专利名称：制备多生物素化化合物的方法
制备多生物素化化合物的方法本发明涉及诊断领域。具体地，本发明涉及用于产生可用于信号放大的多生物素化树枝状大分子化合物的方法，特别是在诊断试验中检测分析物的过程中。允许检测分析物诸如蛋白质及核酸的探针被广泛地使用，并且是选择用于体外诊断和体内诊断的工具。然而，由于这些分析物不总是充足地大量地存在，因此，可能难以检测这些分析物。因此，需要检测放大系统。已开发出用于检测不足量的分析物的一些技术。这些技术包括增加分析物的量，例如利用PCR技术或NASBA技术，或放大检测，例如通过利用具有多种标记物的结构。因此，专利申请EP0774119A描述了具有多种标记物的轭合物,所述多种标记物包括具有最多100个单体单元的聚合物支持物，所述聚合物支持物含有I至10个半抗原分子和I至10个标记物基团，并且还描述了通过以下的固相合成来制备这些轭合物(a)通过 在支持物的预定的位置引入与半抗原分子和/或标记物基团共价偶联的单体衍生物，和/或(b)合成后，通过使半抗原分子和/或标记物基团与支持物的反应基偶联。树枝状大分子是被清楚地定义的具有多个分支并以多个外围官能团封端的大分子。由于树枝状大分子具有多个官能团的事实，树枝状大分子优势之一是它们可被用作稳定的偶联剂，如由该申请人提交的专利申请W003/72546中所描述的。另一个优势还在于以下事实树枝状大分子是具有多种标记物的结构，因为它们的外围官能团可被用于结合多种标记物诸如生物素、荧光团或其组合。因此，专利申请W001/02861描述了一方面结合至I至1200个探针且另一方面结合至I至1200个标记物的树枝状大分子。这些树枝状大分子被用于信号放大。其它的多生物素化树枝状大分子还描述于专利申请W000/72802中。然而，制备树枝状大分子的常规方法具有以下缺点树枝状大分子在液相中合成，这比在固相中更复杂且更漫长。此外，一些方法产生非中性树枝状大分子和非极化树枝状大分子。本申请人现已惊奇地开发出制备多生物素化树枝状大分子化合物的新颖方法，在新颖方法允许可重现地且可控地制备如下的生物素化化合物的意义上说，新颖方法可以克服现有技术方法的缺点-水溶性的，尽管是电中性的，-极化的，由于其功能(包括生物素功能)的单独且精确的空间分布，及-在固相中合成。因此，本发明的第一目的是制备具有式(I)的化合物的方法
权利要求
1.用于制备具有式(I)的化合物的方法
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于所述取代基AA1和AA2，如果适用，AA3、AA4和AA5,是相同的，并优选地是赖氨酸衍生物。
3.根据权利要求I或2中任一项所述的方法，其特征在于所述取代基&、G1，如果适用，G2、G3> G4 和 G5,是相同的，且优选具有式(-NH-CH2-CH2-0-CH2-CH2-0-CH2-C0-)。
4.根据前述权利要求中的一项所述的方法，其特征在于整数IVIi1，如果适用，n2、n3、n4和n5,是相同的，并优选地等于2或3。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于所述W基团是甲氧基三苯甲基。
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于相同的，并且，如果适用，WJPW’ 2是相同的，WJPW’ 3是相同的，WjPW’ 4是相同的，且WjPW’ 5是相同的。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述胺保护基WpW、，并且，如果适用，W2、r 2、％、r 3、胃4和w’ 4、w5和w’ 5，是芴基甲氧基羰基。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于所述取代基AA是赖氨酸衍生物，且B是NH2。
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于X是
10.具有式(I)的化合物
11.根据权利要求10所述的具有式⑴的化合物，其特征在于所述取代基AA1和AA2,如果适用，AA3、AA4和AA5,是相同的，并优选地是赖氨酸衍生物。
12.根据权利要求10或11中任一项所述的具有式(I)的化合物，其特征在于所述取代基6(|、61，如果适用，62、63、64和G5,是相同的，且优选具有式(-NH-CH2-CH2-O-CH2-CH2-O-CH2-CO-)。
13.根据权利要求10至12中的一项所述的具有式(I)的化合物，其特征在于整数％、n1；如果适用，n2、n3、n4和n5,是相同的，并优选地等于2或3。
14.根据前述权利要求10至13中任一项所述的具有式(I)的化合物，其特征在于X是且Y是生物素。
15.根据权利要求10至14中任一项所述的具有式(I)的化合物，其特征在于AA是赖氨酸衍生物，且B是NH2。
16.根据权利要求10至15中任一项所述的具有式(I)的化合物，其特征在于所述抗配体是Fab’片段。
17.根据权利要求10所述的具有式(I)的化合物，其特征在于
18.通过权利要求I至9中所描述的方法获得的化合物在诊断试验中用于信号放大的用途。
19.权利要求10至17中所描述的化合物在诊断试验中用于信号放大的用途。
全文摘要
本发明涉及制备具有式(I)的化合物的新颖的方法，其中-X是生物素或Y是生物素或Z是生物素或V是生物素或还涉及具有式(I)的化合物及其在临床和工业诊断中的用途。
文档编号A61K31/4188GK102822673SQ201180005882
公开日2012年12月12日 申请日期2011年1月11日 优先权日2010年1月12日
发明者赛维尔·拉库 申请人:生物梅里埃公司