专利名称：一种氟苯尼考脂质体的制备方法
技术领域：
本发明属于兽药技术领域，具体涉及ー种氟苯尼考脂质体的制备方法。
背景技术：
氟苯尼考是ー种兽药专用氯霉素类的广谱抗菌药，主要特点是抗菌谱广，吸收良好，体内分布广泛，特别是无潜在致再生障碍性贫血作用。氟苯尼考的药理作用是通过脂溶性可弥散进入细菌细胞内，主要作用于细菌70s核糖体的50s亚基，抑制转肽酶，使肽酶的增长受阻，抑制了肽链的形成，从而阻止蛋白质的合成，达到抗菌目的。本品抗菌谱广，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌及支原体均有强效。 氟苯尼考主要用于防治猪的气喘病、传染性胸膜性肺炎、萎縮性鼻炎、猪肺疫等，对大肠杆菌等引起的仔猪黄白痢、肠炎、血痢、水肿病等有显著疗效；防治禽类由大肠杆菌、沙门氏杆菌、巴氏杆菌等引起的霍乱、雏鸡白痢、顽固性腹泻或细菌、支原体等引起的慢性呼吸道疾病、传染性鼻炎、呼吸困难等。氟苯尼考半衰期较短，在集体内代谢较快，难溶于水，利用率低，而脂质体是ー种靶向药物载体，可以将氟苯尼考药物包封在直径为亚微米或纳米的脂质体内，从而延长药物的有效作用时间，提高生物利用度，増加其性质的稳定性，减少临床用药次数，提高治愈率，增创经济效益。

发明内容
本发明的目的是提供一种氟苯尼考脂质体的制备方法，从而增加其水溶性，延长药物的有效作用时间，提高生物利用度，増加其稳定性和靶向性。为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是一种氟苯尼考脂质体的制备方法，包括以下步骤I)配制pH为3. 5 6. 0的柠檬酸缓冲液；2)取精制氟苯尼考原粉于甲醇中搅拌溶解，制成浓度为3mg/ml的氟苯尼考药液；3)取0. 7重量份的磷脂和0. 2重量份的胆固醇，加入无水こ醇，70 75°C水浴搅拌溶解并挥散こ醇，成膜后加入同温的柠檬酸缓冲液30份，70 75°C水浴搅拌水化5 IOmin,随后室温搅拌30min，充分水化后补加蒸馏水至30份，经微孔滤膜过滤两遍进行整粒，得空白脂质体；4)主动载药依次取空白脂质体、氟苯尼考药液、NaHCO3溶液，混合振荡摇匀，70 75°C水浴中保温15min，后立即用冷水降温，制得氟苯尼考脂质体粗品；5)将步骤4)所得粗品进行低温高速离心处理，制得氟苯尼考脂质体。步骤3)中微孔滤膜的孔径为0. 8 ii m。步骤4)中NaHCO3溶液的浓度为60mg/ml。步骤4)中所取空白脂质体、氟苯尼考药液、NaHCO3溶液的体积比为2:1:1。步骤5)中低温高速离心的温度为4°C，转速为15000rpm，离心时间15min。
氟苯尼考脂质体经过无菌处理，分装，4°C保存。将氟苯尼考脂质体浓缩，真空冻干，制得氟苯尼考脂质体冻干制剂，冻干制剂常温保存，不仅保存时间长，而且方便运输。脂质体是一种定向药物载体，属于靶向性给药系统的ー种新剂型，它可将药物粉末或溶液包埋在直径为纳米级具有类细胞结构的微粒中，这种微粒进入动物体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肺、脾、肝和骨髄等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。 本发明的制备方法通过制备柠檬酸缓冲液、氟苯尼考药液和空白脂质体，主动载药，离心精制，得到包封率高、临床效果良好的氟苯尼考脂质体，该方法简单易行，制备的氟苯尼考脂质体，増加了该药物的水溶性，提高生物利用度，延长药物半衰期，増加了该药物的稳定性和靶向性。
具体实施例方式以下结合具体实施方式
对本发明做详细说明实施例I本实施例氟苯尼考脂质体的制备方法，包括以下步骤I)配制pH为3. 5的柠檬酸缓冲液；2)取精制氟苯尼考原粉于甲醇中搅拌溶解，制成浓度为3mg/ml的氟苯尼考药液；3)取0. 7g的磷脂和0. 2g的胆固醇，加入无水こ醇2ml，70°C水浴搅拌溶解并挥散こ醇，成膜后加入同温的柠檬酸缓冲液30ml，70°C水浴搅拌水化lOmin，随后室温搅拌30min,充分水化后补加蒸馏水至30ml，经孔径为0. 8 y m的微孔滤膜过滤两遍进行整粒，得空白脂质体；4)主动载药按2:1:1的体积比依次取空白脂质体、氟苯尼考药液、浓度为60mg/ml的NaHCO3溶液，混合振荡摇匀，70°C水浴中保温15min，后立即用冷水降温，制得氟苯尼考脂质体粗品；5)将步骤4)所得粗品在4°C, 15000rpm条件下进行低温高速离心处理15min,制得氟苯尼考脂质体。实施例2本实施例氟苯尼考脂质体的制备方法，包括以下步骤I)配制pH为5. O的柠檬酸缓冲液；2)取精制氟苯尼考原粉于甲醇中搅拌溶解，制成浓度为3mg/ml的氟苯尼考药液；3)取0. 7g的磷脂和0. 2g的胆固醇，加入无水こ醇2ml，72°C水浴搅拌溶解并挥散こ醇，成膜后加入同温的柠檬酸缓冲液30ml，72°C水浴搅拌水化8min，随后室温搅拌30min,充分水化后补加蒸馏水至30ml，经孔径为0. 8 y m的微孔滤膜过滤两遍进行整粒，得空白脂质体；4)主动载药按2:1:1的体积比依次取空白脂质体、氟苯尼考药液、浓度为60mg/ml的NaHCO3溶液，混合振荡摇匀，72°C水浴中保温15min，后立即用冷水降温，制得氟苯尼考脂质体粗品；5)将步骤4)所得粗品在4°C, 15000rpm条件下进行低温高速离心处理15min,制得氟苯尼考脂质体。实施例3本实施例氟苯尼考脂质体的制备方法，包括以下步骤I)配制pH为6. 0的柠檬酸缓冲液；2)取精制氟苯尼考原粉于甲醇中搅拌溶解，制成浓度为3mg/ml的氟苯尼考药液；3)取0. 7g的磷脂和0. 2g的胆固醇，加入无水こ醇2ml，75°C水浴搅拌溶解并挥散こ醇，成膜后加入同温的柠檬酸缓冲液30ml，75°C水浴搅拌水化5min，随后室温搅拌30min,充分水化后补加蒸馏水至30ml，经孔径为0. 8 y m的微孔滤膜过滤两遍进行整粒，得空白脂质体；4)主动载药按2:1:1的体积比依次取空白脂质体、氟苯尼考药液、浓度为60mg/ml的NaHCO3溶液，混合振荡摇匀，75°C水浴中保温15min，后立即用冷水降温，制得氟苯尼考脂质体粗品；5)将步骤4)所得粗品在4°C, 15000rpm条件下进行低温高速离心处理15min,制得氟苯尼考脂质体。包封率检测将氟苯尼考脂质体溶液取Iml于离心管中，经过4°C低温15000rpm离心50min处理之后，取0. 5ml上清液,进行高效液相測定，作为游离的氟苯尼考Cis ;另0. 5ml沉淀作为总的氟苯尼考C,6，然后包封率=(C,6-C#)/C,6X100%。包封率测定结果如下表I:表I包封率统计表
权利要求
1.一种氟苯尼考脂质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤 O配制pH为3. 5 6. O的柠檬酸缓冲液； 2)取精制氟苯尼考原粉于甲醇中搅拌溶解，制成浓度为3mg/ml的氟苯尼考药液； 3)取O.7重量份的磷脂和O. 2重量份的胆固醇，加入无水こ醇，70 75°C水浴搅拌溶解并挥散こ醇，成膜后加入同温的柠檬酸缓冲液30份，70 75°C水浴搅拌水化5 lOmin，随后室温搅拌30min，充分水化后补加蒸馏水至30份，经微孔滤膜过滤两遍进行整粒，得空白脂质体； 4)主动载药依次取空白脂质体、氟苯尼考药液、NaHCO3溶液，混合振荡摇匀，70 75°C水浴中保温15min，后立即用冷水降温，制得氟苯尼考脂质体粗品； 5)将步骤4)所得粗品进行低温高速离心处理，制得氟苯尼考脂质体。
2.根据权利要求I所述的氟苯尼考脂质体的制备方法，其特征在于步骤3)中微孔滤膜的孔径为0.8μπι。
3.根据权利要求I所述的氟苯尼考脂质体的制备方法，其特征在于步骤4)中NaHCO3溶液的浓度为60mg/ml。
4.根据权利要求I所述的氟苯尼考脂质体的制备方法，其特征在于步骤4)中所取空白脂质体、氟苯尼考药液、NaHCO3溶液的体积比为2:1:1。
5.根据权利要求I所述的氟苯尼考脂质体的制备方法，其特征在于步骤5)中低温高速离心的温度为4°C,转速为15000rpm,离心时间15min。
全文摘要
本发明公开了一种氟苯尼考脂质体的制备方法，包括以下步骤1)配制pH为3.5～6.0的柠檬酸缓冲液；2)配制浓度为3mg/ml的氟苯尼考药液；3)取磷脂和胆固醇加入无水乙醇中，水浴搅拌溶解并挥散乙醇，成膜后加入柠檬酸缓冲液，水浴搅拌充分水化后经微孔滤膜过滤整粒，得空白脂质体；4)依次取空白脂质体、氟苯尼考药液、NaHCO3溶液，混合振荡摇匀，水浴保温后用冷水降温，制得脂质体粗品；5)将步骤4)所得粗品进行低温高速离心处理，制得氟苯尼考脂质体。本发明的制备方法简单易行，制备的氟苯尼考脂质体增加了该药物在水中的溶解度，延长了有效作用时间，提高了药物稳定性和靶向性。
文档编号A61P31/04GK102846550SQ20121032529
公开日2013年1月2日 申请日期2012年9月5日 优先权日2012年9月5日
发明者吴红云, 郭俊清, 董晓盈, 李建正 申请人:郑州后羿制药有限公司