专利名称：盐酸洛拉曲克的脂质体制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及盐酸洛拉曲克的脂质体制剂及其制备方法。
背景技术：
洛拉曲克是一种胸苷酸合成酶(Thymidylate Synthase，TS)抑制剂。其化学名为2-氨基-6-甲基-5-(4-吡啶巯基)-4(1H)-喹唑啉酮。临床应用的洛拉曲克为其二盐酸盐化合物。洛拉曲克最早由美国Agouron公司基于TS的晶体结构，运用计算机辅助药物设计技术而设计和开发出来的一种全新结构的抗肿瘤药物。其主要用于治疗肝癌、结肠直肠癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌和头颈部肿瘤。其中用于肝癌治疗已处于III期研究阶段。
盐酸洛拉曲克的可以通过静脉注射和口服的方式给药。在临床试验中出现的主要不良反应是输注部位肤色苍白，有水肿发生，出现化疗药物常见的恶心、呕吐等消化道症状，在极限剂量时(病例II级毒性限制剂量)可能发生中性粒细胞减少、血小板减少、骨髓抑制等造血系统损害。另外，粘膜炎、皮肤潮红、丘疹也较常见。与其它胸苷酸合成酶抑制剂不同的是，盐酸洛拉曲克引起的不良反应恢复快。
但是，对于治疗不能切除或已转移肝癌患者的用药方案为每21日连续5日24小时静脉输注洛拉曲克二盐酸盐1000mg/m2/日)。该用药方案给盐酸洛拉曲克的临床应用带来诸多不便。
如果能将其制成脂质体制剂，既可以解决连续静脉注射带来的麻烦，还能够因脂质体的靶向作用提高其治疗指数。
脂质体是将磷脂分散在水中自然形成一种具有类似生物膜结构的双分子层小囊。其可分为多室脂质体和单室脂质体。单室脂质体又分为小单室脂质体和大单室脂质体。目前用作药物载体的脂质体多为大单室脂质体，粒径一般位于100-1000纳米之间。将脂质体用于药物载体的主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，延长药物在血管中的浓度，从而捉高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

发明内容
本发明的目的是将盐酸洛拉曲克制成脂质体制剂，以提高其对肿瘤的治疗效果，特别是肝癌的治疗效果。
本发明提供了一种盐酸洛拉曲克的脂质体组合物，其含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，和5-20重量份的胆固醇。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的盐酸洛拉曲克的脂质体组合物含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，5-20重量份的胆固醇，0.02-0.045重量份的维生素E，30-100重量份的柠檬酸，30-100重量份的柠檬酸钠，40-180重量份的无水碳酸钠，和300-1000重量份的甘露醇。
在本发明的一个实施方案中，其中所述脂质体为冻干的形式。
本发明还提供了盐酸洛拉曲克脂质体组合物的制备方法，包括以下步骤1)将磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿-甲醇混合溶剂中，减压除去有机溶剂，形成脂质薄膜；2)将脂质薄膜在柠檬酸缓冲溶液中水化，得到空白脂质体悬浮液；3)用高压均质器将脂质体的粒径控制在50-300nm之间，调节PH值至7.1-7.8；4)将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加入甘露醇，与脂质体混悬液混合，在50-60℃下振摇；5)采用脂质体分散液洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH5-7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液；6)用微孔膜过滤除菌；7)任选地将脂质体溶液冻干。
本发明还提供了一种胶囊制剂，包含盐酸洛拉曲克脂质体组合物。
本发明还提供了一种胶囊制剂，包含10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-80重量份的淀粉，1-5重量份的羧甲基纤维素，和硬脂酸镁。
本发明还提供了一种胶囊制剂，包含盐酸洛拉曲克脂质体组合物。
本发明还提供了一种冻干粉针制剂，包含1重量份的盐酸洛拉曲克和0.2-2重量份的甘露醇。
本发明的冻干粉针从大量的填充和冻干保护剂中优选出甘露醇作为该制剂的填充和冻干保护剂，获得了外形和溶解性均满意的制品。
本发明的制剂还含有辅料、填充和冻干保护剂等。辅料选自稀释剂如淀粉、糊精等，粘合剂如羧甲基纤维素、润滑剂如硬脂酸镁和滑石粉；填充和冻干保护剂如海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖等。
在本发明的制剂中，胶囊中主药和辅料的用量范围为盐酸洛拉曲克辅料1∶2～8(重量比)；冻干粉针中盐酸洛拉曲克辅料的比例为1∶0.02～0.2。
按照本发明的一个优选实施方案，脂质体冻干粉配方为盐酸洛拉曲克 10g-20g大豆卵磷脂20-40g二棕榈酰甘油磷脂(DPPG)2-5g胆固醇5-20g维生素E 20-45mg柠檬酸30-100g柠檬酸钠 30-100g无水碳酸钠40-180g甘露醇300-1000g注射用水 1500-3000ml优选地，盐酸洛拉曲克的脂质体制剂的制备方法包含下列步骤1)根据配方组成选用磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿—甲醇混合溶剂中，在旋转蒸发仪上减压除去有机溶剂，形成脂质薄膜。
2)按照处方配制0.3M的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。
3)水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，控制在50-300nm。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.1-7.8。
4)将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加入配方量的甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温10min.。
5)采用脂质体分散液洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH5-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。
6)用注射用水定容，将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
本发明的脂质体制剂因其靶向和缓释作用，既可以解决连续静脉注射带来的麻烦，还能够提高其治疗指数。
具体实施例方式
实施例1胶囊配方一(每粒含盐酸洛拉曲克50mg)盐酸洛拉曲克 10g淀粉 40g羧甲基纤维素 2.5g硬脂酸镁 250mg制备方法将盐酸洛拉曲克10g，加如淀粉40g，分别过120目筛，混合均匀。加8％的淀粉浆将混合粉剂制成软材，过20目尼龙筛，制粒，60℃以下干燥。加2.5g羧甲基纤维素和250mg的硬脂酸镁，过20目筛整粒均匀，装胶囊。每粒重量250mg。
实施例2胶囊配方二(每粒含盐酸洛拉曲克200mg)盐酸洛拉曲克 20g淀粉 20g羧甲基纤维素 1g硬脂酸镁 100mg制备方法将盐酸洛拉曲克20g，加如淀粉20g，分别过120目筛，混合均匀。加8％的淀粉浆将混合粉剂制成软材，过20目尼龙筛，制粒，60℃以下干燥。加1g羧甲基纤维素和100mg的硬脂酸镁，过20目筛整粒均匀，装胶囊。每粒重量400mg。
实施例3冻干粉配方一盐酸洛拉曲克 10g甘露醇 0.5g注射用水 200ml制备方法将盐酸洛拉曲克10g与0.5g甘露醇，加入到置有120ml注射用水的烧杯内搅拌溶解，加入0.1％活性炭脱色处理后补加注射用水定容后用0.22μm微孔滤膜正压除菌，分装冷冻干燥。
实施例4冻干粉配方二盐酸洛拉曲克 10g甘露醇 1g注射用水 200ml
制备方法将盐酸洛拉曲克10g与1g甘露醇，加入到置有120ml注射用水的烧杯内搅拌溶解，加入0.1％活性炭脱色处理后补加注射用水定容后用0.22μm微孔滤膜正压除菌，分装冷冻干燥。
实施例5冻干粉配方三盐酸洛拉曲克10g甘露醇 1.5g注射用水200ml制备方法将盐酸洛拉曲克10g与1.5g甘露醇，加入到置有120ml注射用水的烧杯内搅拌溶解，加入0.1％活性炭脱色处理后补加注射用水定容后用0.22μm微孔滤膜正压除菌，分装冷冻干燥。
实施例6脂质体冻干粉配方一盐酸洛拉曲克10g大豆卵磷脂 30g二棕榈酰甘油磷脂(DPPG) 3g胆固醇 10g维生素E 33mg柠檬酸 75g柠檬酸钠61.5g无水碳酸钠 45g甘露醇 400g注射用水2000ml
制备方法1.称取配方中的磷脂、胆固醇和维生素E溶于1000ml的氯仿中，在旋转蒸发仪上减压除去氯仿，形成脂质薄膜。
2.配制0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，并用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。
3.水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，使脂质体粒径为100±10mn。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.5。
4.将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加入20％甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温15min。
5.采用20％的甘露醇作为脂质体分散液来洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH6-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。
6.将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后，用注射用水定容，使盐酸洛拉曲克的浓度为6mg/ml，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例7脂质体冻干粉配方二盐酸洛拉曲克10g大豆卵磷脂 30g二棕榈酰甘油磷脂(DPPG) 3g胆固醇 10g维生素E 33mg柠檬酸 75g柠檬酸钠61.5g无水碳酸钠 45g甘露醇 400g注射用水2000rnl
制备方法1.称取配方中的磷脂、胆固醇和维生素E溶于1000ml的氯仿-甲醇(体积比2∶1)中，在旋转蒸发仪上减压除去氯仿，形成脂质薄膜。
2.配制0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，并用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。
3.水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，使脂质体粒径为150±10nm。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.5。
4.将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加15％甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温15min。
5.采用15％的甘露醇作为脂质体分散液来洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH6-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。
6.将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后，用注射用水定容，使盐酸洛拉曲克的浓度为6mg/ml，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
实施例8脂质体冻干粉配方三盐酸洛拉曲克10g氢化大豆卵磷脂 30g二硬脂酰甘油磷脂(DSPG) 6g胆固醇 10g维生素E 20mg柠檬酸 75g柠檬酸钠61.5g无水碳酸钠 45g甘露醇 400g注射用水2000ml
制备方法1.称取配方中的磷脂、胆固醇和维生素E溶于1000ml的氯仿中，在旋转蒸发仪上减压除去氯仿，形成脂质薄膜。
2.配制0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH为4.0)，并用该溶液来水化脂质薄膜，得空白脂质体悬浮液。
3.水化完全后，用高压均质器制备脂质体至所需粒径和均匀度，使脂质体粒径为110±20nm。加入碳酸钠溶液，调节水化后的脂质体悬浮液的PH值至7.5。
4.将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加热到50℃后加入15％甘露醇。完全溶解后与脂质体混悬液混合，50-60℃下振摇、搅拌、保温15min。
5.采用15％的甘露醇作为脂质体分散液来洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH6-pH7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液。
6.将盐酸洛拉曲克脂质体悬浮液用微孔膜过滤除菌后，用注射用水定容，使盐酸洛拉曲克的浓度为6mg/ml，分装即得成品，成品可在2℃-8℃下保存或冻干保存至使用。
效果实施例1对不同辅料盐酸洛拉曲克冻干粉针性状进行了比较，结果如下表1 不同辅料盐酸洛拉曲克冻干粉针性状比较

效果实施例2在荷S180实体瘤小鼠中对盐酸洛拉曲克冻干粉针和脂质体的药效学参数进行比较实验方法荷S180实体瘤小鼠尾静脉注射给药，剂量为80mg/kg，采用HPLC紫外检测方法测定盐酸洛拉曲克在生物样品中的浓度。结果如表2所示。
表2 盐酸洛拉曲克冻干粉针和脂质体的药效学参数比较

结果表明，盐酸洛拉曲克脂质体延长了药物在体内保持的时间，使药物在肝脏和肿瘤组织中的浓度增大，从而提高了治疗指数。
权利要求
1.一种盐酸洛拉曲克的脂质体组合物，其含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，和5-20重量份的胆固醇。
2.根据权利要求1的组合物，其含有10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-40重量份的大豆卵磷脂，2-5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，5-20重量份的胆固醇，0.02-0.045重量份的维生素E，30-100重量份的柠檬酸，30-100重量份的柠檬酸钠，40-180重量份的无水碳酸钠，和300-1000重量份的甘露醇。
3.根据权利要求1的组合物，其中所述脂质体为冻干的形式。
4.权利要求1-3中任何一项的脂质体组合物的制备方法，包括以下步骤1)将磷脂、胆固醇和维生素E溶于氯仿或氯仿-甲醇混合溶剂中，减压除去有机溶剂，形成脂质薄膜；2)将脂质薄膜在柠檬酸缓冲溶液中水化，得到空白脂质体悬浮液；3)用高压均质器将脂质体的粒径控制在50-300nm之间，调节PH值至7.1-7.8；4)将盐酸洛拉曲克溶于注射用水，加入甘露醇，与脂质体混悬液混合，在50-60℃下振摇；5)采用脂质体分散液洗涤盐酸洛拉曲克的脂质体，利用渗析过滤法使脂质体外溶液置换为pH5-7的脂质体分散液，得盐酸洛拉曲克脂质体混悬液；6)用微孔膜过滤除菌；7)任选地将脂质体溶液冻干。
5.一种胶囊制剂，包含权利要求1-3中任何一项的脂质体组合物。
6.一种胶囊制剂，包含10-20重量份的盐酸洛拉曲克，20-80重量份的淀粉，1-5重量份的羧甲基纤维素，和硬脂酸镁。
7.一种冻干粉针制剂，包含权利要求1-3中任何一项的脂质体组合物。
8.一种冻干粉针制剂，包含1重量份的盐酸洛拉曲克和0.2-2重量份的甘露醇。
全文摘要
本发明提供了一种盐酸洛拉曲克的脂质体组合物，其含有10－20重量份的盐酸洛拉曲克，20－40重量份的大豆卵磷脂，2－5重量份的二棕榈酰甘油磷脂，和5－20重量份的胆固醇。盐酸洛拉曲克脂质体延长了药物在体内保持的时间，使药物在肝脏和肿瘤组织中的浓度增大，从而提高了治疗指数。
文档编号A61P35/00GK1765364SQ20051008552
公开日2006年5月3日 申请日期2005年7月26日 优先权日2005年7月26日
发明者王锡娟 申请人:康辰医药发展有限公司