专利名称：用于治疗眼病的整联蛋白抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明总的涉及药物领域，并且具体涉及利用整联蛋白受体αvβ3和/或αvβ5的拮抗剂来预防和/或治疗眼病的方法和组合物。更具体地讲，本发明涉及利用整联蛋白受体αvβ3和/或αvβ5的拮抗剂来预防和/或治疗眼病的方法和组合物，其中所述组合物通过注射到眼玻璃体内进行给药。
背景技术：
整联蛋白是一类细胞受体，已知它与细胞外基质蛋白结合因此介导通常称作粘着事件的细胞-细胞和细胞-细胞外基质的相互作用。整联蛋白受体构成一类具有共同结构特性的跨膜蛋白，它是由α和β亚单位形成的杂二聚糖蛋白复合物。
已知一类称为玻连蛋白受体(因为最初发现了其具有优先与玻连蛋白结合的特性而得名)的整联蛋白受体涉及三种不同的整联蛋白，称作αvβ1、αvβ3和αvβ5。Horton，Int.J.Exp.Pathol.，71741-759(1990)。αvβ1结合纤连蛋白和玻连蛋白。αvβ3结合各种各样的配体，包括纤维蛋白、纤维蛋白原、层粘连蛋白、血小板反应蛋白、玻连蛋白、von Willebrand′s因子、骨桥蛋白(osteospontin)和骨涎蛋白I。αvβ5结合玻连蛋白。这三种整联蛋白在各种组织的许多细胞相互作用中所起的特定的细胞粘附作用仍有待进一步研究，但很清楚的一点是，有许多具有不同生物功能的不同的整联蛋白。
许多整联蛋白的配体中的一个重要的识别位点是精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(RGD)三肽序列。在以上确定的玻连蛋白受体整联蛋白的所有配体中均发现有RGD。这种RGD识别位点可通过包含RGD序列的多肽(“肽”)进行模拟，这种RGD肽是整联蛋白功能的公知抑制剂。
例如，EP 0770622 A2中公开了包含RGD序列的整联蛋白抑制剂。所述化合物尤其可抑制β3和/或β5整联蛋白受体与配体的相互作用，在整联蛋白αvβ3、αvβ5和αIIβ3的情形下活性特别强，但对αvβ1、αvβ6和αvβ8受体也具有相对的活性。这些作用可按照例如J.W.Smith等人在J.Biol.Chem.265，12267-12271(1990)中所描述的方法证实。此外，这些化合物还具有抗炎作用。
在包含RGD序列的整联蛋白拮抗剂的基础上，已获得了多种不含RGD序列的拮抗剂。这些不含RGD序列的整联蛋白抑制剂公开于例如下述文献中WO 96/00730 A1、WO 96/18602 A1、WO 97/37655 A1、WO 97/06791 A1、WO 97/45137 A1、WO 97/23451 A1、WO 97/23480A1、WO 97/44333 A1、WO 98/00395 A1、WO 98/14192 A1、WO 98/30542A1、WO 99/11626 A1、WO 99/15178 A1、WO 99/15508 A1、WO 99/26945A1、WO 99/44994 A1、WO 99/45927 A1、WO 99/50249 A2、WO 00/03973A1、WO 00/09143 A1、WO 00/09503 A1、WO 00/33838 A1。
DE 1970540 A1公开了一种用作αv整联蛋白受体、特别是整联蛋白αvβ3和αvβ5的整联蛋白抑制剂的双环芳族氨基酸。所述化合物作为粘附受体拮抗剂对玻连蛋白受体αvβ3的活性特别强。这种作用例如可通过J.W.Smith等，J.Biol.Chem.265，11008-11013和12267-12271(1990)中所描述的方法证实。
WO 00/26212 A1公开了用作αv整联蛋白受体、特别是整联蛋白αvβ3和αvβ5的整联蛋白抑制剂的苯并吡喃酮和苯并二氢吡喃酮衍生物。这些化合物作为玻连蛋白受体αvβ3的粘附受体拮抗剂也是特别有效的。
已有人提出将整联蛋白抑制剂在人药和兽药中用作药物活性成份，特别是用于预防和治疗各种疾病。具体而言，它们可用于治疗和预防循环疾病、血栓形成、心肌梗塞、动脉硬化、炎症、中风、心绞痛、肿瘤疾病、溶骨性疾病、特别是骨质疏松症、血管生成和由血管生成引起的疾病，例如眼糖尿病性视网膜病、黄斑变性、近视、眼组织胞浆菌病、风湿性关节炎、骨关节炎、新血管生成性青光眼(rubeotic glaucoma)，以及溃疡性结肠炎、节段性回肠炎、多发性硬化症、牛皮癣和血管成形术后的再狭窄。
在美国，由于血管生成而导致的眼疾是引起视力丧失的主要原因。年龄超过65岁的人群中，视力丧失主要是由与年龄有关的黄斑变性(AMD)引起的，而在低于65岁的人群中，则主要是由糖尿病性视网膜病引起的。
在2000年3月6日的华尔街杂志(Wall Street Journal)的一篇综述性文章中指出了AMD的发病情况及现行的治疗办法。按照该文章，目前大约有1200万美国人患有AMD。AMD进行性地破坏负责中枢视觉和色觉的斑点。在某些情形下，中枢视觉变模糊可在几个星期或几个月内迅速发生。这种疾病存在两种形式即所谓“萎缩性”和“渗出性”疾病。虽然渗出性AMD仅占总AMD人群的10％，但其占所有AMD相关性失明的90％。
直到最近，对于渗出性AMD的唯一治疗方法仍是使强激光束照向有害的血管以加热和使其凝结。但是，仅仅有约15％的渗出性AMD患者可进行这种激光外科手术。目前，其它的治疗手段还仅处于实验研究阶段。一种方法被称之为光动力学治疗，其是采用低能量的激光与吸光染料注射进行联合治疗。另一种治疗方法是一种偏向于外科手术的方法，也被称为“有限视网膜易位”法。在该方法中，从眼外壁中分离和旋转视网膜然后用高能激光破坏渗漏的血管。
US 5,766,591描述了含RGD的αvβ3拮抗剂用于对在视网膜组织中发生新血管生成的患者进行治疗的用途。更具体地说，该专利提出了采用所述拮抗剂来治疗患有糖尿病性视网膜病、黄斑变性、新血管生成性青光眼的患者。但是，对于该适应症并未提供任何实施例。对于给药方式仅仅给出了一般信息。具体提及了静脉内给药、腹膜内给药、肌内给药、腔内给药和透皮给药。在所有情形下，相对于其它整联蛋白如αvβ5，αvβ3拮抗剂优选显示出对αvβ3的选择性。
WO 97/06791 A1描述了αvβ5拮抗剂也可以用于抑制血管生成。与US5,766,591中关于αvβ3拮抗剂所描述的内容相似，WO 97/06791 A1提出了用αvβ5拮抗剂来治疗糖尿病性视网膜病、黄斑变性和新血管生成性青光眼。关于给药途径，具体提及了静脉内给药、眼内给药、滑膜内给药、肌内给药、透皮给药和口服给药。
本发明描述业已发现，αvβ3和/或αvβ5整联蛋白受体的抑制剂具有特别有用的药理学和物理化学性质，并具有良好的耐受性，具体地讲，可以通过将所述抑制剂注射到眼玻璃体内来预防和治疗患者眼血管生成引起的眼病。
因此，本发明涉及预防和/或治疗患者由眼内血管生成引起的眼病的方法，该方法包括将包含足以抑制眼血管生成的治疗有效量的αvβ3和/或αvβ5抑制剂的组合物注射到所述患者的眼玻璃体内。
玻璃体处于眼睛的后部并且占据晶状体后眼球腔的大约五分之四。玻璃体由称作玻璃体液的凝胶状物质形成。正常人眼的玻璃体液含有大约99％的水，以及1％的大分子物质，包括胶原、透明质酸、可溶性糖蛋白、糖和其他低分子量代谢物。
为了将药物应用到玻璃体内，可将足以抑制眼血管生成的αvβ3和/或αvβ5抑制剂通过穿过平面部分(pars plana)的针头直接注射到玻璃体内。
治疗有效量为当注射到玻璃体内时足以引起可测得的抑制眼组织血管生成的抑制剂的量。例如，通常使用的αvβ3和/或αvβ5抑制剂的量大约为0.5μg至约5mg。
本发明的方法尤其可用于预防和/或治疗糖尿病性视网膜病、黄斑变性、近视和组织胞浆菌病。
在本发明的优选实施方案中，在预防和/或治疗眼疾的方法中，使用包含氨基酸序列RGD的多肽作为αvβ3和/或αvβ5抑制剂。如上所述，RGD是存在于整联蛋白例如纤连蛋白或玻连蛋白的天然配体中的肽序列Arg-Gly-Asp(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)。含可溶性RGD的直链或环状肽能够抑制该整联蛋白与其相应的天然配体间的相互作用。
在下表中给出了本文中采用的氨基酸残基的缩写Ala A 丙氨酸Arg R 精氨酸Asp D 天门冬氨酸D-homoPhe D-高-苯丙氨酸D-Nal D-3-(2-萘基)丙氨酸D-Phe D-苯丙氨酸D-Phg D-苯基甘氨酸D-Trp D-色氨酸D-Tyr D-酪氨酸Gly G 甘氨酸4-Hal-Phe 4-卤代-苯丙氨酸homoPhe 高-苯丙氨酸Ile I 异亮氨酸Leu L 亮氨酸Nal 3-(2-萘基)丙氨酸Nle 正亮氨酸Phe F 苯丙氨酸Phg 苯基甘氨酸Trp W 色氨酸Tyr Y 酪氨酸Val V 缬氨酸用于预防和/或治疗眼病的特别优选的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式I的化合物及其生理可接受的盐环-(Arg-Gly-Asp-D-(A)nE)I，其中D为D-Phe、Phe、D-Trp、Trp、D-Tyr、Tyr、D-homoPhe、homoPhe、D-Nal、Nal、D-Phg、Phg或4-Hal-Phe(D或L型)，其中，Hal为F、Cl、Br、I，E为Val、Gly、Ala、Leu、Ile或Nle，A为具有1-18个碳原子的烷基，且n为0或1。
在式I中，烷基优选为甲基、乙基、异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基。
在本发明的方法中，更优选使用子结构式Ia所表示的多肽作为αvβ3和/或αvβ5抑制剂，其与式I一致，但其中D为D-Phe且E为Gly、Ala、Val、Leu、Ile或Nle。
此外，特别优选使用由子结构式Ia所表示的化合物的所有生理学上相容的盐。
在所述方法中最优选的活性化合物为环-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Val)和环-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal)。
在EP 0770622 A2中描述了这种由式I描述的含RGD的肽以及上文中具体提及的肽，该文献的内容引入本申请作为参考。因此，式I及子结构式Ia的取代基的含义与EP 0770622 A2中第5页第24-32行以及第5页第33-41行中描述的子结构式Ia以及子结构式Ib的取代基的定义相同。
业已发现，不是多肽并且不含RGD序列的αvβ3和/或αvβ5整联蛋白受体的抑制剂也可用于通过将所述抑制剂注射到眼玻璃体内来预防和治疗由于眼内血管生成而引起的患者眼病。
因此，在本发明方法的另一个优选实施方案中，用于预防或治疗眼病的方法中所采用的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式II化合物及其生理上可接受的盐
其中R1为H、1-6个碳原子的烷基或苄基，R2为R10、CO-R10、COOR6、COOR10、SO2R6或SO2R10，R3为H、Hal、OA、NHR10、N(R10)2、-NH-酰基、-O-酰基、CN、NO2、OR10、SR10、R2或CONHR10，R4为H、＝O、＝S、C1-C6-烷基或酰基，R5为NH2、H2N-C(＝NH)或H2N-(C＝NH)-NH，其中，伯氨基也可带有常规的氨基保护基或者可被下述基团单、二或三取代R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，或者R5为R6，R7、R8彼此独立地为H或不存在，R7和R8也可合在一起为键，X、Y彼此独立地为＝N-、-N-、O、S、-CH2-或＝C-，条件是X、Y中至少有一个是＝N-、-N-、O或S，W、Z彼此独立地为O、S、NR1、C(＝O)、CONH、NHCO、C(＝S)NH、NHC(＝S)、C(＝S)、SO2NH、NHSO2、CA＝CA′或不存在，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R9为H、Hal、OA、NHA、NAA′、NH酰基、O酰基、CN、NO2、SA、SOA、SO2A、SO2Ar或SO3H，R10为H、A、Ar或具有7-14个碳原子的芳烷基，R11为H或具有1-6个碳原子的烷基，
A、A′彼此独立地为H或未取代的或被R9-单、二-或三-取代的烷基或环烷基，其中各基团分别具有1-15个碳原子，其中有1、2或3个亚甲基可被N、O和/或S代替，Ar为未取代的或被A-和/或R9-单、二-或三-取代的具有0、1、2、3或4个N、O和/或S原子的单核或双核芳环体系，Hal为F、Cl、Br或I，且m、n彼此独立地为0、1、2、3或4。
用于本发明方法中的特别优选的αvβ3和/或αvβ5抑制剂可由子结构式IIa-IIg表示，它们在其它方面与式II相同，但是，其中，在IIa)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)或H2N-C(＝NH)-NH，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R10为H、A或苄基，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIb)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，
R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，并且其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R10为H、A或苄基，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIc)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)或H2N-C(＝NH)-NH，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，A为具有1-6个碳原子的烷基，R10为H、具有1-6个碳原子的烷基、樟脑-10-基或苄基，R11为H，m、n彼此独立地为0、1或2；在IId)中
R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为＝NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R10为H、1-6个碳原子的烷基、樟脑-10-基或苄基，R11为H，A为未取代的1-6个碳原子的烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIe)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为1H-咪唑-2-基、噻唑-2-基、1H-苯并咪唑-2-基、2H-吡唑-2-基、1H-四唑-5-基、2-亚氨基-咪唑烷-4-酮-5-基、1-A-1，5-二氢-咪唑-4-酮-2-基、嘧啶-2-基或1，4，5，6-四氢-嘧啶-2-基，
R10为H、1-6个碳原子的烷基、樟脑-10-基或苄基，R11为H，A为未取代的1-6个碳原子的烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIf)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)或H2N-C(＝NH)-NH，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R10为Ar，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIg)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，
R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R10为Ar，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIh)中，R1为H或具有1-6个C原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)、H2N-C(＝NH)-NH、具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-CH2-，Y为NH或O，R7、R8为H，R10为A、Ar、芳烷基或Het，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2。
式II和子结构式IIa-IIg的化合物公开于DE 19705450 A1中，该文献公开的全部内容引入本申请作为参考。因此，式II及子结构式IIa-IIg的取代基与DE 19705450 A1第2页第3-43行以及第5页第58行至第7页第30行所定义的式I及子结构式Ia-Ig的取代基具有相同的含义。取代基的定义在DE 19705450 A1的第4页第35行至第5页第56行中给出。
更优选在本发明的方法中使用如下αvβ3和/或αvβ5抑制剂(2S)-2-[(R)-樟脑-10-磺酰氨基]-3-{3，4-二氢-2-(3-胍基-丙基)-(2R)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-苄氧基碳酰氨基-3-(2-胍基甲基-1，4-苯并二噁烷-6-基)丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-[3，4-二氢-2-(2-胍基-2-氧代乙基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基]丙酸；(2S)-2-苄氧基碳酰氨基-3-(2-胍基乙酰氨基甲基-1，4-苯并二噁烷-6-基)丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)-氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-苯并咪唑基)-氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-{3，4-二氢-2-[2-(2-亚氨基-4-氧代咪唑烷-5-基)乙基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)氨基甲酰基乙基]-(2S)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-[(R)-樟脑磺酰氨基]-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-苯并咪唑基)氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸，(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(丁基磺酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(4-氟苯基磺酰氨基)-丙酸；
(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，4，6-三甲基苯基磺酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(叔丁氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(二苯基甲基磺酰氨基)-丙酸；及其生理上可接受的盐。
最优选的是(2S)-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)氨基甲酰基-乙基]-(2S)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸(2S)-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)氨基甲酰基-乙基]-(2R)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(丁基磺酰氨基)-丙酸；和(2S)-2-[(R)-樟脑磺酰氨基]-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-苯并咪唑基)-氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸。
在本发明的另一个优选实施方案中，用于预防或治疗眼病的方法中所采用的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式III化合物及其生理可接受的盐和溶剂化物
其中R1为CH2OR10、COOR10、CONHR10或CON(R12)2，R2为R10、CO-R10、CO-R6、COOR6、COOR10、SO2R6、SO2R10、CONHR6、CON(R6)2、CONHR10或CON(R12)2，R3为H、Hal、NHR10、N(R12)2、NH-酰基、-O-酰基、CN、NO2、OR10、SR10、SO2R10、SO3R10、COOR10、CONHR6、CON(R6)2、CONHR10或CON(R12)2，R4为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，R5为NH2、H2N-C(＝NH)或H2N-(C＝NH)-NH，其中，伯氨基也可带有常规的氨基保护基或者可被下述基团单、二或三取代R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，或者R5为R6-NH-，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R7，R8彼此独立地为H或不存在，R7和R8也可合在一起为键，Z为O、S、NH、NR1、C(＝O)、CONH、NHCO、C(＝S)NH、NHC(＝S)、C(＝S)、SO2NH、NHSO2、CA＝CA′或不存在，R9为H、Hal、OR11、NH2、NHR12、N(R12)2、NH酰基、O酰基、CN、NO2、SR11、SOR12、SO2R12或SO3H，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，R11为H或具有1-6个碳原子的烷基，R12为具有1-6个碳原子的烷基，A为H或具有1-15个碳原子的烷基或具有3-15个碳原子的环烷基，其为未取代的或被R9单、二或三取代，并且，其中有1、2或3个亚甲基还可以被N、O和/或S代替，Ar为具有0、1、2、3或4个N、O和/或S原子的单核或双核芳环体系，其为未取代的或被A和/或R9单、二或三取代，
Hal为F、Cl、Br或I，m、n彼此独立地为0、1、2、3或4。
在本发明方法的该实施方案中，特别优选的αvβ3和/或αvβ5抑制剂可由子结构式IIIa-IIIn表示，它们在其它方面与式III相同，但是，其中在IIIa)中R3为H；在IIIb)中R3为H，且R2为COOR10或SO2R10；在IIIc)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，且R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基；在IIId)中m为0；在IIIe)中m为0，且R3为H；在IIIf)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，且m为0；
在IIIg)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，且m为0；在IIIh)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，A为H或未取代的1-15个碳原子的烷基或3-15个碳原子的环烷基，Ar为苯基或萘基，且m为0；在IIIi)中，R6为具有1-4个氮原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O；在IIIj)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，m为0；R6为具有1-4个氮原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O；
在IIIk)中Z不存在；在IIIl)中Z不存在，且R3为H；在IIIm)中Z不存在，R3为H，且R2为COOR10或SO2R10；在IIIn)中Z不存在，R3为H，R4为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，R6为具有1-4个氮原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，A为H或未取代的1-6个碳原子的烷基，Ar为苯基或萘基，且m为0。
式III和子结构式IIIa-IIIn的化合物公开于WO 00/26212 A1，该文献公开的全部内容引入本申请作为参考。因此，式III及子结构式IIIa-IIIn的取代基与WO 00/26212 A1第1页第5行至第2页第31行以及第13页第20行至第15页第6行所公开的式I及子结构式Ia-In的取代基具有相同的含义。取代基的定义在WO 00/26212 A1的第8页第18行至第13页第10行中给出。
更优选在本发明方法的该实施方案中使用如下αvβ3和/或αvβ5抑制剂(2S)-3-[2-(3-氨基丙基)-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基]-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-[2-(3-胍基丙基)-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基]-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-苯并咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-丁基磺酰氨基丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，4，6-三甲基苯基)磺酰氨基丙酸；及其生理上可接受的盐和溶剂化物。
最优选的是(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-丁基磺酰氨基丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；和
(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，4，6-三甲基苯基)磺酰氨基丙酸。
在本发明方法的另一个优选实施方案中，用于预防或治疗眼病的方法中所采用的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式IV的化合物及其生理上可接受的盐和溶剂化物 其中A和B彼此独立地为O、S、NH、NR7、CO、CONH、NHCO或直连键，X为未取代的或被R4或R5单取代的具有1-2个碳原子的亚烷基或是直连键，R1为H、Z或-(CH2)o-Ar，R2为H、R7或-C(O)Z，R3为NHR6、-NR6-C(＝NR6)-NHR6、-C(＝NR6)-NHR6、-NR6-C(＝NR9)-NHR6、-C(＝NR9)-NHR6或Het1，R4或R5彼此独立地为H、氧代、R7、-(CH2)o-Ar、-C(O)-(CH2)o-Ar、-C(O)-(CH2)o-R7、-C(O)-(CH2)o-Het、Het、NHR6、NHAr、NH-Het、OR7、OAr、OR6或O-Het，R6为H、-C(O)R7、-C(O)-Ar、R7、COOR7、COO-(CH2)o-Ar、SO2-Ar、SO2R7或SO2-Het，R7为1-10个碳原子的烷基或1-10个碳原子的环烷基，R8为Hal、NO2、CN、Z、-(CH2)o-Ar、COOR1、OR1、CF3、OCF3、SO2R1、NHR1、N(R1)2、NH-C(O)R1、NHCOOR1或C(O)R1，
R9为CN或NO2，Z为1-6个碳原子的烷基，Ar为芳基，其为未取代的或被R8取代的，Hal为F、Cl、Br或I，Het为具有5-10个原子的饱和的、部分或完全饱和的单或二环杂环体系，其可包含1或2个氮原子和/或1或2个硫或氧原子，并且其中的杂环体系可被R8单或二取代，Het1为具有1-4个氮原子的单或二环芳族杂环体系，其可以是未取代的或被下述基团单或二取代Hal、R7、OR7、CN、NHZ或NO2，n为0、1或2，m为0、1、2、3、4、5或6，o为0、1或2。
在本发明方法的该实施方案中，特别优选的αvβ3和/或αvβ5抑制剂由子结构式IVa-IVi表示，它们在其它方面与式IV相同，但其中在IVa中，X为直连键 在IVb中，X为直连键，R2为H，R5为H，且R4为Ar
在IVc中，X为直连键，R5为H，且R4为Ar或Het；在IVd中，X为直连键，R5为H，B为O，A为NH，n为0，m为3或4，R3为Het，且R4为Ar 在IVe中，X为直连键，
R5为H，B为O，A为NH，n为0，m为3或4，且R3为Het 在IVf中，X为未取代的或被Ar取代的亚甲基，R2为H，R5为H或Ar，且R4为氧代 在IVg中，X为亚甲基，
在IVh中，X为亚甲基，R4为H或Ar，R5为H或Ar，且R2为H；在IVi中，X为亚甲基，R4为H或Ar，R5为H或Ar，B为O，A为NH，n为0，m为3或4，R3为Het，且R2为H
更优选地，用于本发明方法中的式IV的αvβ3和/或αvβ5抑制剂是3-苯基-3-{6-[3-(吡啶-2-基氨基)-丙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-{6-[4-(吡啶-2-基氨基)-丁氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-{5-[4-(吡啶-2-基氨基)-丁氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-{5-[3-(吡啶-2-基氨基)-丙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-[6-(吡啶-2-基-酰氨基羧基甲氧基)-吲哚-3-基]-丙酸；3-苯基-3-[6-(苯并咪唑-2-基-酰氨基羧基甲氧基)-吲哚-3-基]-丙酸；3-苯基-3-[6-(咪唑-2-基-酰氨基羧基甲氧基)-吲哚-3-基]-丙酸或3-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-3-{6-[2-(6-甲基氨基-吡啶-2-基)乙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸及其生理上可接受的盐和溶剂化物。
在本发明方法中使用的最优选的式IV的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为3-苯基-3-{6-[3-(吡啶-2-基氨基)-丙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸或3-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-3-{6-[2-(6-甲基氨基-吡啶-2-基)乙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸。
所述化合物及式IV和子结构式IVa-IVi的化合物公开于共同未决的德国专利申请10006139.7中，该文献全文引入本申请作为参考。因此，式IV和子结构式IVa-IVi的取代基与德国专利申请10006139.7第1页第3行至第2页第13行以及第17页第4行至第20页第9行所公开的式I及子结构式Ia-Ii的取代基具有相同的含义。取代基的定义在德国专利申请10006139.7第9页第6行至第16页第28行给出。
上文所述化合物在治疗眼病的方法中的具体适应性用若干代表性化合物经实验确证。
可以通过在刺激血管生成并随后玻璃体内施用αvβ3和/或αvβ5抑制剂后对眼中的新血管形成进行定量来证实在玻璃体内施用化合物后对血管生成的抑制作用。一种适用于证实αvβ3和/或αvβ5抑制剂对血管生成的抑制作用的模型是由Shaffer R.W.等人在Molecular，Cellular andClinical Aspects of Angiogenesis，Maragoudakis E.(编)，Plenum出版社，纽约241ff.(1996)中描述的兔子角膜微型切口模型。在该模型中，通过将含有刺激血管生成的细胞因子例如成纤维细胞生长因子(FGF)或血管内皮生长因子(VEGF)的Hydron小球植入角膜中来刺激血管生成。植入后，通过角膜缘旁(paralimbal)的玻璃体内注射给予试验用活性化合物。在预定的时间隔间后，通过用显微镜观察、照相以及对照片的计算机辅助定量分析来测定对新血管生成的影响。除了用细胞因子诱导血管形成外，还可以通过例如下述文献所述的激光光凝固法来诱导血管生成Murata T.等，IOVS，41，2309 ff.(2000)。
本发明的另一个目的是提供一种组合物，该组合物适用于预防和/或治疗由血管生成而导致的患者眼病的方法，所述方法包括向所述患者眼睛的玻璃体内注射包含足以抑制眼血管生成的治疗有效量的αvβ3和/或αvβ5抑制剂的组合物。
用于将所述化合物给药至眼玻璃体内的制剂可以是适于通过适用于向玻璃体内注射的小直径套管向玻璃体内给药的任何形式。可注射应用形式的实例包括溶液剂、悬浮液或胶体悬浮液。
适于注射到玻璃体内的组合物包含生理上可耐受的载体与作为活性组分溶解或分散在其中的本文所描述的相关药物。本文所使用的术语“生理上可接受的”是指那些能够给药到哺乳动物玻璃体内而不产生不需要的生理作用的组合物、载体、稀释剂和试剂。包含溶解或分散于其中的活性组分的可注射药理学组合物的制备是本领域公知的并且不需要根据配方进行限制。也可以将该制剂乳化。可以将活性组分与可药用并且与活性组分相容的而且适用于本文所述治疗方法的量的赋形剂混合。例如，适宜的赋形剂为水、盐水、山梨糖醇、甘油等及其组合。另外，需要时，所述组合物可包含少量辅助物质如提高活性组分效力的润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等。组合物也可以包含增稠剂如透明质酸。本发明的治疗组合物可包括其中各组分的可药用盐。可药用盐包括与无机酸如盐酸或磷酸，或与有机酸如乙酸、酒石酸、苦杏仁酸等形成的酸加成盐。与游离羧基形成的盐也可以得自无机碱如钠、钾、铵、钙或铁的氢氧化物和有机碱如异丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等。特别优选的是HCl盐。
生理上可耐受的载体是本领域公知的。液体载体的实例是无菌水溶液，其中除活性组分和水外不包含任何其他物质，或者包含缓冲剂如在生理pH值的磷酸钠、生理盐水或同时包含二者，如磷酸盐缓冲的盐水。更进一步地，水性载体可包含一种以上的缓冲盐，以及盐如氯化钠和氯化钾、山梨糖醇和其他溶质。
根据应用形式，活性化合物以立即释放或缓释的方式释出。优选采用缓释制剂，因为可减少注射次数。
一种实现缓释动力学的可能性是将活性化合物包埋或包封到纳米微粒中。纳米微粒可以以粉末、与添加的赋形剂的粉末混合物或悬浮液的形式给药。优选采用纳米微粒的胶态悬浮液，因其易于通过小直径的套管给药。
纳米微粒是直径为约5nm至约1000nm的微粒。下文中使用的术语“纳米微粒”是指由聚合物基质形成的在其中分散有活性化合物的微粒，也称为“纳米球”，该术语还指由被聚合物膜包围的包含活性化合物的芯核组成的纳米微粒，也称为“纳米胶囊”。对于向眼睛玻璃体内给药，优选纳米微粒的直径为约50nm至约500nm，特别是约100nm至约200nm。
纳米微粒可通过将分散的单体就地聚合来制备，或者采用预先形成的聚合物来制备。由于就地制备的聚合物通常不能被生物降解和/或包含有毒的副产物，因而优选由预先形成的聚合物制备的纳米微粒。由预先形成的聚合物制备的纳米微粒可由不同的技术制备，即通过乳液蒸发、溶剂置换、盐析以及乳化扩散法来制备。
乳液蒸发是由预先形成的聚合物制备纳米微粒的经典技术。按照该技术，将聚合物和活性化合物溶解于与水不混溶的有机溶剂中，将其在水溶液中乳化。然后，将粗乳液置于高能源如超声装置中，或者使其通过高压匀浆器或微流化器以减小颗粒粒度。随后，通过加热和/或真空除去有机溶剂，从而形成直径为约100nm至约300nm的纳米微粒。通常，有机溶剂采用二氯甲烷和氯仿，因其不溶于水并具有优异的增溶性、易于乳化及高挥发性。但是，这些溶剂最重要的是它们的生理学相容性。此外，减小颗粒粒度所需的高剪切力可能导致对聚合物和/或活性化合物的损害。
溶剂置换法最早记载于EP 0 274 961 A1。在该方法中，将活性化合物和聚合物溶解于可与水以任意比例混溶的有机溶剂中。在温和搅拌下，将该溶液加入含稳定剂的水溶液中，从而自发形成纳米微粒。适宜的有机溶剂和稳定剂的实例为丙酮或乙醇和聚乙烯醇。有利地是，可避免采用含氯的溶剂和剪切应力。形成纳米微粒的机理被解释为在溶剂置换过程中产生的界面湍流(Fessi H.等，Int.J.Pharm.55(1989)R1-R4)。近年来，WO 97/03657 A1描述了溶剂置换技术，其中，将含活性化合物和聚合物的有机溶剂加至水溶液中而不进行搅拌。
盐析技术最初记载于WO 88/08011 A1。在该技术中，将水不溶性聚合物和活性化合物在水溶性有机溶剂特别是丙酮中的溶液与含有胶态稳定剂和盐析剂的浓的粘稠水溶液或凝胶混合。向形成的水包油乳液水中加入一定量的水，其量足以扩散进入水相并引起有机溶剂迅速扩散进入水相，从而导致界面湍流并形成纳米微粒。存在于纳米微粒悬浮液中的有机溶剂和盐析剂随后通过反复用水洗涤而除去。或者，可通过交叉流过滤除去溶剂和盐析剂。
在乳化-扩散方法中，将聚合物溶解于用水饱和的部分水溶性有机溶剂中。将该溶液与含稳定剂的水溶液混合以形成水包油乳液。向该乳液中加入水，以使溶剂扩散进入含水外相并导致形成纳米微粒。在微粒形成过程中，每一小滴乳液可以形成许多纳米微粒。由于该现象不能完全通过界面湍流引起的对流作用进行解释，因此有人提出，有机溶剂由粗乳液小液滴的扩散携带活性化合物的分子和聚合物相进入了水相，导致超饱和的局部区域，由此，聚合物以纳米微粒的形式聚集(Quintanar-Guerrero D.等，Colloid.Polym.Sci.275(1997)640-647)。有利地是，可以使用可药用溶剂如碳酸异丙烯酯或乙酸乙酯作为有机溶剂。
采用上述方法，可形成具有各种类型聚合物的纳米微粒。对于涉及将制剂注射到眼睛玻璃体内的本发明的方法，优选采用由生物相容性聚合物制成的纳米微粒。术语“生物相容性”是指在将所述材料引入生物学环境中后，对生物学环境不会有严重影响。在生物相容性聚合物中，特别优选可生物降解的聚合物。术语“可生物降解的”是指在将所述材料引入生物学环境中后，可被酶或化学降解成随后可被除去的更小的分子。
可生物降解的聚合物是本领域技术人员公知的。其实例是，由羟基羧酸形成的聚酯如聚(乳酸)(PLA)、聚(乙醇酸)(PGA)、聚己内酯(PCL)、乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)、乳酸和己内酯的共聚物、聚-ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚(原酸)酯、聚尿烷、聚酐、聚缩醛、聚二氢吡喃或聚氰基丙烯酸酯，天然聚合物如藻酸盐和其它多糖，包括葡聚糖和纤维素、胶原和白蛋白。
脂质体是另一种易于注射的药物递送体系。因此，在本发明的方法中，活性化合物也可以通过脂质体递送体系的形式向眼睛的玻璃体内给药。脂质体是本领域技术人员公知的。可由各种磷脂来形成脂质体，如胆甾醇、磷脂酰胆碱的硬脂基胺。可用于本发明方法中的脂质体包括所有类型的脂质体，包括但不限于小单层泡囊、大单层泡囊和多层泡囊。
实施例在如Shaffer R.W.所述的兔子角膜微型切口模型(如上所述)中验证玻璃体内给药αvβ3和/或αvβ5抑制剂的效果。作为αvβ3和/或αvβ5抑制剂的实例，在实验中使用2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)-氨基甲酰基乙基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸。为了诱导血管生成，使用含有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的Hydron小球。通过将Hydron[聚(羟乙基)甲基丙烯酸酯]浇铸在特制的、具有钻入其表面的2.5mm的芯的聚四氟乙烯销子中制备含bFGF的植入物。将大约12μl浇铸物质浇铸到各销子中并且在无菌通风橱内聚合过夜，然后，通过紫外线照射灭菌。
实验由10只动物组成；在动物的每只眼中，将一个小球植入通过外科手术在兔角膜中部基质形成的“切口”中。手术过程在无菌条件下进行，手术采用Moeller-Wedel Microflex操作显微镜(Haag-Streit公司，德国)，其备有分光镜和用于照相记录个体角膜的照相机。用69 Beaver刀片切一个至角膜厚度一半深的3mm×5mm的“切口”。用刮刀将基质沿周边切开，将小球植入，其外周边缘距角膜缘2mm。在植入含bFGF的Hydron小球后，10只动物中有5只立即通过玻璃体内注射给予各眼100μl药物溶液，所述药物溶液由溶解在生理盐水中的2.0mg/ml 2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)-氨基甲酰基乙基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸组成。为了进行比较，对另外5只动物仅用生理盐水进行相同的操作。植入后，对眼睛进行照相并在预定的时间间隔后测量新血管生成的面积。植入5天和7天后获得的结果示于表1和表2中。植入5、7、10和14天后得到的结果的概述显示于表1中。

表1 单次(0天)玻璃体内注射2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)-氨基甲酰基乙基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸对植入5、7、10、14天后bFGF-刺激的角膜血管生成的影响所得到的结果清楚地证明了本发明的有利作用。尽管只单剂量给予αvβ3和/或αvβ5抑制剂并且药物制剂仅仅是溶液，但它却在很多天内强烈地抑制了新血管形成。
权利要求
1.一种预防和/或治疗患者由眼内血管生成引起的眼病的方法，该方法包括将包含足以抑制眼血管生成的治疗有效量的αvβ3和/或αvβ5抑制剂的组合物注射到所述患者的眼玻璃体内。
2.权利要求1的方法，其中αvβ3和/或αvβ5抑制剂为含RGD的多肽。
3.权利要求2的方法，其中所述多肽为式I化合物及其生理上可接受的盐环-(Arg-Gly-Asp-D-(A)nE)I，其中D为D-Phe、Phe、D-Trp、Trp、D-Tyr、Tyr、D-homoPhe、homoPhe、D-Nal、Nal、D-Phg、Phg或4-Hal-Phe(D或L型)，E为Val、Gly、Ala、Leu、Ile或Nle，A为具有1-18个碳原子的烷基，且n为0或1。
4.权利要求2的方法，其中，所述多肽为由子结构式Ia表示的化合物，所述式Ia在其它方面与式I相同，但是其中D为D-Phe，并且E为Gly、Ala、Val、Leu、Ile或Nle。
5.权利要求2的方法，其中所述多肽为环-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Val)。
6.权利要求2的方法，其中所述多肽为环-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal)。
7.权利要求2的方法，其中所述治疗有效量大约为0.5μg-5mg。
8.权利要求2的方法，其中所述眼病为糖尿病性视网膜病。
9.权利要求2的方法，其中所述眼病为黄斑变性。
10.权利要求2的方法，其中所述眼病为近视。
11.权利要求2的方法，其中所述眼病为眼组织胞浆菌病。
12.权利要求1的方法，其中αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式II化合物及其生理上可接受的盐 其中R1为H、1-6个碳原子的烷基或苄基，R2为R10、CO-R10、COOR6、COOR10、SO2R6或SO2R10，R3为H、Hal、OA、NHR10、N(R10)2、-NH-酰基、-O-酰基、CN、NO2、OR10、SR10、R2或CONHR10，R4为H、＝O、＝S、C1-C6-烷基或酰基，R5为NH2、H2N-C(＝NH)或H2N-(C＝NH)-NH，其中，伯氨基也可带有常规的氨基保护基或者可被下述基团单、二或三取代R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，或者R5为R6，R7、R8彼此独立地为H或不存在，R7和R8也可合在一起为键，X、Y彼此独立地为＝N-、-N-、O、S、-CH2-或＝C-，条件是X、Y中至少有一个是＝N-、-N-、O或S，W、Z彼此独立地为O、S、NR1、C(＝O)、CONH、NHCO、C(＝S)NH、NHC(＝S)、C(＝S)、SO2NH、NHSO2、CA＝CA′或不存在，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R9为H、Hal、OA、NHA、NAA′、NH酰基、O酰基、CN、NO2、SA、SOA、SO2A、SO2Ar或SO3H，R10为H、A、Ar或具有7-14个碳原子的芳烷基，R11为H或具有1-6个碳原子的烷基，A、A′彼此独立地为H或未取代的或被R9-单、二-或三-取代的烷基或环烷基，所述烷基或环烷基分别具有1-15个碳原子，并且其中有1、2或3个亚甲基可被N、O和/或S代替，Ar为未取代的或被A-和/或R9-单、二-或三-取代的具有0、1、2、3或4个N、O和/或S原子的单核或双核芳环体系，Hal为F、Cl、Br或I，且m、n彼此独立地为0、1、2、3或4。
13.权利要求12的方法，其中的αvβ3和/或αvβ5抑制剂选自子结构式IIa-IIg的化合物，它们在其它方面与式II相同，但是，其中，在IIa)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)或H2N-C(＝NH)-NH，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R10为H、A或苄基，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIb)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，并且其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R10为H、A或苄基，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIc)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)或H2N-C(＝NH)-NH，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，A为具有1-6个碳原子的烷基，R10为H、具有1-6个碳原子的烷基、樟脑-10-基或苄基，R11为H，m、n彼此独立地为0、1或2；在IId)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为＝NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R10为H、1-4个碳原子的烷基、樟脑-10-基或苄基，R11为H，A为未取代的1-6个碳原子的烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIe)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为1H-咪唑-2-基、噻唑-2-基、1H-苯并咪唑-2-基、2H-吡唑-2-基、1H-四唑-5-基、2-亚氨基-咪唑烷-4-酮-5-基、1-A-1，5-二氢-咪唑-4-酮-2-基、嘧啶-2-基或1，4，5，6-四氢-嘧啶-2-基，R10为H、1-4个碳原子的烷基、樟脑-10-基或苄基，R11为H，A为未取代的1-6个碳原子的烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIf)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)或H2N-C(＝NH)-NH，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R10为Ar，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIg)中R1为H或具有1-6个碳原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为R6，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-NH-、O或-CH2-，Y为NH或O，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R10为Ar，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2；在IIh)中，R1为H或具有1-6个C原子的烷基，R2为R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，R3为H，R4为H或＝O，R5为H2N-C(＝NH)、H2N-C(＝NH)-NH、具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，W、Z彼此独立地为C(＝O)、NH、CONH、NHCO或不存在，X为-CH2-，Y为NH或O，R7、R8为H，R10为A、Ar、芳烷基或Het，R11为H，A为未取代的具有1-15个碳原子的烷基或环烷基，且m、n彼此独立地为0、1或2。
14.权利要求12的方法，其中的αvβ3和/或αvβ5抑制剂选自如下化合物(2S)-2-[(R)-樟脑-10-磺酰氨基]-3-{3，4-二氢-2-(3-胍基丙基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-苄氧基碳酰氨基-3-(2-胍基甲基-1，4-苯并二噁烷-6-基)丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-[3，4-二氢-2-(2-胍基-2-氧代乙基)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基]丙酸；(2S)-2-苄氧基碳酰氨基-3-(2-胍基乙酰氨基甲基-1，4-苯并二噁烷-6-基)丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)-氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-苯并咪唑基)-氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-叔丁氧基碳酰氨基-3-{3，4-二氢-2-[2-(2-亚氨基-4-氧代咪唑烷-5-基)乙基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)氨基甲酰基乙基]-(2S)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-2-[(R)-樟脑磺酰氨基]-3-{3，4-2氢-2-[N-(2-苯并咪唑基)氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(丁基磺酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(4-氟苯基磺酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，4，6-三甲基苯基磺酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(叔丁氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(二苯基甲基磺酰氨基)-丙酸；及其生理上可接受的盐。
15.权利要求12的方法，其中的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为(2S)-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-咪唑基)氨基甲酰基-乙基]-(2S)-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-苯并二氢吡喃-6-基}-2-(丁基磺酰氨基)-丙酸；或(2S)-2-[(R)-樟脑磺酰氨基]-3-{3，4-二氢-2-[N-(2-苯并咪唑基)-氨基甲酰基甲基]-2H-1，4-苯并噁嗪-3-酮-6-基}丙酸。
16.权利要求12的方法，其中所述的量大约为0.5μg-5mg。
17.权利要求12的方法，其中所述眼病为糖尿病性视网膜病。
18.权利要求12的方法，其中所述眼病为黄斑变性。
19.权利要求12的方法，其中所述眼病为近视。
20.权利要求12的方法，其中所述眼病为眼组织胞浆菌病。
21.权利要求1的方法，其中所述αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式III化合物及其生理上可接受的盐和溶剂化物 其中R1为CH2OR10、COOR10、CONHR10或CON(R12)2，R2为R10、CO-R10、CO-R6、COOR6、COOR10、SO2R6、SO2R10、CONHR6、CON(R6)2、CONHR10或CON(R12)2，R3为H、Hal、NHR10、N(R12)2、NH-酰基、-O-酰基、CN、NO2、OR10、SR10、SO2R10、SO3R10、COOR10、CONHR6、CON(R6)2、CONHR10或CON(R12)2，R4为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，R5为NH2、H2N-C(＝NH)或H2N-(C＝NH)-NH，其中，伯氨基也可带有常规的氨基保护基或者可被下述基团单、二或三取代R10、CO-R10、COOR10或SO2R10，或者R5为R6-NH-，R6为具有1-4个N、O和/或S原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，R7，R8彼此独立地为H或不存在，R7和R8也可合在一起为键，Z为O、S、NH、NR1、C(＝O)、CONH、NHCO、C(＝S)NH、NHC(＝S)、C(＝S)、SO2NH、NHSO2、CA＝CA′或不存在、R9为H、Hal、OR11、NH2、NHR12、N(R12)2、NH酰基、O酰基、CN、NO2、SR11、SOR12、SO2R12或SO3H，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，R11为H或具有1-6个碳原子的烷基，R12为具有1-6个碳原子的烷基，A为H或具有1-15个碳原子的烷基或具有3-15个碳原子的环烷基，其为未取代的或被R9单、二或三取代，并且，其中有1、2或3个亚甲基还可以被N、O和/或S代替，Ar为具有0、1、2、3或4个N、O和/或S原子的单核或双核芳环体系，其为未取代的或被A和/或R9单、二或三取代，Hal为F、Cl、Br或I，m、n彼此独立地为0、1、2、3或4。
22.权利要求21的方法，其中的αvβ3和/或αvβ5抑制剂选自子结构式IIIa-IIIn的化合物，它们在其它方面与式III相同，但是，其中在IIIa)中R3为H；在IIIb)中R3为H，且R2为COOR10或SO2R10；在IIIc)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，且R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基；在IIId)中m为0；在IIIe)中m为0，且R3为H；在IIIf)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，且m为0；在IIIg)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，且m为0；在IIIh)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，A为H或未取代的1-15个碳原子的烷基或3-15个碳原子的环烷基，Ar为苯基或萘基，且m为0；在IIIi)中，R6为具有1-4个氮原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O；在IIIj)中R3为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，m为0；R6为具有1-4个氮原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O；在IIIk)中Z不存在；在IIIl)中Z不存在，且R3为H；在IIIm)中Z不存在，R3为H，且R2为COOR10或SO2R10；在IIIn)中Z不存在，R3为H，R4为H，R2为COOR10或SO2R10，R10为H、A、Ar或7-14个碳原子的亚芳烷基，R6为具有1-4个氮原子的单核或双核杂环，其可以是未取代的或被下述取代基单、二或三取代Hal、A、-CO-A、OH、CN、COOH、COOA、CONH2、NO2、＝NH或＝O，A为H或未取代的1-6个碳原子的烷基，Ar为苯基或萘基，且m为0。
23.权利要求21的方法，其中所述的αvβ3和/或αvβ5抑制剂选自如下化合物(2S)-3-[2-(3-氨基丙基)-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基]-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-[2-(3-胍基丙基)-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基]-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代苯并二氢吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-苯并咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸；(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-丁基磺酰氨基丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，4，6-三甲基苯基)磺酰氨基丙酸；及其生理上可接受的盐和溶剂化物。
24.权利要求21的方法，其中所述的αvβ3和/或αvβ5抑制剂选自如下化合物(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-丁基磺酰氨基丙酸；(2S)-3-{2-[3-(吡啶-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，4，6-三甲基苯基)磺酰氨基丙酸；和(2S)-3-{2-[3-(1H-咪唑-2-基氨基)丙基]-4-氧代-4H-苯并吡喃-6-基}-2-(2，2-二甲基丙氧基碳酰氨基)-丙酸。
25.权利要求21的方法，其中所述的量大约为0.5μg-5mg。
26.权利要求21的方法，其中所述眼病为糖尿病性视网膜病。
27.权利要求21的方法，其中所述眼病为黄斑变性。
28.权利要求21的方法，其中所述眼病为近视。
29.权利要求21的方法，其中所述眼病为眼组织胞浆菌病。
30.权利要求1的方法，其中所述的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为式IV化合物及其生理上可接受的盐和溶剂化物 其中A和B彼此独立地为O、S、NH、NR7、CO、CONH、NHCO或直连键，X为未取代的或被R4或R5单取代的具有1-2个碳原子的亚烷基或是直连键，R1为H、Z或-(CH2)o-Ar，R2为H、R7或-C(O)Z，R3为NHR6、-NR6-C(＝NR6)-NHR6、-C(＝NR6)-NHR6、-NR6-C(＝NR9)-NHR6、-C(＝NR9)-NHR6或Het1，R4或R5彼此独立地为H、氧代、R7、-(CH2)o-Ar、-C(O)-(CH2)o-Ar、-C(O)-(CH2)o-R7、-C(O)-(CH2)o-Het、Het、NHR6、NHAr、NH-Het、OR7、OAr、OR6或O-Het，R6为H、-C(O)R7、-C(O)-Ar、R7、COOR7、COO-(CH2)o-Ar、SO2-Ar、SO2R7或SO2-Het，R7为1-10个碳原子的烷基或1-10个碳原子的环烷基，R8为Hal、NO2、CN、Z、-(CH2)o-Ar、COOR1、OR1、CF3、OCF3、SO2R1、NHR1、N(R1)2、NH-C(O)R1、NHCOOR1或C(O)R1，R9为CN或NO2，Z为1-6个碳原子的烷基，Ar为芳基，其为未取代的或被R8取代的，Hal为F、Cl、Br或I，Het为具有5-10个原子的饱和的、部分或完全饱和的单或二环杂环体系，其可包含1或2个氮原子和/或1或2个硫或氧原子，并且其中的杂环体系可被R8单或二取代，Het1为具有1-4个氮原子的单或二环芳族杂环体系，其可以是未取代的或被下述基团单或二取代Hal、R7、OR7、CN、NHZ或NO2，n为0、1或2，m为0、1、2、3、4、5或6，o为0、1或2。
31.权利要求30的方法，其中所述的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为选自子结构式IVa至IVi的化合物，它们在其它方面与式IV相同，但其中在IVa中，X为直连键 在IVb中，X为直连键，R2为H，R5为H，且R4为Ar 在IVc中，X为直连键，R5为H，且R4为Ar或Het；在IVd中，X为直连键，R5为H，B为O，A为NH，n为0，m为3或4，R3为Het，且R4为Ar 在IVe中，X为直连键，R5为H，B为O，A为NH，n为0，m为3或4，且R3为Het 在IVf中，X为未取代的或被Ar取代的亚甲基，R2为H，R5为H或Ar，且R4为氧代 在IVg中，X为亚甲基， 在IVh中，X为亚甲基，R4为H或Ar，R5为H或Ar，且R2为H；在IVi中，X为亚甲基，R4为H或Ar，R5为H或Ar，B为O，A为NH，n为0，m为3或4，R3为Het，且R2为H
32.权利要求30的方法，其中所述的αvβ3和/或αvβ5抑制剂选自化合物3-苯基-3-{6-[3-(吡啶-2-基氨基)-丙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-{6-[4-(吡啶-2-基氨基)-丁氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-{5-[4-(吡啶-2-基氨基)-丁氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-{5-[3-(吡啶-2-基氨基)-丙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸；3-苯基-3-[6-(吡啶-2-基-酰氨基羧基甲氧基)-吲哚-3-基]-丙酸；3-苯基-3-[6-(苯并咪唑-2-基-酰氨基羧基甲氧基)-吲哚-3-基]-丙酸；3-苯基-3-[6-(咪唑-2-基-酰氨基羧基甲氧基)-吲哚-3-基]-丙酸；或3-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-3-{6-[2-(6-甲基氨基-吡啶-2-基)乙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸及其生理上可接受的盐和溶剂化物。
33.权利要求30的方法，其中所述的αvβ3和/或αvβ5抑制剂为3-苯基-3-{6-[3-(吡啶-2-基氨基)-丙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸或3-苯并[1，2，5]噻二唑-5-基-3-{6-[2-(6-甲基氨基-吡啶-2-基)乙氧基]-1H-吲哚-3-基}-丙酸。
34.权利要求30的方法，其中所述的量大约为0.5μg-5mg。
35.权利要求30的方法，其中所述眼病为糖尿病性视网膜病。
36.权利要求30的方法，其中所述眼病为黄斑变性。
37.权利要求30的方法，其中所述眼病为近视。
38.权利要求30的方法，其中所述眼病为眼组织胞浆菌病。
39.一种预防和/或治疗患者由眼内血管生成引起的眼病的方法，该方法包括将包含含有足以抑制眼血管生成的治疗有效量的αvβ3和/或αvβ5抑制剂的纳米微粒的组合物注射到所述患者的眼玻璃体内。
40.权利要求39的方法，其特征在于纳米微粒包含生物相容性聚合物。
41.权利要求39的方法，其特征在于纳米微粒包含可生物降解的聚合物。
42.权利要求41的方法，其特征在于所述聚合物为聚(乳酸)(PLA)、聚(乙醇酸)(PGA)、聚己内酯(PCL)、乳酸与乙醇酸的共聚物(PLGA)、乳酸与己内酯的共聚物、聚-ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚(原酸)酯、聚尿烷、聚酐、聚缩醛、聚二氢吡喃或聚氰基丙烯酸酯。
43.权利要求39的方法，其特征在于所述组合物包含液体介质，其中纳米微粒分散在其中形成胶体悬浮液。
44.权利要求39的方法，其特征在于纳米微粒具有大约为10nm至约500nm的直径。
45.权利要求39的方法，其特征在于纳米微粒具有大约为100nm至约200nm的直径。
46.权利要求39的方法，其特征在于纳米微粒通过溶剂置换方法制备。
全文摘要
利用整联蛋白受体α
文档编号A61K45/00GK1536998SQ02815103
公开日2004年10月13日 申请日期2002年7月3日 优先权日2001年8月1日
发明者H·M·本德尔, J·豪恩席尔德, U·朗, M·韦森尔, M·佛里德兰德尔, H M 本德尔, 锏吕嫉露, 飨 申请人:默克专利有限公司