专利名称：：作为mcp－1抑制剂的双环吡咯类衍生物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及含有通过拮抗CCR2受体(也称作MCP-1受体)特别抑制单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的抗炎和免疫调节化合物的药物组合物。这些化合物含有双环芳香部分。本发明还涉及所述组合物中采用的新化合物、它们的制备方法、在制备中适用的中间体及其作为治疗剂的用途。MCP-1是介导白细胞趋化和激活的促炎蛋白类趋化因子中的一员。MCP-1为C-C趋化因子，已知这种趋化因子是一种最有效和选择性的T-细胞和单核细胞的趋化物和激活剂。MCP-1涉及许多炎性疾病，包括类风湿性关节炎、肾小球性肾炎、肺纤维变性、再狭窄(国际专利申请WO94／09128)、牙槽炎(Jones等人，1992，《免疫学杂志》(J．Immunol．)149，2147)和哮喘的病理生理学。认为MCP-1在其病理学中起一定作用的其它疾病领域是动脉粥样硬化(例如Koch等人，1992，《临床诊疗杂志》(J．Clin．Invest．)90，772-779)、牛皮癣(Deleuran等人，1996，《皮肤病学杂志》(J．DermatologicalScience)13，228-236)、迟发型皮肤过敏性反应、炎性肠病(Grimm等人，1996，《白细胞生物学杂志》(J．LeukocyteBiol．)59，804-812)、多发性硬化和脑部创伤(Berman等人，1996，《免疫学杂志》(J．Immunol)156，3017-3023)。MCP-1抑制剂也可用来治疗休克、再灌注损伤、局部缺血、心肌梗塞和移植排斥。MCP-1是通过CCR2受体起作用。MCP-2和MCP-3也可以通过，至少部分通过这种受体发挥作用。所以在本说明书中，当涉及“MCP-1的抑制或拮抗”或“MCP-1介导的作用”时，包括当MCP-2和／或MCP-3经CCR2受体起作用时MCP-2的抑制或拮抗和／或MCP-3所介导的影响。WO-9631492描述了一系列包括双环类化合物在内的化合物为内皮素受体的抑制剂。JP-63284177公开了某些适合多种用途的甲酰基取代的吡咯并吡咯类化合物的制备。此外，US专利号4751231描述了作为青光眼治疗剂的取代噻吩并磺酰胺的制备。本申请人发现了一类含有双环基部分的对MCP-1具有有效抑制活性的化合物。本发明提供一种含有与药学上可接受的载体或稀释剂联合使用的式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐或酰胺的酯的药物组合物，所述化合物是单核细胞趋化蛋白-1的抑制剂并且其中A和B与它们所连接的碳原子共同构成其中含有至少一个杂原子的任选取代的5元芳香环；X是CH2或SO2；R1是任选取代芳基或杂芳基环；R2是羧基、氰基、-C(O)CH2OH、-CONHR4、-SO2NHR5、四唑-5-基、SO3H或式(Ⅵ)的基团其中R4选自氢、烷基、芳基、氰基、羟基、-SO2R9，其中R9是烷基、芳基、杂芳基或卤烷基，或R4是基团-(CHR10)r-COOH，其中r是1-3的整数和各个R10分别选自氢或烷基；R5是烷基、任选取代芳基，例如任选取代苯基或任选取代杂芳基如5或6元杂芳基，或基团COR6，其中R6是氢、烷基、芳基、杂芳基或卤烷基；R7和R8分别选自氢或烷基，特别是C1-4烷基；和R3是氢、官能团、任选取代烷基、任选取代链烯基、任选取代炔基、任选取代芳基、任选取代杂环基、任选取代烷氧基、任选取代芳烷基、任选取代芳烷基氧基、任选取代环烷基。所述组合物适当地含有式(Ⅰ)的化合物或其盐或其体内可水解酯。式(Ⅰ)的化合物是单核细胞趋化蛋白-1的抑制剂。此外，它们可以抑制RANTES诱导的趋化。RANTES(活化后可调节的、正常T细胞表达并可能分泌的(因子))是属于和MCP-1同类的另一种细胞因子，它们具有相似的生物学分布型，但RANTES是通过CCR1受体起作用。因此，所述化合物可以有效治疗上述物质介导的疾病，特别是炎性疾病。所述化合物的实例是其中A、B、X、R1和R3定义如上的化合物，并且其中R2定义如上但R4选自氰基、羟基、-SO2R9，其中R9是烷基、芳基、杂芳基或卤烷基，或R4是基团-(CHR10)r-COOH，其中r是1-3的整数和各R10分别选自氢或烷基；R5是任选取代苯基或任选取代杂芳基，或基团COR6，其中R6是烷基、芳基、杂芳基或卤烷基；R7和R8分别选自氢或烷基，特别是C1-4烷基。在本文中，术语“杂原子”是指非碳原子，如氧、氮或硫原子。单独使用或作为后缀使用的术语“烷基”包括直链和支链结构。这些基团含有至多10个碳原子，优选至多6个碳原子和更优选至多4个碳原子。同样地，术语“链烯基”和“炔基”是指含有例如2-10个碳原子，优选2-6个碳原子的不饱和直链或支链结构。环状部分如环烷基、环烯基和环炔基性质上相似但至少有3个碳原子。术语例如“烷氧基”和“烷酰基”包括定义如上的连接在适当官能度上的烷基部分。术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。所述芳基包括芳香碳环基团，如苯基和萘基。术语“杂环基”包括芳香或非芳香环，例如含有4至20，适宜含有5至10个环原子的芳香或非芳香环，环原子中至少一个是杂原子如氧、硫或氮。该基团的实例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、三唑基、噻唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基。“杂芳基”是指那些定义如上的具有芳香特征的基团。术语“芳烷基”是指芳基取代的烷基，例如苄基。在说明书中使用的其它表达式包括“烃基”，它是指任何含有碳和氢原子的结构。例如，它们可以是烷基、链烯基、炔基、芳基、杂环基、烷氧基、芳烷基、环烷基、环烯基或环炔基。术语“官能团”是指反应性取代基。它们可以含有供电子体或吸电子体。此类基团的实例包括卤素、氰基、硝基、C(O)nR11、OR11、S(O)mR11、NR12R12，、OC(O)nR12R12，、-CH=NOR11、-NR12C(O)nR11、-NR11CONR12R12，、-N=CR12R12，、S(O)mNR12R12，或NR12S(O)mR11，其中R11、R12和R12，分别选自氢或任选取代烃基，或R12和R12，一起形成任选取代环，该环任选地含有其它杂原子如S(O)m、氧和氮，n是整数1或2，m是0或1-3的整数。其中官能团包括S(O)mNR12R12，或NR12S(O)mR11，m通常是1-3的整数。为了免除怀疑，其中R12和R12，一起形成任选取代环，该环应含有定义如上的非芳香杂环基。适合于烃基R11、R12和R12，的任选取代基包括卤素、全卤代烷基如三氟甲基、巯基、羟基、烷氧基、氧代、杂芳氧基、链烯基氧基、炔氧基、烷氧基烷氧基、芳氧基(其中芳基可以被卤素、硝基或羟基取代)、氰基、硝基、氨基、一-或二-烷基氨基、烷基酰氨基、肟基(例如羟亚氨基或烷氧基亚氨基)或S(O)mRy，其中m定义如上和Ry是烷基。适于基团A-B的任选取代基的实例包括定义如上的官能团或任选取代的烃基或任选取代的杂环基。A-B基团的具体取代基是次级式(Ⅳ)的基团A和B适当地与其所连接的碳原子形成任一次级式所示的5元杂芳基环其中R13、R14和R15分别选自氢或取代基。适用的取代基R13、R14和R15包括定义如上的官能团或任选取代烃基。适于R13、R14和R15的烃基包括烷基、环烷基、链烯基、环烯基、炔基、环炔基。A-B环的具体取代基包括三氟甲基；任选取代C1-4烷基，如芳烷基、羧烷基或其酰胺衍生物；卤素；羟基；C1-4烷氧基；C1-4烷酰基；C1-4烷酰氧基；氨基；氰基；C1-4烷基氨基；二(C1-4烷基)氨基；C1-4烷酰基氨基；硝基；氨基甲酰基；C1-4烷氧基羰基；巯基；C1-4烷基硫基；C1-4烷基亚磺酰基；C1-4烷基磺酰基；磺酰氨基，或烷基或芳基磺酰氨基；氨基甲酰基C1-4烷基；N-(C1-4烷基)氨基甲酰基C1-4烷基；N-(C1-4烷基)氨基甲酰基-C1-4烷基；羟基C1-4烷基；C1-4烷氧基C1-4烷基；一-或二-烷基或芳基取代脲；吗啉代；硫吗啉代；氧硫吗啉代；吡咯烷基；羧基C1-4烷基氨基；R16，-NHR17和OR17(其中R16和R17分别选自任选取代的苯基和任选取代的5或6元杂芳基环)。适用于R16和R17的任选取代基包括上述那些为R11、R12和R13所列的取代基。适用于R16和R17的任选取代基还包括那些为R1所列的取代基。烷基或芳基磺酰氨基取代基自身也可以被任选取代，例如被R11、R12或R12，或R1所列的取代基取代。式(Ⅰ)化合物的实例是那些其中环A-B带有至少一个取代基的化合物。适宜地，当A-B形成上述次级式(ⅲ)的基团时，R15是氢，R14不是甲酰基，和／或R13不是氢、烷基或芳烷基。适宜地，当A-B形成上述次级式(ⅴ)的基团时，R13不是脒基。取代基适宜排列或接近于称作环“A”的一侧而优于“B”位置。因此，在上述次级式(ⅰ)至(ⅹⅷ)的化合物中，其中存在的R13和／或R14适宜不是氢，首选R13不是氢。最接近“B”的位置优选是氢。所以，在上述次级式(ⅰ)至(ⅹⅷ)中，R15首选是氢。优选的A-B环的取代基以及，R13、R14和R15的优选实例包括C1-4烷基，特别是甲基，该烷基可被羟基、氨基或一-或二-C1-4烷基氨基(如甲基氨基或二甲基氨基)；氰基；卤素，特别是溴；噻吩基；四唑基；由氨基任选取代的苯基；C1-4烷氧基，特别是甲氧基；羧基或羧酰氨基任选取代。其中存在的A-B环的优选取代基以及，R13、R14和R15的优选实例是C1-4烷基，特别是甲基。式(Ⅰ)中适于R1的任选取代基包括上述为R11、R12和R12，以及为烷基、链烯基或炔基所列的那些取代基。适合于烷基、链烯基、炔基、基团R3的任选取代基包括上述为R11、R12和R12，和对于芳基、芳烷基、环烷基或杂环基R3所列的那些；取代基也可以是在此为R1所列的取代基。适用的X为CH2。适用的R1是任选取代的苯基、萘基、呋喃基、吡啶基或噻吩基环，并且优选取代苯基或吡啶基环。优选R1被至少一个取代基取代，特别是当R1是苯基时。R1的具体取代基包括三氟甲基、C1-4烷基、卤素、三氟甲氧基、C1-4烷氧基、C1-4烷酰基、C1-4烷酰基氧基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4烷酰基氨基、硝基、羧基、氨基甲酰基、C1-4烷氧基羰基、巯基、C1-4烷基硫基、C1-4烷基亚磺酰基、C1-4烷基磺酰基、磺酰氨基、氨基甲酰基C1-4烷基、N-(C1-4烷基)氨基甲酰基C1-4烷基、N-(C1-4烷基)2氨基甲酰基-C1-4烷基、羟基C1-4烷基或C1-4烷氧基C1-4烷基。其它或另外地，两个上述取代基可以一起构成连接在R1环相邻碳原子上的式-O(CH2)1-4O-所示的二价基团。优选的R1的取代基是一个或多个非极性取代基如卤素。特别是，R1被一个或多个卤素基团，尤其是氯取代。R1的具体例子是3，4-二氯苯基、3，4-二氟苯基、3-氟-4-氯苯基、3-氯-4-氟苯基或2，3-二氯吡啶-5-基。优选R1是3，4-二氯苯基。基团R2的实例包括羧基、四唑-5-基、氰基、SO3H、-SO2NHR5、-CONHR4，或式(Ⅵ)的基团其中R5定义如上，R7和R8分别选自氢或烷基，特别是C1-4烷基，R4是氰基、OH、-SO2-C1-4烷基(其中该烷基是由卤素如氟任选取代，尤其是在α位)、-SO2CF3、-SO2-苯基、-(CHR10)r-COOH，其中r是1-3和各R10分别选自氢或烷基，例如C1-4烷基。优选的R2是羧基或其药学上可接受的盐或酯，例如C1-4烷基酯，和特别是羧基或其药学上可接受的盐，具体是羧基。适用的基团R3包括氢、氟、氯、溴、碘、甲基、氰基、三氟甲基、羟甲基、烷氧基烷基如C1-4烷氧基甲基、甲氧基、苄氧基、羧基烷氧基如羧基甲氧基、甲基硫基、甲基亚磺酰基、甲基磺酰基或羧基C3-6环烷基、-(CHR21)r-NR23(其中r是0-2，各R21分别是氢或烷基，特别是C1-4烷基，和R23分别选自H和C1-4烷基，或和R23与它们所连接的氮一起形成任选含有另外一个杂原子的5或6元环，所述杂原子选自O、N、S、S(O)或SO2。和R23适宜一起形成杂环，例如吗啉代或哌啶基。其它的R3基团包括任选取代芳基，例如任选取代的苯基或萘基。适于苯基R3的取代基包括一个或多个选自氯、氟、甲基、三氟甲基、三氟甲氧基、氨基、甲酰基、苯基、甲氧基、苯氧基或苯基的基团。R3可以带有多个上述取代基，特别是氢或小取代基如C1-4烷基(具体如甲基)、或三氟甲基，并且优选是氢。特别适用的A-B基团是如上所示的式(ⅰ)、(ⅱ)、(ⅴ)和(ⅸ)的那些基团。另外特别适用的A-B基团是上述式(ⅹⅰ)的基团。特别优选的式(Ⅰ)化合物是式(ⅠA)或(ⅠB)的化合物或其药学上可接受的盐、酰胺的酯，其中R1定义如上，和优选是卤素取代的苯基，例如3，4-二氯苯基，R26是氢或G1-4烷基，具体为甲基，并且在式(ⅠA)中(ⅰ)R24是硫和R25是CH；或(ⅱ)R24是硫和R25是氮；或(ⅲ)R24是氧和R25是CH；或(ⅳ)R24是NCH3和R25是CH；和在式(ⅠB)中(ⅰ)R24’是CH和R25’是硫；或(ⅱ)R24’是CH和R25’是氧；或(ⅲ)R24’是氮和R25’是硫。特别优选的实例是式(ⅠA)的化合物，其中R1是卤素取代的苯基，例如3，4-二氯苯基、3，4-二氟苯基、3-氟-4-氯苯基、3-氯-4-氟苯基，R26是氢或甲基，R24是硫和R25是CH或氮。其它具体实例是式(ⅠA)的化合物，其中R1是卤素取代的苯基，例如3，4-二氯苯基、3，4-二氟苯基、3-氟-4-氯苯基、3-氯-4-氟苯基，R24是氧，R25是CH，和R26是氢或甲基。其它优选的实例是式(ⅠB)的化合物，其中R1是卤素取代的苯基，例如3，4-二氯苯基、3，4-二氟苯基、3-氟-4-氯苯基、3-氯-4-氟苯基，R25’是硫，R26是氢和R24’是CH或氮。优选式(ⅠA)或(ⅠB)的化合物为酸。适用的式(Ⅰ)化合物的药学上可接受盐包括碱盐，例如碱金属盐如钠盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐；有机胺盐如三乙胺、吗啉、N-甲基哌啶、N-乙基哌啶、普鲁卡因、二苄胺、N，N-二苄基乙基胺，或氨基酸如赖氨酸。另一方面，当所述化合物碱性足够时，适当的盐包括酸加成盐，例如甲磺酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐和与磷酸和硫酸形成的盐。根据荷电官能团的数量和阳离子或阴离子的效价，可以存在不止一个阳离子或阴离子。优选的药学上可接受的盐是钠盐。在体内可水解的含有羧基或羟基的式(1)化合物的酯是例如能在人体或动物体内被水解产生母体酸或醇的药学上可接受的酯。药学上可接受的适于羧基的酯包括C1-6烷基酯如甲酯或乙酯；C1-6烷氧基甲酯如甲氧基甲酯，C1-6烷酰氧基甲酯如新戊酰氧基甲酯，2-苯并[c]呋喃酮基酯，C3-8环烷氧基-羰氧基C1-6烷基酯如1-环己基羰氧基乙酯；1，3-二氧杂环戊烯(dioxolen)-2-酮基甲酯，例如5-甲基-1，3-二氧杂环戊烯-2-酮基甲酯；和C1-6烷氧基羰氧基乙酯，例如1-甲氧基羰氧基乙酯，并且可以在本发明化合物的任何羧基上形成。在体内可水解的含羟基式(Ⅰ)化合物的酯包括无机酯，例如磷酸酯和α-酰氧基烷基醚以及作为酯在体内水解生成母体羟基的产物的有关化合物。α-酰氧基烷基醚的实例包括乙酰氧基甲氧基醚和2，2-二甲基丙酰氧基甲氧基醚。选择的体内可水解酯对羟基所形成的基团包括烷酰基、苯甲酰基、苯基乙酰基和取代苯甲酰基与取代苯基乙酰基、烷氧基羰基(生成烷基碳酸酯)、二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(生成氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。适用的酰胺包括，例如N-C1-6烷基和N，N-二(C1-6烷基)酰胺，如N-甲基、N-乙基、N-丙基、N，N-二甲基、N-乙基-N-甲基或N，N-二乙基酰胺。具体的式(Ⅰ)化合物如表Ⅰ所列。在式中，虚线表示存在的双键，它位于R40和R41或在R41和R42之间，所属领域技术人员应理解这取决于基团R40、R41和R42的性质和化合价。表Ⅰ其中，表Ⅰ中的化合物4、25、34、50和56特别受关注并且这些化合物或其药学上可接受的盐将被作为本发明进一步的特征。本发明进一步提供定义如上的式(Ⅰ)化合物在炎性疾病治疗中的应用。此外，本发明提供了定义如上的式(Ⅰ)化合物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的应用。某些式Ⅰ化合物是已知化合物，例如在《分子学》(1997)，2(4)，69-79；《Chem．Pap．》(1996)，50(2)，72-76；《Chem．Pap．》(1994)，48(4)，268-73；《杂环》(1994)，37(3)，1695-700和(1989)，29(10)，1943-9；《Coll．Czech．Chem．Commun．》(1994)，59(2)，473-481和499-502；《Coll．Czech．Chem．Commun．》(1993)，58(9)，2139-49；《Coll．Czech．Chem．Commun．》(1992)，57(7)，1487-94；《Monatsh．Chem》(1992)，123(8-9)，807-15和《Magn．Reson．Chem．》(1990)，28(9)，830-1中公开了的具体化合物。然而，在本发明之前，并不知道任何这些化合物具有抗MCP-1的抑制活性。某些式(Ⅰ)化合物是新化合物，这些新化合物构成本发明的另外范围。所以，本发明还提供了定义如上的式(Ⅰ)化合物，或其药学上可接受的盐或其体内可水解酯。它是单核细胞趋化蛋白-1的抑制剂；需满足下列条件a)其中A-B形成上述次级式(ⅰ)或(ⅳ)的基团，R1不是苯基、氨基苯基或硝基苯基；和b)其中A-B形成上述次级式(ⅲ)的基团，R13是甲基和R15是氢，R14不是CHO；c)其中A-B形成上述次级式(ⅴ)的基团和X是SO2，R1不是未取代苯基。具体和优选的新式(Ⅰ)化合物是在上述有关药物组合物中描述的那些化合物。特别优选的一组化合物是定义如上的式(ⅠA)和(ⅠB)的化合物。一些式(Ⅰ)化合物可以具有手性中心。应理解，本发明包括式(I)化合物的所有这些光学异构体和非对映异构体以及含有它们的药物组合物。本发明进一步涉及式(Ⅰ)化合物的所有互变异构体和含有它们的药物组合物。还应理解，某些式(Ⅰ)化合物可以以溶剂化和非溶剂化形式存在，例如以水合形式存在。应懂得，本发明包括所有这些溶剂化形式和含有它们的药物组合物。式(Ⅰ)的化合物适合通过将式(Ⅶ)的化合物与式(Ⅷ)的化合物反应来制备。(Ⅶ)中A、B和R3是式(Ⅰ)中的有关定义和R27是氢或权利要求1中定义的R2基团。R1-X-ZⅧ(Ⅷ)中R1和X是式(Ⅰ)中的有关定义和Z是离去基团；并且此后如果希望或需要，将R27转化为基团R2和／或不同于该基团的基团。适用于Z的离去基团包括卤化物如氯化物、溴化物或碘化物，和甲磺酸酯或甲苯磺酸酯。该反应适合在有机溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)或DCM中，在碱如氢化钠、氢氧化钠、碳酸钾的存在下完成。该反应任意地在适当相转移催化剂的存在下进行。正如所属领域技术人员所理解的，对碱和溶剂的选择在某种程度上相互依赖，其中某些溶剂与一些碱相容。例如，氢化钠优选与二甲基甲酰胺或四氢呋喃一起使用，氢氧化钠优选与二氯甲烷和相转移催化剂一起使用。该反应是在适度的温度下进行，例如0-50℃，并且一般是在约室温下进行。优选式Ⅶ化合物中的R27是酯基，这样随后可以通过常规方法转化成为酸或酰胺或另一种酯或盐。例如，当Ⅹ是SO2和R2是羧基的甲酯时，它可以通过在干燥吡啶或DMF中与碘化锂反应转化成为相应羧酸。此外，当R27是氢时，它通过例如与二异丙基氨化锂(LDA)反应，随后通过氯甲酸烷基酯反应，可以转化为羧酸酯基。该反应适合在有机溶剂如四氢呋喃(THF)中在低温如-78℃至0℃，优选约-20℃至-40℃下完成。在这种情况下，氮原子上的基团是一个适合在2一位被直接金属取代的基团，例如苯基磺酰基。式(Ⅶ)的化合物或是已知化合物，或是可以由已知化合物通过常规方法制备的化合物。例如，式(Ⅶ)的化合物可以通过将式(Ⅸ)化合物环化来制备其中A和B如式(Ⅰ)中的有关定义和R28和R29表示可以环化成适当取代吡咯环的结合的部分。例如，R28和R29中的一个可以是式-CH=C(R30)N3的基团，其中R30是定义如上的基团R2或其保护形式，和R28和R29中的另一个可以是氢。生成式(Ⅶ)化合物的环化反应随后可以通过加热如回流下在有机溶剂中，特别是在高沸点非质子溶剂如二甲苯或甲苯中进行。而且，R28和R29中的一个可以是硝基并且另一个是式-CH2C(O)R27的基团，其中R27如式(Ⅶ)中的有关定义。这些化合物在催化剂如炭载钯的存在下、在氢的存在下环化。该反应可以在适当温度如0-80℃下，一般是在约室温下完成。所以，式(Ⅸ)的化合物的实例包括式(Ⅹ)和(Ⅺ)的化合物式(Ⅹ)的化合物可以通过例如式(Ⅻ)的化合物与式(ⅫⅠ)的化合物反应来制备。其中A、B、R3和R27如上述定义。该反应可以在有机溶剂如乙醇中在-20℃至0℃，适宜约为0℃的低温下进行。该反应适合在碱如醇盐，特别是乙醇盐(例如乙醇钾)的存在下完成。式(ⅫⅠ)的化合物适合通过式(ⅪⅤ)的化合物其中R3和R27定义如上和R30是离去基团，例如卤化物和特别是溴化物；与叠氮化物盐，例如叠氮化碱金属盐(具体如叠氮化钠)反应来制备。式(Ⅺ)的化合物通过式(ⅩⅤ)的化合物其中A、B和R3定义如上，与式(ⅩⅥ)的化合物反应来制备。其中R27定义如上和R31是离去基团。式(ⅩⅥ)化合物的实例是草酸酯，如草酸二乙酯。该反应适合在碱如氢化钠的存在下、在有机溶剂如THF中进行。反应采用0-40℃的适当温度，并且一般采用室温。式(Ⅻ)、(ⅪⅤ)、(ⅩⅤ)和(ⅩⅥ)的化合物是已知化合物，或它们是可以由已知化合物通过常规方法制备的化合物。位于通过A-B生成的环上的取代基可以在上述合成过程中引入，或利用所属领域普通技术人员熟知的多种方法引入，这取决于具体被引入的取代基的性质。而且，应用常规化学方法可以将一种取代基更换为不同的取代基。其它可能的情况对于所属领域普通技术人员来说是显而易见的。某些在此定义的中间体是新的，例如某些式(Ⅶ)化合物是新化合物，并且作为本发明进一步的特征提供。本发明的组合物可以是适合口服使用(例如片剂、锭剂、硬或软胶囊、水或油性混悬液、乳液、可分散粉末或颗粒、糖浆剂或酏剂)、局部使用(例如霜剂、软膏、凝胶，或水或油性溶液或混悬液)、吸入给药(例如微粉或液态气溶胶)、吹入给药(例如微粉)或非肠道给药(例如用于静脉内、皮下、肌肉内给药的灭菌水或油溶液或用于直肠给药的栓剂)的形式。本发明的组合物可以通过所属领域熟知的常规方法采用常用药物赋形剂来获得。因此，例如，口服使用的组合物含有一种或多种着色剂、甜味剂、矫味剂和／或防腐剂。适用于片剂的药学上可接受的赋形剂包括，例如惰性稀释剂，如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；制粒和崩解剂，如玉米淀粉或藻酸(algenicacid)；粘合剂，例如淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石；防腐剂，例如对-羟基苯甲酸乙酯或丙酯；和抗氧剂，例如抗坏血酸。片剂制剂可以是未包衣或包衣的，以改进其崩解作用和随后在胃肠道内活性组分的吸收作用，或改进稳定性和／或外观，在任一情况中，可以采用所属领域普通技术人员熟知的常规包衣剂和方法。口服使用的组合物可以是硬明胶胶囊的形式，其中活性组分与惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合；或是软明胶胶囊的形式，其中活性组分与水或油，例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。水混悬液一般含有微粉形式的活性组分和一种或多种助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶、和阿拉伯胶；分散或湿润剂，例如卵磷脂或氧化烯和脂肪酸的缩合产物(例如聚氧化乙烯硬脂酸酯)，或环氧乙烷和长链脂肪醇如十七碳乙烯氧基十六烷醇的缩合产物，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如聚氧化乙烯山梨糖醇一油酸酯，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物如聚氧化乙烯脱水山梨糖醇一油酸酯。水混悬液还可以含有一种或多种防腐剂(例如对-羟基苯甲酸乙酯或丙酯)，抗氧剂(如抗坏血酸)，着色剂，矫味剂，和／或甜味剂(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。油性混悬液可以通过将活性组分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰油)或矿物油(例如液体石蜡)中来制备。油性混悬液还可以含有增稠剂如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以加入上述甜味剂和矫味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗氧剂如抗坏血酸来保藏。适于通过加入水来制备水悬浮液的可分散粉末和颗粒一般含有活性组分和分散剂或湿润剂、助悬剂和一种或多种防腐剂。适用的分散剂或湿润剂和助悬剂例如是上述提及的那些。附加赋形剂，例如甜味剂、矫味剂和着色剂也可以存在其中。本发明的药物组合物还可以是水包油乳液。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油；或矿物油，例如液体石蜡；或它们的混合物。适用的乳化剂可以是，例如天然树胶，如阿拉伯胶或黄耆胶；天然磷脂，如大豆、卵磷脂；衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如脱水山梨糖醇一油酸酯)，和所述偏酯和环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧化乙烯脱水山梨糖醇一油酸酯。该乳液还可以含有甜味剂、矫味剂和／或防腐剂。糖浆剂和酏剂可以用甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖配制，并且还可以含有湿润剂、防腐剂、矫味剂和／或着色剂。所述药物组合物也可以是灭菌可注射水或油悬浮液的形式，该形式可以按照已知方法采用一种或多种适当的如上所述的分散剂或湿润剂和助悬剂来制备。灭菌可注射制剂还可以是在无毒非肠道给药可接受的稀释剂或溶剂中的灭菌可注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。栓剂可以通过将活性组分与在常温下为固体在直肠温度下为液体且在直肠内熔融释放出药物的适当无刺激赋形剂混合来制备。适用的赋形剂包括，例如，可可脂和聚乙烯乙二醇。局部用制剂，例如霜剂、软膏、凝胶和水或油溶液或混悬液，一般可以通过所属领域熟知的常规方法由活性组分和常规局部可接受的赋形剂或稀释剂配制得到。用于吹入给药的组合物可以是含有平均粒径等于或小于30μ的微粉的形式，微粉本身只含有活性组分或用一种或多种生理可接受载体如乳糖稀释的活性组分。此后，用于吹入的粉末通常被保存在胶囊中，胶囊内含有例如1-50mg的活性组分，胶囊适用于汽轮式吸入装置，例如已知药物色甘酸钠吹入用装置。用于吸入给药的组合物可以是常规加压式气溶胶，它可以将活性组分分配成为具有细小固体或液滴的气溶胶。可以采用普通气溶胶抛射剂，例如挥发性氟化烃类化合物或烃类化合物，气溶胶装置一般能够分配出计量量的活性组分。有关制剂的更进一步的信息，读者可以参考《综合药物化学》(ComprehensiveMedicinalChemistry)的第5卷第25．2章(CorwinHansch；ChairmanofEditorialBoard)，PergamonPress1990。与一种或多种赋形剂一起制成单剂量的活性组分的用量必须取决于被治疗宿主和具体的给药途径。例如，用于人体口服给药的制剂一般含有，例如，0．5mg-2g的与适当和常规量的赋形剂相结合的活性剂，所述赋形剂的量在组合物总重量的约5-98％(重量)内变化。单位剂型一般含有约1mg至约500mg的活性组分。有关给药途径和给药方案的进一步的信息，读者可以参考《ComprehensiveMedicinalChemistry》的第5卷第25．3章(CorwinHansch；ChairmanofEditorialBoard)，PergamonPress1990。式Ⅰ化合物的用于治疗或预防目的的剂量的大小当然应根据疾病的性质和严重性、动物或患者的年龄和性别以及给药途径按照公知的医学原理来改变。如上所述，式Ⅰ化合物可以有效治疗单独或部分由于大鼠法尼基化作用引起的，疾病或临床症状。在将式Ⅰ的化合物用于治疗或预防目的时，通常给药是使日剂量范围在，例如，0．5mg至75mg／kg体重内，如果需要可以分次给药。一般地，采用非肠道途径给药时应以低剂量给药。因此，例如对于静脉内给药，给药剂量可以采用例如0．5mg至30mg／kg体重的范围。同样地，对于吸入给药，剂量范围可以采用例如0．5mg至25mg/kg体重的范围。但优选口服给药。另一方面，本发明提供一种通过施用上述式(Ⅰ)化合物或其上述药物组合物用于治疗炎性疾病的方法。本发明将进一步通过下列实施例举例说明，但不受下列实施例的限定，其中采用以下通用方法，除非另外说明。N，N-二甲基甲酰胺(DMF)用4_分子筛干燥。无水四氢呋喃(THF)得自于AldrichSURESEALTM试剂瓶。其它市售试剂和溶剂无需进一步纯化即可使用，除非另外说明。有机溶剂提取液用无水MgSO4干燥。1H、13C和19FNMR采用Me2SO-d6记录在BrukerWM200、WM250、WM300或WM400仪器上，如果适当的话，用Me4Si或CCl3F作为内标，除非另有说明。化学位移表示为d(ppm)，峰的多重态表示如下s，单重峰；d，双重峰；dd，一对双重峰；t，三重峰；dt，一对三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，宽带。质谱记录在VG12-12四极，VG70-250SE、VGZAB2-SE或VG改进AEI／KratosMS9分光计上。对于TLC分析，采用Merck预涂层TLC板(硅胶60F254，d=0．25mm)。闪式层析是在硅胶(MerckKieselgelArt．9385)上进行。在Kofler密闭块上或用Bchi熔点仪进行熔点测定并且未经校正。所有温度均为摄氏度。制备例1叠氮乙酸乙酯室温下，将溴乙酸乙酯(3．43ml)加入叠氮化钠(3g)在DMF(50ml)中的混悬液内且在90℃下将该反应搅拌5小时。将反应物倾入冰水(300g)中，用乙醚提取。合并的提取液用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)和浓缩，得到无色油状产物(3．37g，84％)，该产物无需进一步纯化即可使用。NMRd(CDCl3)1．30(3H，t)，3．82(2H，s)，4．23(2H，q)；M／z(+)130(MH+)。制备例2叠氮乙酸甲酯重复实施例1所述方法但采用适当的溴乙酸酯。得到标题化合物，收率为82％；NMRd(CDCl3)3．80(3H，s)，3．90(2H，s)。制备例32-叠氮-3-(2-噻吩基)丙酸乙酯0℃下，将叠氮乙酸乙酯(1．38g)和噻吩-2-羧醛(1g)在乙醇(20ml)中的溶液滴加至乙醇钾(0．9g)的乙醇(20ml)溶液内。在0℃下将反应搅拌2小时且在室温下搅拌2小时，随后倾入饱和氯化铵水溶液(150ml)中，用乙醚提取。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，真空浓缩，残余物通过柱层析利用异己烷作为洗脱剂纯化，得到浅黄色结晶固体的产物(0．49g，25％)，NMRd(CDCl3)1．40(3H，t)，4．37(2H，q)，7．08(2H，m)，7．18(1H，s)，7．38(1H，m)，7．52(1H，d)。制备例44H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-羧酸甲酯将2-叠氮-3-(2-噻吩基)丙烯酸乙酯(0．45g)在二甲苯(10ml)中的溶液加热回流30分钟，真空浓缩，残余物通过柱层析用异己烷-15％乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到浅黄色固体产物(0．26g，66％)，NMRd(CDCl3)1．40(3H，t)，4．39(2H，q)，6．98(1H，d)，7．18(1H，s)，7．35(1H，d)，9．30(1H，bs)；M／z(-)194(M-H+)，166。制备例54-羟甲基-2-甲基噻唑将氢化锂铝(1M的四氢呋喃溶液，140ml)滴加到0℃的2-甲基噻唑-4-甲酸乙酯(22g)在四氢呋喃中的溶液内。令反应升至室温，倾入饱和碳酸氢钠水溶液中，用乙酸乙酯提取。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，浓缩，残余物通过柱层析用乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到黄色胶状的产物(10g，55％)，NMRd(CDCl3)2．7(3H，s)，4．72(2H，s)，7．02(1H，s)。制备例62-甲基噻唑-4-羧醛在-60℃下，将草酰氯(2M的二氯甲烷溶液，2．4ml)滴加至4-羟甲基-2-甲基噻唑(0．5g)和二甲基亚砜(0．34ml)的二氯甲烷(15ml)溶液中。令反应升至室温，冷却至-60℃并加入N，N-二异丙基胺(2．02ml)。随后令反应升至室温，倾入水中，用二氯甲烷提取。将合并的有机提取液干燥，真空浓缩和通过柱层析用异己烷至异己烷40％乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到浅黄色固体的产物(0．27g，55％)，NMRd(CDCl3)2．8(3H，s)，8．05(1H，s)，9．98(1H，s)；M／z(+)128(MH+)。制备例7采用适当的杂芳基醛和叠氮乙酸酯重复制备例3和4所述的方法。由此得到下列化合物。制备例7a4H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酸乙酯收率15％(2步)，M／z(-)194(M-H+)，166，122。制备例7b4H-呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯收率18％(2步)，M／z(+)180(M-H+)，152，134，108，102。制备例7c4H-呋喃并[2，3-b]吡咯-5-甲酸乙酯收率9％(2步)，M／z(-)179(M-H+)，178，150，106。制备例7d4H-1-甲基吡咯并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯收率7％(2步)，M／z(+)193(MH+)，147。制备例7e4H-呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯收率25％(2步)，NMRd(DMSO)3．78(3H，s)，6．58(1H，s)，6．72(1H，s)，7．78(1H，s)，11．64(1H，bs)；M／z(-)165(M+)，164。制备例7f4H-3-溴噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯收率3％(2步)，NMRd(DMSO)1．28(3H，t)，4．24(2H，q)，7．02(1H，s)，7．18(2H，s)，12．15(1H，bs)；M／z(-)274(M+)，272。制备例7g4H-噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酸甲酯收率7％(2步)，NMRd(DMSO)3．80(3H，s)，7．00(2H，m)，7．10(1H，d)，12．25(1H，bs)；M／z(-)180(M-H+)。制备例7h1-甲基-1，4-二氢吡咯并[2，3-d]咪唑-5-甲酸乙酯收率24％(2步)，NMRd(DMSO)1．25(3H，t)，3．7(3H，s)，4．2(2H，q)，6．7(1H，s)，7．7(1H，s)，11．6(1H，bs)；M／z(+)194(MH+)。制备例7i3-甲基-3，4-二氢吡咯并[2，3-d]咪唑-5-甲酸乙酯收率7％(2步)，NMRd(DMSO)1．3(3H，t)，3．7(3H，s)，4．2(2H，q)，6．7(1H，s)，7．6(1H，s)，11．7(1H，bs)；M／z(+)194(MH+)。制备例7j4H-吡咯并[2，3-d][1，3]噻唑-5-甲酸乙酯收率10％(2步)，NMRd(DMSO)1．3(3H，t)，4．3(2H，q)，7．3(1H，s)，8．3(1H，s)，9．2(1H，bs)。制备例7k4H-2-甲基噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯收率67％(2步)，NMRd(DMSO)1．24(3H，t)，2．43(3H，s)，4．23(2H，q)，6．70(1H，s)，6．95(1H，s)；M／z(-)208(M-H+)。制备例7l4H-吡咯并[3，2-d][1，3]噻唑-5-甲酸甲酯收率4％(2步)，NMRd(DMSO)3．82(3H，s)，7．19(1H，s)，8．84(1H，s)；M／z(+)183(MH+)。制备例7m2-甲基-4H-吡咯并[3，2-d][1，3]噻唑-5-甲酸甲酯收率38％(2步)，NMRd(DMSO)2．68(3H，s)，3．8(3H，s)，7．05(1H，s)；M／z(+)197(MH+)。制备例7n4H-2-甲氧基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯收率19％(2步)，NMRd(DMSO)3．7(1H，s)，3．9(1H，s)，5．6(1H，s)，6．65(1H，s)，11．55(1H，s)；M／z(+)196(MH+)。实施例14-(3，4-二氯苄基)噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物7)将氢化钠(32mg，60％)加入到4H-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(0．13g)(得自制备例4)的溶液中并且将反应搅拌30分钟。加入3，4-二氯苄基溴(0．22g)且继续搅拌2小时。加入水终止该反应，用乙醚提取。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，浓缩，残余物通过柱层析用异己烷-5％乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到黄色固体的产物(0．15g，64％)，NMRd(DMSO)1．24(3H，t)，4．22(2H，q)，5．73(2H，s)，6．63(1H，d)，6．98(1H，dd)，7．25(2H，m)，7．37(1H，s)，7．55(1H，d)；M／z(+)，354(M+)，214，158，129。实施例2采用适当的吡咯和苄卤化物或芳基磺酰氯重复实施例1所述的方法。由此得到下列化合物。实施例2a4-(3，4-二氯苄基)噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物1)收率73％，NMRd(CDCl3)1．36(3H，t)，4．30(2H，q)，5．62(2H，s)，6．91(1H，d)，7．02(1H，d)，7．07(1H，dd)，7．24(1H，s)，7．35(2H，m)；M／z(+)354(M+)，319。实施例2b4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物3)收率52％，NMRd(CDCl3)1．35(3H，t)，4．26(2H，q)，5．60(2H，s)，6．28(1H，d)，6．89(1H，s)，6．96(1H，dd)，7．23(1H，s)，7．36(1H，d)，7．50(1H，d)；M／z(+)338(M+)。实施例2c4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[2，3-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物5)收率88％，NMRd(CDCl3)1．34(3H，t)，4．28(2H，q)，5．60(2H，s)，6．53(1H，d)，6．96(1H，s)，7．09(1H，dd)，7．30(1H，d)，7．37(2H，m)；M／z(+)338(M+)。实施例2d4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基吡咯并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物17)收率81％，NMRd(CDCl3)1．33(3H，t)，3．67(3H，s)，4．24(2H，q)，5．58(2H，s)，5．80(1H，d)，6．79(1H，d)，6．84(1H，s)，6．97(1H，dd)，7．24(1H，m)，7．32(1H，d)；M／z(+)351(M+)。实施例2e4-(3，4-二氯苯磺酰基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物19)收率70％，NMRd(DMSO)3．72(3H，s)，7．03(1H，s)，7．38(1H，s)，7．96(2H，m)，8．06(1H，s)，8．23(1H，s)；M／z(+)374(M+)，344，165，121。实施例2f4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物21)收率65％，NMRd(DMSO)3．72(3H，s)，5．63(2H，s)，6．80(1H，d)，6．90(1H，s)，7．02(1H，dd)，7．39(1H，s)，7．55(1H，d)，7．80(1H，d)；M／z(+)324(M+)，259，243，158，121。实施例2g4-(3，4-二氯苯磺酰基)噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物15)收率70％，NMRd(DMSO)3．70(3H，s)，7．17(2H，d)，7．46(1H，d)，7．47(1H，s)，7．84(1H，dd)，7．93(1H，d)，8．20(1H，s)；M／z(+)392(M+)，390，360，339，159，150，115。实施例2h4-(3，4-二氯苄基)-2-溴噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物9)收率62％，NMRd(DMSO)1．22(3H，t)，4．20(2H，q)，5．66(2H，s)，6．96(1H，dd)，7．21(1H，s)，7．38(1H，m)，7．57(1H，d)，7．59(1H，s)；M／z(+)434(M+)，119。实施例2j4-(3，4-二氯苄基)-2-甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物24)标题化合物是由2-甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯制备，收率74％，NMRd(DMSO)1．20(3H，t)，2．35(3H，s)，4．20(2H，q)，5．60(2H，s)，6．4(1H，s)，6．80(1H，s)，7．00(1H，m)，7．40(1H，s)，7．60(1H，d)。实施例2j4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-1，4-二氢吡咯并[2，3-d]咪唑-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物26)收率70％，NMRd(DMSO)1．2(3H，t)，3．7(3H，s)，4．2(2H，q)，5．6(2H，s)，6．9(1H，s)，7．05(1H，m)，7．35(1H，m)，7．5(1H，d)，7．8(1H，s)；M／z(+)352(MH+)。实施例2k4-(3，4-二氯苄基)-3-甲基-3，4-二氢吡咯并[2，3-d]咪唑-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物28)收率79％，NMRd(DMSO)1．25(3H，t)，3．6(3H，s)，4．2(2H，q)，5．8(2H，s)，6．85(1H，m)，7．0(1H，s)，7．3(1H，s)，7．6(2H，m)；M／z(+)352(MH+)。实施例2l4-(3，4-二氯苄基)-4-H-吡咯并[2，3-d][1，3]噻唑-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物30)收率100％，NMRd(DMSO)1．2(3H，t)，4．25(2H，q)，5．8(2H，s)，7．0(1H，m)，7．3(1H，s)，7．4(1H，m)，7．55(1H，d)，9．15(1H，s)；M／z(+)355(MH+)。实施例2m4-(3，4-二氯苄基)-2-甲基噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物32)收率94％，NMRd(CDCl3)1．35(3H，t)，2．55(3H，s)，4．26(2H，q)，5．60(2H，s)，6．56(1H，s)，6．90(1H，dd)，7．20(2H，m)，7．35(1H，d)；M／z(+)370，368(M+)。实施例2n4-(3，4-二氟苄基)-2-甲基噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物33)收率64％，NMRd(CDCl3)1．35(3H，t)，2．55(3H，s)，4．30(2H，q)，5．60(2H，s)，6．55(1H，s)，6．80-7．20(4H，m)；M／z(+)336(MH+)。实施例2o4-(3，4-二氯苄基)-4H-吡咯并[3，2-d][1，3]噻唑-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物48)收率58％，NMRd(CDCl3)3．88(3H，s)，5．68(2H，s)，7．05(1H，dd)，7．31(1H，d)，7．39(1H，d)，7．45(1H，s)，8．51(1H，s)；M／z(+)341(MH+)。实施例2p4-(3，4-二氯苄基)-2-甲基-4H-吡咯并[3，2-d][1，3]噻唑-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物49)收率80％，NMRd(CDCl3)2．72(3H，s)，3．85(3H，s)，5．62(2H，s)，7．05(1H，dd)，7．28(1H，s)，7．3(1H，d)，7．39(1H，d)；M／z(+)355(MH+)。实施例2q4-(3，4-二氟苄基)吡咯并[2，3-d]噻唑-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物52)收率88％，NMRd(DMSO)1．25(3H，t)，4．25(2H，q)，5．8(2H，s)，6．9(2H，m)，7．2(1H，m)，7．3(1H，m)，9．2(1H，s)；M／z(+)323(MH+)。实施例2r4-(4-氯-3-氟苄基)-2-甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物54)收率95％，NMRd(DMSO)2．35(3H，s)，3．7(3H，s)，5．6(2H，s)，6．4(1H，s)，6．85(1H，s)，6．9(1H，d)，7．15(1H，d)，7．5(1H，t)；M／z(+)322(MH+)。实施例2s4-(3-氯-4-氟苄基)-2-甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物55)收率78％，NMRd(DMSO)2．35(3H，s)，3．7(3H，s)，5．55(2H，s)，6．4(1H，s)，6．8(1H，s)，7．1(1H，m)，7．35(2H，m)；M／z(+)322(MH+)。实施例2t4-(3，4-二氯苄基)-2-甲氧基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表Ⅰ中的化合物58)收率47％，NMRd(DMSO)3．65(3H，s)，3．90(3H，s)，5．6(2H，s)，5．85(1H，s)，6．85(1H，s)，7．05(1H，d)，7．4(1H，m)，7．6(1H，d)；M／z(+)354(MH+)。实施例34-(3，4-二氯苄基)-2-(噻吩-2-基)噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表Ⅰ中的化合物10)将四(三苯基膦)钯(O)(20mg)加入4-(3，4-二氯苄基)-2-溴噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(0．1g)和噻吩-2-硼酸(34mg)在乙醇(1ml)、甲苯(1ml)和碳酸钾水溶液(2N，1ml)中的脱气溶液内，在80℃和氩气氛下将反应搅拌6小时。将反应冷却，倾入2NHCl中，用乙醚提取。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，真空浓缩，残余物通过柱层析用异己烷至异己烷-25％乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到浅黄色结晶固体的产物(77mg，77％)，M／z(+)435(MH+)，276，204，159，127。实施例42-(3-氨基苯基)-4-(3，4-二氯苄基)噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(表1中的化合物11)采用适当硼酸重复实施例3中所述的方法。得到标题化合物，收率为82％，M／z(+)444(MH+)，285，241，213，186，179，159，123。实施例54-(3，4-二氯苄基)-2-甲酰基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物36)将磷酰氯(1．41ml)加入到冷却的DMF(4．7ml)中并且将反应搅拌20分钟。保持温度低于10℃，滴加4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(4．89g)。在此温度下将该混合物搅拌30分钟，随后在60℃下加热1小时。倾入冰／水中终止该反应，用饱和碳酸氢钠水溶液中和并用乙酸乙酯提取。将有机提取液干燥，(MgSO4)，真空浓缩，残余物通过柱层析、用异己烷30％乙酸乙酯增高至异己烷70％乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到浅褐色固体的产物(3．85g，72％)。NMRd(CDCl3)3．9(3H，s)，5．65(2H，s)，6．9(1H，s)，7．0(2H，m)，7．25(1H，s)，9．65(1H，s)；M／z(+)354(MH+)，352。实施例64-(3，4-二氯苄基)-2-羟甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物37)将4-(3，4-二氯苄基)-2-甲酰基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(0．2g)溶解在甲醇(10ml)和THF(10ml)中并冷却至0℃。加入硼氢化钠(26mg)，将反应搅拌2小时。该混合物用2MHCl酸化，部分蒸发，用乙酸乙酯提取。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，真空浓缩，得到白色固体(0．23g)，NMRd(CDCl3)3．8(3H，s)，4．65(2H，d)，5．6(2H，s)，6．2(1H，s)，6．85(1H，s)，7．0(1H，dd)，7．2(1H，d)，7．35(1H，d)；M／z(+)340(MH+)，332，278。实施例72-羧基-4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物39)将4-(3，4-二氯苄基)-2-甲酰基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(0．2g)溶解在叔丁醇(20ml)和2-甲基丁-2-烯(10ml)中。向其中滴加亚氯酸钠(0．46g)和正磷酸二氢钠(0．62g)的水(10ml)溶液并且在室温下将该反应搅拌18小时。将混合物部分蒸发且在乙酸乙酯／水之间分配。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，真空浓缩，得到白色固体(0．19g，91％)NMRd(DMSO)3．75(3H，s)，5．65(2H，s)，7．0(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．5(1H，d)，7．55(2H，m)；M／z(+)370(MH+)，368。实施例82-氰基-4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物41)将4-(3，4-二氯苄基)-2-甲酰基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(0．7g)溶解在吡啶(7ml)中。向其中加入氯化羟铵(0．23g)并在90℃下将该反应加热30分钟。滴加乙酸酐(2．5ml)，将反应继续在90℃下加热2小时。通过倾入冰／水中终止该反应，过滤出所得沉淀且真空干燥，得到浅褐色固体(0．69g，100％)，NMRd(CDCl3)3．85(3H，s)，5．6(2H，s)，6．85(2H，d)，6．95(1H，dd)，7．2(1H，d)，7．4(1H，d)；M／z(-)349(M-H+)，347，189。实施例92-甲酰胺基-4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物43)将2-氰基-4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(0．35g)溶解在THF(5ml)和甲醇(2．5ml)中。向其中加入2MNaOH溶液(5ml)，将反应搅拌18小时。蒸发溶剂，将残余物溶解在水中，用乙酸酸化。过滤所得沉淀并真空干燥，得到白色固体(333mg，99％)，NMRd(DMSO)5．75(2H，s)，6．65(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．25(1H，d)，7．5(2H，d)；M／z(+)355(MH+)，353。实施例104-(3，4-二氯苄基)-2-(5’-四唑基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物44)将2-氰基-4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(0．35g)溶解在DMF(7．5ml)中。向其中加入氯化铵(64mg)和叠氮化钠(78mg)，将反应在100℃下加热4小时。加入水并用2MHCl溶液酸化该混合物。过滤所得沉淀，真空干燥，得到浅褐色固体(0．35g，89％)，NMRd(DMSO)3．8(3H，s)，5．7(2H，s)，7．05(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．5(1H，d)，7．6(2H，m)，7．9(1H，s)；M／z(-)392(M-H+)，390，334。实施例114-(3，4-二氯苄基)-二甲基氨基甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(表1中的化合物46)将4-(3，4-二氯苄基)-2-甲酰基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(0．25g)溶解在甲醇(5ml)和THF(10ml)中，向其中加入乙酸钠(116mg)和一份MgSO4，随后加入二甲基胺溶液(2M的甲醇溶液，0．53ml)。1小时后，再加入2．5ml二甲基胺溶液，30分钟后加入氰基硼氢化钠(0．45g)。将反应搅拌18小时，随后加入1M碳酸钾溶液终止该反应，用乙酸乙酯提取。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，真空浓缩。残余物通过柱层析、用乙酸乙酯增高至10％甲醇乙酸乙酯作为洗脱剂纯化，得到黄色油状物(0．15g，55％)，NMRd(CDCl3)2．3(6H，s)，3．5(2H，s)，3．8(3H，s)，5．55(2H，s)，6．15(1H，s)，6．85(1H，s)，6．95(2H，dd)，7．2(1H，d)，7．35(1H，d)。M／z(+)383(MH+)，381，338，336。实施例124-(3，4-二氯苄基)噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物8)将氢氧化钠(3N，1．3ml)加入到4-(3，4-二氯苄基)-噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸乙酯(0．137g)在THF(2．5ml)和甲醇(2．5ml)中的搅拌溶液内。室温下继续搅拌16小时，真空浓缩，将残余物溶解在水中。滴加乙酸，使产物沉淀，该产物为白色固体，过滤并干燥(0．107g，85％)，NMRd(DMSO)5．79(2H，s)，7．05(1H，m)，7．28(2H，m)，7．42(1H，s)，7．60(2H，m)；M／z(-)326(M+)，324，282，280。实施例13用适当的N-苄基吡咯羧酸酯重复实施例12所述的方法。由此得到下列化合物。实施例13a4-(3，4-二氯苄基)噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酸(表1中的化合物2)收率84％，M／z(-)326(M+)，324，280。实施例13b4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物4)收率78％，M／z(-)310(M+)，308。实施例13c4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[2，3-b]吡咯-5-甲酸(表1中的化合物6)收率55％，M／z(-)310(M+)，308。实施例13d4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基吡咯并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表1中的化合物18)收率19％，M／z(-)323(M+)，321。实施例13e4-(3，4-二氯苄基)-2-溴噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表1中的化合物14)收率70％，NMRd(DMSO)5．72(2H，s)，7．00(1H，m)，7．20(1H，s)，7．42(1H，s)，7．60(2H，m)，12．71(1H，bs)；M／z(-)404(M-H+)，360，137。元素分析forC14H8BrCl2NO2S实测值C，41．6％；H，2．1％；N，3．2％；理论值C，41．5％；H，2．0％；N，3．46％。实施例13f4-(3，4-二氯苄基)-2-(噻吩-2-基)噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表1中的化合物12)收率91％，M／z(-)406(M-H+)，362。实施例13g2-(3-氨基苯基)-4-(3，4-二氯苄基)噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物13)收率76％，M／z(-)415(M-H+)，371。实施例13h4-(3，4-二氯苄基)-2-甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物25)收率88％，M／z(-)322(M-H+)，280。实施例13i4-(3，4-二氯苄基)-1-甲基-1，4-二氢吡咯并[2，3-d]咪唑-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物27)收率89％，NMRd(DMSO)3．7(3H，s)，5．6(2H，s)，6．75(1H，s)，7．1(1H，d)，7．35(1H，m)，7．5(1H，d)，7．7(1H，s)；M／z(-)322(M-H+)。实施例13j4-(3，4-二氯苄基)-3-甲基-3，4-二氢吡咯并[2，3-d]咪唑-5-甲酸(表1中的化合物29)收率28％，M／z(-)322(M-H+)。实施例13k4-(3，4-二氯苄基)-4H-吡咯并[2，3-d][1，3]噻唑-5-甲酸(表1中的化合物31)收率70％，NMRd(DMSO)5．6(2H，s)，7．05(1H，m)，7．2(1H，s)，7．4(1H，m)，7．5(1H，d)，9．1(1H，s)；M／z(-)325(M-H+)。实施例13l4-(3，4-二氯苄基)-2-甲基噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物34)收率38％，NMRd(DMSO)2．45(3H，s)，5．65(2H，s)，6．95(1H，s)，7．00(2H，m)，7．38(1H，d)，7．50(1H，d)；M／z(-)340(M+)，338。实施例13m4-(3，4-二氟苄基)-2-甲基噻吩并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物35)收率64％，NMRd(DMSO)2．45(3H，s)，5．65(2H，s)，6．90(1H，m)，6．95(1H，s)，7．16(1H，s)，7．19(1H，m)，7．32(1H，dt)；M／z(-)306(M-H+)。实施例13n4-(3，4-二氯苄基)-2-羟甲基呋喃并[3，2-b]咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物38)收率32％，NMRd(DMSO)4．4(2H，s)，5．65(2H，s)，6．55(1H，s)，6．8(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．4(1H，d)，7．55(1H，d)。M／z(+)342(MH+)，340，322。实施例13o4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-2，5-二甲酸(表Ⅰ中的化合物40)收率72％，NMRd(DMSO)5．65(2H，s)，6．9(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．5(3H，m)；M／z(+)354(MH+)，159，141。实施例13p4-(3，4-二氯苄基)-2-(5’-四唑基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物45)收率83％，NMRd(DMSO)5．7(2H，s)，6．95(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．5(2H，m)，7．55(1H，d)；M／z(+)380(MH+)，378。实施例13q4-(3，4-二氯苄基)-2-二甲基氨基甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物47)收率52％，NMRd(DMSO)2．15(6H，s)，3．5(2H，s)，5．6(2H，s)，6．6(1H，s)，6．8(1H，s)，7．1(1H，dd)，7．4(1H，d)，7．6(1H，d)；M／z(-)367(M-H+)，365，321。实施例13r4-(3，4-二氯苄基)-4H-吡咯并[3，2-d][1，3]噻唑-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物50)收率68％，NMRd(DMSO)5．75(2H，s)，7．1(1H，dd)，7．3(1H，s)，7．48(1H，d)，7．6(1H，d)，8．8(1H，s)；M／z(-)325(M-H+)。实施例13s4-(3，4-二氯苄基)-2-甲基-4H-噻吩并[3，2-d][1，3]噻唑-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物51)收率79％，NMRd(DMSO)2．64(3H，s)，5．7(2H，s)，7．08(1H，dd)，7．15(1H，s)，7．45(1H，d)，7．6(1H，d)；M／z(-)339(M-H+)。实施例13t4-(3，4-二氟苄基)吡咯并[2，3-b][1，3]噻唑-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物53)收率70％，NMRd(DMSO)5．8(2H，s)，6．95(1H，m)，7．3(3H，m)，9．1(1H，s)；M／z(-)293(M-H+)。实施例13u4-(4-氯-3-氟苄基)-2-甲基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物56)收率77％，NMRd(DMSO)2．35(3H，s)，5．6(2H，s)，6．4(1H，s)，6．75(1H，s)，6．9(1H，d)，7．15(1H，d)，7．5(1H，t)；M／z(-)306(M-H+)。实施例13v4-(3-氯-4-氟苄基)-2-甲基呋喃并[3，2-d]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物57)收率71％，NMRd(DMSO)2．35(3H，s)，5．6(2H，s)，6．4(1H，s)，6．75(1H，s)，7．1(1H，m)，7．3(2H，m)；M／z(-)306(M-H+)。实施例13w4-(3，4-二氯苄基)-2-甲氧基呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物22)收率68％，NMRd(DMSO)3．9(3H，s)，5．6(3H，s)，5．8(1H，s)，6．75(1H，s)，7．05(1H，d)，7．4(1H，s)，7．6(1H，d)；M／z(-)338(M-H+)。实施例144-(3，4-二氯苯磺酰基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物20)将4-(3，4-二氯苯磺酰基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸甲酯(1．15g)和碘化锂(4．Og)溶解在吡啶(50ml)中且加热回流5小时，冷却，随后真空干燥。残余物在2NHCl和乙醚之间分配。将合并的有机提取液干燥(MgSO4)，浓缩，残余物用乙醚研制，生成白色结晶固体的产物，过滤和干燥(0．58g，52％)，NMRd(DMSO)7．02(1H，d)，7．27(1H，s)，7．88(2H，s)，8．03(1H，d)，8．22(1H，s)；M／z(-)360(M+)，314，252，250，227，225，209，170。AnalysisforC13H7Cl2NO5SfoundC，43．2％；H，2．1％；N，3．8％；theoryC，41．4％；H，2．0％；N，3．9％。实施例15采用适当的羧酸甲酯重复实施例14所述的方法。由此得到下列化合物。实施例15a4-(3，4-二氯苯磺酰基)噻吩并[2，3-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物16)收率11％，NMRd(DMSO)7．12(1H，d)，7．38(1H，s)，7．42(1H，d)，7．80(1H，dd)，7．90(1H，d)，8．20(1H，s)；M／z(+)378(M+)，376，196，166，131，119，113。实施例15b2-氰基-4-(3，4-二氯苄基)呋喃并[3，2-b]吡咯-5-甲酸(表Ⅰ中的化合物42)收率81％，NMRd(DMSO)5．65(2H，s)，6．9(1H，s)，7．05(1H，dd)，7．45(1H，d)，7．6(1H，d)，7．9(1H，s)。M／z(-)335(M-H+)，333，291，289，262。实施例16对hMCP-1拮抗剂的生物试验a)hMCP-1受体结合试验ⅰ)hMCP-1受体的克隆和表达通过PCR、由THP-1细胞RNA、采用基于公开的MCP-1受体序列(Charo等人，1994，《美国科学院院报》91，2752)的适当寡核苷酸引物克隆得到MCP-1受体B(CCR2B)cDNA。所得PCR产物被克隆在载体PCR-IITM中(InVitrogen，SanDiego，CA．)。将无差错CCR2BcDNA进一步作为HindⅢ-NotⅠ片段克隆在真核表达载体pCDNA3(InVitrogen)中以分别生成pCDNA3／CC-CKR2A和pCDNA3／CCR2B。用磷酸钙沉淀法将线性化pCDNA3／CCR2BDNA转染至CHO-K1细胞中(Wigler等人，1979，《细胞学》16，777)。细胞被转染后24小时，通过加入1mg／ml的硫酸遗传霉素(G418，GibcoBRL)选择出被转染细胞。按照早已公开的方法(Needham等人，1995，Prot．Express．Purific_6，134)制备RNA和Northernblotting．CHO-K1克隆7(CHO_CCR2B)已被鉴别为最高MCP-1受体B表达子。ⅱ)膜片段的制备令CHO-CCR2B细胞在DMEM中生长，DMEM中补加有10％胎牛血清、2mM谷酰胺、1x非必需氨基酸、1x次黄嘌呤和胸腺嘧啶核甙添加物和青霉素-链霉素(50μg链霉素／ml，GibcoBRL)。利用业已公开的细胞溶解／差速离心法来制备膜片段(Siciliano等人，1990，《生物化学杂志》265，19658)。通过BCA蛋白试验(Pierce，Rockford，llinois)按照制造商的说明来确定蛋白浓度。ⅲ)分析试验用Bolton&amp;Hunter接合法(Bolton等人，1973，《生物化学杂志》133，529；AmershamInternationalplc)来制备125IMCP-1。利用Ernst等人，1994，《免疫学杂志》152，3541的方法进行平衡结合实验。简单地说，将不同量的125I标记MCP-1加入10mg存在于100ml结合缓冲液中的纯化CHO-CCR2B细胞膜中。室温下温育1小时后，过滤结合反应的混合物并用平板洗涤器(PackardHarvesterFiltermateTM196)洗涤5次。向各孔内加入闪烁计数液(25μl，MicroscintTM-20，对含水样本来说是高效的液态闪烁计数合剂)并且用平板密封器覆盖平板和计数(PackardTopCountTM)。采用100pM125I-标记MCP-1在不同浓度的未标记MCP-1的存在下进行上述冷式竞争试验。通过反应中过量200倍摩尔的未标记MCP-1的内含物来测定非特异性结合作用。利用得自于CHO-CCR2B细胞的膜片段进行的配体结合试验显示，CCR2B是以0．2pmoles／mg膜蛋白的浓度存在，同时选择性和高亲和性地与MCP-1结合(IC50=110pM，Kd=120pM)。与这些膜的结合完全是可逆的，在室温下45分钟后达到平衡，当MCP-1的使用浓度为100pM至500pM时，MCP-1结合作用和CHO-CCR2B细胞膜浓度之间存在线性关系。用8个点剂量-反应曲线一式二份测试溶解在DMSO(5μl)中的试验化合物在一定浓度范围(0．1-200μM)与100pM标记MCP-1的竞争作用，计算出IC50浓度。本发明的试验化合物在此处所述的hMCP-1受体结合试验中具有等于或小于50μM的IC50。例如实施例13g的化合物的IC50为8．3μM。b)THP-1细胞中MCP-1介导的钙流出令人体单核细胞系THP-1在合成细胞培养基RPMI1640中生长，该培养基中补加有10％胎牛血清、2mM谷酰胺和青霉素-链霉素(50μg链霉素／ml，GibcoBRL)。将THP-1细胞在HBSS(无Ca2+和Mg2+)+1mg／mlBSA中洗涤且重新悬浮在相同的缓冲液中，密度为3×106细胞／ml。随后在37℃下将细胞用1mMFURA-2／AM荷载30分钟，在HBSS中洗涤2次，重新悬浮达到1x106细胞／ml。THP-1细胞悬浮液(0．9ml)加入到5ml一次性比色杯中，该比色杯内含有磁搅拌棒和2．1ml预热(37℃)的含有1mg／mlBSA，1mMMgCl2和2mMCaCl2的HBSS。将比色杯置于荧光分光光度计(PerkinElmer，Norwalk，CT)中并在搅拌和37℃下预热4分钟。记录70秒内的荧光，10秒后通过向比色杯中加入hMCP-1刺激细胞。测定[Ca2+]i分别在340nm和380nm的激发光谱，随后测定在510nm下的荧光发射强度。计算出在340nm和380nm下激发的荧光激发强度的比例(R)，按照下列公式给出和确定胞质[Ca2+][Ca2+]i=Kd(R-Rmin)(Sf2／Sb2)(Rmax-R)其中FURA-Ca2+在37℃下复合的Kd是在224nm测定。Rmax是在加入10mM伊屋诺霉素后测定的最大荧光比例，Rmin是通过随后加入含有5mMEGTA的无Ca2+溶液测定的最小比例，和Sf2／Sb2是在380nm激发时分别测定的Rmin和Rmax的荧光值比例。用hMCP-1刺激THP-1细胞可以诱发[Ca2+]i以特异和剂量依赖的方式迅速、瞬时增高。剂量反应曲线表明EC50约为2nm。测试溶解在DMSO(10μl)中的试验化合物对钙释放的抑制作用，这是通过将它们加入到细胞悬浮液中，10秒后加入配体并且测定[Ca2+]i瞬时提高中的降低。另外还检测出试验化合物通过替代加入的hMCP-1缺乏激动作用。c)hMCP-1介导的趋化性和RANTES试验体外趋化试验采用人体单核细胞系THP-1或得自于新鲜人血的外周血混合的单核细胞，外周血混合单核细胞是通过红细胞沉降法随后在9．6％(w／v)甲泛影酸钠和5．6％(w／v)多糖，密度1．077g／ml(LymphoprepTMNycomed)中通过密度梯度离心法来纯化。通过直接用计数器对透过的细胞计数，或通过显色残存试验(colourimetricviabilityassay)测定线粒体呼吸链裂解的四唑鎓盐间接计数，来测定透过聚碳酸酯膜的细胞迁移作用(ScudieroD．A．等人，1988，《癌症研究》48，4827-4833)。将化学引诱物加入96孔微量滴定平板中，该平板形成下部孔的趋化室，按照制造商的说明用无PVP的5μm孔径聚碳酸酯粘着构架滤膜(NeuroProbeMB系列，CabinJohn，MD20818，USA)固定。将化学引诱物适当地稀释在合成细胞培养基RPMI1640(Gibco)中或补加2mM谷酰胺和0．5％BSA的该培养基中，或采用另外含有Ca2+和Mg2+、无酚红(Gibco)加0．1％BSA的HBSS的该培养基中。将各稀释液在真空下脱气30分钟和置于(400μl)趋化室的下部孔中，令THP-1细胞(5×105在100μlRPMI1640+0．5％BSA)在趋化室上部的各孔内温育。为了抑制趋化，化学引诱物应恒定保持在预先对各个趋化因子测出的次最大浓度(对于MCP-1为1nM，对于RANTES是2nM)，并且与不同浓度的溶于DMSO(最终的DMSO浓度＜0．05％v／v)中的试验化合物一起加入到下部孔中。将趋化室在37℃和5％CO2下温育2小时。从上部孔除去培养基，随后用200μl生理盐水冲洗，此后打开趋化室，吹干膜表面，在600g下将96孔平板离心5分钟，收集细胞。抽吸上清液(150μl)并且向孔内加入10μl细胞增殖试剂，WST-1，{4-[3-(4-碘苯基)-2-(4-硝基苯基)-2H-5-四唑并]-1，3-苯基二磺酸盐}加电子耦合剂(BoehringerMannheim，Cat．no．1644807)。将平板在37℃下温育3小时，在450nm下在微量滴定平板读取器上读取可溶性甲替产物的吸光度。将数据输入电子制表软件，修正化学引诱物不存在时的任何随机迁移，计算出平均吸光度值、平均标准误差和显著性试验。hMCP-1诱导的浓度依赖性细胞迁移具有特征双相性反应，最大值为0．5-1．0nm。在上述试验的其他形式中，可以采用荧光标记细胞，以便有助于终点检测。在这种情况中，所用THP-1细胞通过在5mMCalceinAM(甘氨酸，N，N’-[[3’，6’-双(乙酰氧基)-3-氧代螺[异苯并呋喃-1(3H)，9’-[9H]氧杂蒽]-2’，7’-二基]双(亚甲基)双[N-[2-[(乙酰氧基)甲氧基]2-氧代乙基]]-双[(乙酰氧基)甲基]酯；分子探针)存在下、在无光条件下温育45分钟来荧光标记。通过离心收集细胞和再悬浮在含有Ca2+、Mg2+和0．1％BSA的HBSS(无酚红)中。将50ml(2×105细胞)的细胞悬浮液置于位于各孔上方的滤膜上，将上述单元在37℃和5％CO2下温育2小时。温育结束时，用磷酸盐缓冲的盐水洗去位于滤膜上表面的细胞，取下平板上的滤膜，在波长485nm激发光，在538nm的发射光(fmax，MolecularDevices)下通过读取荧光来确定吸附在滤膜下侧或细胞孔内的细胞的数量。将数据输入电子制表软件，修正化学引诱物不存在时的任何随机迁移，计算出平均吸光度值、平均标准误差、百分抑制率、试验化合物的IC50和显著性试验。例如，利用这种方法，表Ⅰ中的化合物20在hMCP-1趋化试验中的IC50是1．66μM，和表1中的化合物8在RANTES试验中表现出2．66μM的IC50。在本发明的试验化合物的有效剂量下没有观察到生理不可接受的毒性。实施例17药物组合物本实施例举例说明但不限制用于人体治疗或预防用途的本发明有代表性的药物剂型(活性组分称作“化合物Ⅹ”)实施例A(a)<tablesid="table1"num="001"><table>片剂Ⅰmg／片化合物Ⅹ100乳糖欧洲药典182．75交联羧甲基纤维素(Croscarmellose)钠12．0玉米淀粉糊(5％w／v糊)2．25硬脂酸镁3．0</table></tables>(b)<tablesid="table2"num="002"><table>片剂Ⅱmg／片化合物Ⅹ50乳糖欧洲药典223．75交联羧甲基纤维素钠6．0玉米淀粉糊15．0聚乙烯吡咯烷酮(5％w／v糊)2．25硬脂酸镁3．0</table></tables>(c)<tablesid="table3"num="003"><table>片剂Ⅲmg／片化合物Ⅹ1．0乳糖欧洲药典93．25交联羧甲基纤维素钠4．0玉米淀粉糊(5％w／v糊)0．75硬脂酸镁1．0</table></tables>(d)<tablesid="table4"num="004"><table>胶囊mg／囊化合物Ⅹ10乳糖欧洲药典488．5镁1．5</table></tables>(e)<tablesid="table5"num="005"><table>注射剂Ⅰ(50mg／ml)化合物Ⅹ5．0％w／v1M氢氧化钠溶液15．O％v／vO．1M盐酸调至pH7．6聚乙二醇4004．5％w／v注射用水至100％</table></tables>(f)<tablesid="table6"num="006"><table>注射剂Ⅱ(10mg／ml)化合物Ⅹ1．0％w／v磷酸钠BP3．6％W／v0．1M氢氧化钠溶液15．0％v／v注射用水至100％</table></tables>(g)<tablesid="table7"num="007"><table>注射剂Ⅲ(1mg／ml，缓冲至pH6)化合物ⅩO．1％w／v磷酸钠BP2．26％W／v柠檬酸Q．38％w／v聚乙二醇4003．5％w／v注射用水至100％</table></tables>(h)<tablesid="table8"num="008"><table>气溶胶Ⅰmg／ml化合物Ⅹ10．0脱水山梨糖醇三油酸酯13．5三氯氟甲烷910．0二氯二氟甲烷490．0</table></tables>(i)<tablesid="table9"num="009"><table>气溶胶Ⅱmg／ml化合物Ⅹ0．2脱水山梨糖醇三油酸酯0．27三氯氟甲烷70．0二氯二氟甲烷280．0二氯四氟乙烷1094．0</table></tables>(j)<tablesid="table10"num="010"><table>气溶胶Ⅲmg／ml化合物ⅹ2．5脱水山梨糖醇三油酸酯3．38三氯氟甲烷67．5二氯二氟甲烷1086．0二氯四氟乙烷191．6</table></tables>(k)<tablesid="table11"num="011"><table>气溶胶Ⅳmg／ml化合物Ⅹ2．5大豆卵磷脂2．7三氯氟甲烷67．5二氯二氟甲烷1086．0二氯四氟甲烷191．6</table></tables>(l)<tablesid="table12"num="012"><table>软膏Ⅰml化合物Ⅹ40mg乙醇300μl水300μl1-十二烷基氮杂环庚-2-酮50μl聚乙二醇至1ml</table></tables>注释上述制剂中的化合物Ⅹ可以含有上述1-15举例说明的化合物，例如实施例12-15的化合物。上述制剂可以通过药学领域熟知的常规方法得到。片剂(a)-(c)可以通过常规方式肠溶包衣，例如用邻苯二甲酸乙酸纤维素的包衣。气溶胶制剂(h)-(k)可以与标准、剂量给药的气溶胶分配器结合使用，并且助悬剂脱水山梨糖醇三油酸酯和大豆卵磷脂可以用其它助悬剂如脱水山梨糖醇单油酸酯、脱水山梨糖醇倍半油酸酯、吐温80、聚甘油油酸酯或油酸来代替。权利要求1．含有式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受盐或其酰胺的酯以及药学上可接受载体的药物组合物所述化合物是单核细胞趋化蛋白-1的抑制剂和其中A和B一起构成含有至少一个杂原子的任选取代的5元芳香环；X是CH2或SO2；R1是任选取代芳基或杂芳基环；R2是羧基、氰基、-C(O)CH2OH、-CONHR4、-SO2NHR5、四唑-5-基、SO3H或式(Ⅵ)的基团其中R4选自氢、烷基、芳基、氰基、羟基、-SO2R9，其中R9是烷基、芳基、杂芳基或卤烷基，或R4是基团-(CHR10)r-COOH，其中r是1-3的整数和各个R10分别选自氢或烷基；R5是烷基、任选取代芳基，例如任选取代苯基或任选取代杂芳基如5或6元杂芳基，或基团COR6，其中R6是氢、烷基、芳基、杂芳基或卤烷基；R7和R8分别选自氢或烷基，特别是C1-4烷基；和R3是氢、官能团、任选取代烷基、任选取代链烯基、任选取代炔基、任选取代芳基、任选取代杂环基、任选取代烷氧基、任选取代芳烷基、任选取代芳烷基氧基、任选取代环烷基。2．根据权利要求1所述的组合物，其中A和B与它们所连接的碳原子一起形成任一次级式的5元杂芳基环其中R13、R14和R15分别选自氢或取代基团。3．根据权利要求1或2所述的组合物，其中R1是卤素取代的苯基或吡啶基。4．根据上述权利要求任一项所述的组合物，其中在式(Ⅰ)的化合物中，R2是羧基或其药学上可接受的盐或酯。5．根据上述权利要求任一项所述的组合物，其中R3是氢、C1-4烷基或三氟甲基。6．根据上述权利要求任一项所述的组合物，其中式(Ⅰ)的化合物是式(ⅠA)或(ⅠB)的化合物或其药学上可接受的盐、酰胺的酯，其中R1如权利要求1的定义，R26是氢或C1-4烷基，和在式(ⅠA)中(ⅰ)R24是硫和R25是CH；或(ⅱ)R24是硫和R25是氮；或(ⅲ)R24是氧和R25是CH；或(ⅳ)R24是NCH3和R25是CH；和在式(IB)中(ⅰ)R24’是CH和R25’是硫；或(ⅱ)R24’是CH和R25’是氧；或(ⅲ)R24’是氮和R25’是硫。7．根据权利要求6所述的组合物，其中式(ⅠA)的化合物是其中R1是卤素取代苯基，和R26是氢或甲基，R24是硫和R25是CH或氮的化合物；或R24是氧，R25是CH，和R26是氢或甲基的化合物；或该化合物是其中R1是卤代取代苯基，R25’是硫，R26是氢和R24’是CH或氮的式(ⅠB)化合物。8．定义如上的式(Ⅰ)化合物或其盐、酯或酰胺，该化合物是单核细胞趋化蛋白-1的抑制剂；但满足下列条件a)其中A-B形成上述次级式(ⅰ)或(ⅳ)的基团时，R1不是苯基、氨基苯基或硝基苯基；和b)其中A-B形成上述次级式(ⅲ)的基团时，R13是甲基和R15是氢，R14不是CHO；c)其中A-B形成上述次级式(ⅴ)的基团和X是SO2时，R1不是未取代苯基。9．根据权利要求8所述的化合物，其中式(Ⅰ)的化合物是如权利要求6定义的式(ⅠA)或(ⅠB)的化合物。10．一种用于制备权利要求8中定义的式(Ⅰ)化合物的方法，该方法包括将式(Ⅶ)的化合物其中A、B和R3如式(Ⅰ)的有关定义和R27是氢或权利要求1定义的基团R2；与式(Ⅷ)的化合物反应R1-X-ZⅧ其中R1和X如式(Ⅰ)的有关定义和Z是离去基团；和此后如果希望或需要，将R27转化为基团R2和／或转化为不同于该基团的基团；和／或向A-B环引入或改变取代基。全文摘要本发明涉及含有式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受盐或酰胺酯以及药学上可接受载体的药物组合物,该化合物是单核细胞趋化蛋白－1的抑制剂和其中A和B一起形成任选取代含有至少一个杂原子的5元芳香环;X是CH文档编号A61P1/00GK1291094SQ9980300公开日2001年4月11日申请日期1999年2月2日优先权日1998年2月17日发明者A·J·巴克尔,J·G·克特勒,A·W·福尔申请人:阿斯特拉曾尼卡英国有限公司