超声5min-10min使之形成均勻乳液后，旋转减压蒸发。水浴温度25°C，转速60rpm，压力控制在0. 06-0. 08MPa。待50min后加5ml磷酸盐缓冲液(PH6. 8)水化20min后滤膜过滤得连翘酯苷脂质体乳液，所得脂质体包封率为 85. 19%。实施例3连翘酯苷32mg.，蛋黄卵磷脂640mg，以胆固醇、磷脂1 4的比例称取胆固醇 160mg，加入4%的维生素E，将磷脂、胆固醇、维生素E溶于3ml的乙醚，IOmg的连翘酯苷溶于Iml的磷酸盐缓冲液(pH6. 8)，两者混合后超声5min-10min使之形成均勻乳液后，旋转减压蒸发。水浴温度25°C，转速60rpm，压力控制在0. 06-0. 08MPa。待50min后加5ml磷酸盐缓冲液(PH6. 8)水化20min后滤膜过滤得连翘酯苷脂质体乳液，得包封率为84. 70%。实施例4将连翘酯苷脂质体加5%甘露醇和10%的蔗糖，分装冷冻干燥，得冻干粉针。
权利要求
1.连翘酯苷脂质体，其特征在于由连翘酯苷(A)、蛋黄卵磷脂(B)、胆固醇(C)、抗氧化剂组成。
2.如权利要求1所述的连翘酯苷脂质体，其特征在于各部分比例为A B:=l 80 1 20，同时满足 B C = 8 1 2 1。
3.如权利要求1所述的连翘酯苷脂质体，其特征在于连翘酯苷纯度大于70%，蛋黄卵磷脂为纯度> 98%的注射级药用辅料，抗氧化剂选用维生素类，含量在 4%之间。
4.如权利要求1所述的连翘酯苷脂质体，其特征在于用该脂质体可制成冻干粉针。
5.如权利要求1所述的连翘酯苷脂质体的制备，其特征在于包括下列步骤(1)按处方量称取蛋黄卵磷脂、胆固醇、抗氧化剂。将蛋黄卵磷胆固醇、抗氧化剂用有机溶剂溶解。(2)按处方量称取连翘酯苷，加入磷酸盐缓冲液溶解。(3)将溶解的连翘酯苷与药用辅料混合超声后于旋转蒸发仪上减压蒸发，除去有机溶剂。(4)待有机溶剂挥发完全后，加磷酸盐缓冲液水化处理。
6.如权利要求4所述，其特征在于所用有机溶剂为乙醚或氯仿，连翘酯苷溶液与溶解的药物辅料体积比为1 2 3。
7.如权利要求4所述，其特征在于连翘酯苷溶液与药物辅料混合后超声时间在5min IOmin左右。
8.如权利要求4所述，其特征在于旋转蒸发时的转速为30rpm 90rpm，水浴温度控制在20°C 30°C，压力控制在0. 06MPa 0. 08MPa。
9.如权利要求4所述，其特征在于所用磷酸盐缓冲液的pH为6.8 7. 4之间。
全文摘要
本发明涉及一种连翘酯苷脂质体及其制备方法，本发明公开的连翘酯苷脂质体是由纯度＞70％的连翘酯苷、蛋黄卵磷脂、胆固醇、抗氧化剂为主制备而成，制备而成的连翘酯苷脂质体包封率在80％以上。制备而成的连翘酯苷脂质体提高了药物在体内的生物利用度。
文档编号A61P31/20GK102512371SQ201210003410
公开日2012年6月27日 申请日期2012年1月9日 优先权日2012年1月9日
发明者吴国娟, 庄英华, 张中文, 郭玮 申请人:北京农学院