专利名称：：石斛碱的新应用的制作方法
技术领域：
：
背景技术：
：据已有的文献资料检索显示，石斛碱的药理作用有以下几个方面1、能抑制离体兔肠活动，而对离体豚鼠子宫有收縮作用；2、大剂量石斛碱可降低兔、豚鼠的心肌收縮力，降低血压并抑制呼吸；3、有微弱的止痛退热作用(ChengKe-hui,etal.JPharmacolExperTherap,1936,55(3):310;HenryML,etal.JPharmacolExperTherap,1936,56(4):466)。对该成分的其它药理作用研究未见有任何报道。金钗石斛(DendrobiumnobileLindl.)是自然界中石斛碱的主要来源。本发明人曾研究发现金钗石斛药材提取物具有预防或治疗关节炎疾病，及保护消化道粘膜损伤的功效(公开号为CN1533801的专利申请)。但由于上述金钗石斛提取物中的成分复杂，其中含有多种生物碱及其它化学成分，故并不明确其药效作用的物质基础，即未明确药理作用的有效成分。對月赠本发明人为进一步筛选金钗石斛提取物中的有效部位，经过大量研究工作和药理试验发现，式I化合物石斛碱也具有预防或治疗关节炎疾病，以及保护消化道粘膜损伤的作用，且较上述专利文献中公开的金钗石斛提取物的有关疗效更佳。因此，本发明的目的是提供式I化合物石斛碱在上述两方面的新应用。本发明试验表明，式I化合物石斛碱具有抑制大鼠角叉菜胶所致急性炎症及大鼠佐剂性关节炎的作用，并呈现一定的量效关系。因此，石斛碱可用于预防或治疗关节炎疾病。同时实验也表明，式I化合物石斛碱同时具有抑制大鼠无水乙醇所致的急性消化道溃疡和醋酸所致慢性胃溃疡的作用。因此，石斛碱可用于保护消化道粘膜急性或慢性损伤，特别是用于防治急性和慢性消化道溃疡。综上所述，石斛碱2-40mg/kg即可产生上述两方面的防治作用，在类似试验条件下，较金钗石斛提取物需4-5g生药/kg的有效剂量明显降低。另外，目前治疗关节炎常用的非甾体类抗炎药物，如布洛芬、二氯芬酸钠等均能引起消化道损伤，故通常需与雷尼替丁等胃粘膜保护剂一起服用；石斛碱同时具有抗炎和保护胃粘膜损伤的作用，具有可竞争优势。具体实施例方式下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。实施例l式I化合物石斛碱的提取分离根据上述文献(T.Okamoto,etal.Thestructureofdendrobine.Chem.Pharm.Bull.,1964，12(4):506-512;YInubushi，etal.IsolationandCharacterizationofAlkaloidsoftheChineseDrug"Chin-Shih-Hu".Chem.Pharm.Bull.,1964，12(10):1175-1180)中的方法进行提取分离，具体步骤如下将市售的1.0kg金钗石斛药材切碎用甲醇8L浸渍两天，过滤，残渣以甲醇回流提取4次(每次5L)，合并提取液，减压浓縮得稠浸膏，浸膏以5%盐酸水溶液溶解提取多次，过滤，合并酸性水提液，在冰浴中加氨水调pH至11.0左右，该碱性水溶液，以乙醚萃取多次，合并乙醚层溶液，过滤，回收溶剂至干，得石斛碱粗提物，上氧化铝柱层析，以苯洗脱，分步收集洗脱液，合并部分洗脱液，回收溶液至干，得一纯品化合物，测定熔点为134-136°C，并对该化合物的MS、H-NMR、C-NMR等光谱进行解析，确证其结构与文献公布的石斛碱(即式I化合物)结构完全一致。效果实施例1不同剂量石斛碱对足跖角叉菜胶所致急性炎症的抑制作用实验方法大鼠随机分组，每组10只动物，于致炎前l小时灌胃给药，无菌操作，给大鼠右后足跖腱膜下注射1%角叉菜胶O.lml致炎，用排水法测定致炎前及致炎后不同时间的右后足跖容积，以致炎前后的足容积差值为肿胀值，根据肿胀值计算肿胀率及抑制率。实验结果见下表l，与对照组比，氺为p〈0.05，衬为p〈0.01。肿胀率。/fEn-E。/ENX100E^致炎后不同时间的肿胀值E^致炎前的肿胀值抑制率c/。OT/CX100C:对照组的肿胀率T^治疗组的肿胀率表1不同剂量石斛碱对大鼠角叉菜胶所致急性炎症的抑制作用组别<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>以上实验结果显示石斛碱确有抑制大鼠角叉菜胶所致急性炎症的作用，并随着剂量的增加而逐渐增强。效果实施例2不同剂量石斛碱对大鼠佐剂性关节炎的预防和治疗作用实验方法体重180-200g雄性SD大鼠，每鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂O.lml致炎，次日开始灌胃给药，每天1次，连续20天，用排水法测定致炎前及致炎后不同天数的足跖肿胀体积，并计算肿胀率及抑制率，并以检验法用药组与模型对照组比较。实验结果见下表2，与对照组比，*为p〈0.05,^为p〈0.01。实验结果显示石斛碱2mg/kg的给药剂量时即对大鼠佐剂性关节炎产生一定的抑制作用，并随着剂量的增加，抑制作用加强。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>效果实施例3不同剂量石斛碱对大鼠无水乙醇所致的急性胃粘膜损伤的影响实验方法SD大鼠随机分组，禁食48小时，自由饮水。实验时灌服无水乙醇lml/只，在灌服无水乙醇前一小时灌胃给药，服无水乙醇后3小时处死动物，解剖取胃，以1%甲醛溶液固定，损伤程度以溃疡指数表示，条索状损伤的长度大于lmm者测量其长度，每mm记1分，若其长度宽度大于lmm者将其记分加倍，记分总数为该动物的溃疡指数，各项间进行比较。实验结果见下表3，与对照组比，f为p〈0.05，**为？<0.01。表3不同剂量石斛碱对大鼠无水乙醇所致急性胃粘膜损伤的抑制作用组别齐糧mg/kgn溃疡指数(；士SD)抑制率(％)21064.8±5.2*38.581058.6±7.9**44.46石斛碱10108.7±2.2**91.7820102.0±0.8**98.0940101.7±0.8**98.36雷尼替丁50mg/kg101.4±0.6**98.64对照组10105.5±12.6以上实验结果显示石斛碱具有抑制大鼠无水乙醇所致的急性消化道溃疡的作用，其40mg/kg的给药剂量时与雷尼替丁(50mg/kg)的几乎等同。效果实施例4不同剂量石斛碱对大鼠醋酸烧灼型慢性胃溃疡的影响实验方法SD大鼠空腹24小时，自由饮水，在3%戊巴比妥钠麻醉下打开腹腔，在胃浆膜下注入30n/。冰醋酸0.1ml，随即缝合，次日起灌胃给药，每天1次，连续10天。解剖取胃，用甲醛固定，测量溃疡面积，进行各组间比较。实验结果见下表4，与对照组比，輯为p〈0.01。表4不同剂量石斛碱对大鼠醋酸烧灼型慢性胃溃疡的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>以上实验结果显示石斛碱具有抑制大鼠慢性胃溃疡的作用。权利要求1、式I化合物石斛碱在制备保护消化道粘膜损伤的药物中的应用。2、如权利要求1所述的应用，其特征在于该药物为防治急性或慢性消化道溃疡的药物。全文摘要本发明公开了石斛碱的两个新用途，即在制备预防或治疗关节炎疾病，以及保护消化道粘膜损伤的药物中的应用。文档编号A61P1/04GK101543492SQ200910140559公开日2009年9月30日申请日期2006年7月14日优先权日2006年7月14日发明者刘全海,刘珉宇,华茉莉,卢艳萍,庄贤韩,戴静芝,李定祥,李晶晶,沈龙海,王小晨申请人:上海医药工业研究院;上海先导药业有限公司