专利名称：沙培林菌体灭活工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种沙培林菌体灭活工艺，用于沙培林菌体灭活，不使用青霉素。
背景技术：
随着科学技术的进步，人们的生活水平和对药品质量的要求越来越高，利用现在的科学技术，采用先进的工艺生产高效、优质的药品已成为制药企业发展的必然选择。沙培林菌体灭活一般采用青霉素灭活工艺，由于工艺的限制，加入的青霉素有些残存在药品中，而且残存的量远超过人体的过敏量，因此临床使用时必须做过敏试验，给临床医生和病人使用带来很大的麻烦和安全隐患，对于极少数的极易过敏人员甚至会带来生命危险。通常使用青霉素灭活沙培林菌液工艺，存在高致敏、高风险、毒性大、使用不便、易交叉污染的缺 陷。

发明内容
本发明的目的是提供一种沙培林菌体灭活工艺，解决使用青霉素灭活沙培林菌液工艺高致敏、高风险、毒性大、使用不便、易交叉污染的缺陷。本发明的目的是以如下方式实现的按Ig沙培林菌体对应IOml浓度为3g/100ml的双氧水的量，将沙培林菌体悬浮于双氧水中，置0-5°C温度下冰浴30分钟；然后过滤菌体，用浓度为0. 9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，每次洗涤需用的氯化钠注射液按体积量与前一步双氧水相同；收集菌体，再悬浮于浓度为0. 2g/100ml的新洁尔灭水溶液中，新洁尔灭溶液按体积量与双氧水相同，置于37°C水浴处理20分钟，再于45°C处理30分钟；再次过滤菌体，再用浓度为0. 9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，氯化钠注射液的取用量与前次洗涤用量相同，收集菌体加入到2. 5倍双氧水体积用量的BBM保护液中，然后用超声波处理8-10分钟完成菌体灭活，灭活工艺结束；其中，BBM保护液按每Ig麦芽糖加入98ml注射用水溶解后，依次加入 20g /IOOml 的 KH2PO4 (pH7. 0)水溶液 9ml、2g /IOOml 的 MgSO4. 7H20水溶液18ml的比例配料混合后，经两级0. 22 y m滤器无菌过滤获得，不同量BBM保护液的获得按以上各成分的配比投量生产。灭活过程均在洁净度A级下无菌操作，所用水均为注射用水，所用物料与器具均经过灭菌处理。本发明工艺中不使用青霉素，彻底解决因青霉素带来的过敏问题，保证用药的安全，方便易操作实现对沙培林药品生产过程的菌液灭活处理，使用的双氧水、新洁尔灭廉价易得、无高致敏性、无交叉污染，超声波物理灭活环保。
具体实施例方式将20 g沙培林菌体，悬浮于200ml浓度为3g/100ml的双氧水中，置0_5°C温度下冰浴中30分钟；然后过滤菌体，用浓度为0. 9g/100ml氯化钠注射液各200ml洗涤3次，收集菌体，再悬浮于200ml浓度为0. 2g/100ml的新洁尔灭水溶液中，置于37°C水浴处理20分钟，再于45°C处理30分钟；再次过滤菌体，再用浓度为0. 9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，每次200ml，收集菌体加入到500ml BBM保护液中；再用超声波处理8_10分钟完成，超声波功率100-150W ;频率40-80KHz ;其中，BBM保护液按每Ig麦芽糖加入98ml注射用水溶解后 ，依次加入20g /IOOml 的KH2PO4(pH7. 0)水溶液9ml、2g /IOOml 的MgSO4. 7H20水溶液 18ml的比例配料混合后，经两级0. 22 y m滤器无菌过滤获得。例如4g麦芽糖加入392ml注射用水溶解后，依次加入 20g /IOOml 的 KH2PO4 (pH7. 0)水溶液 36ml、2g /IOOml 的 MgSO4. IW2Q水溶液72ml的比例配料混合后，经两级0. 22 ii m滤器无菌过滤后，基本可以获得500ml BBM保护液。
权利要求
1.一种沙培林菌体灭活工艺，其特征在于按Ig沙培林菌体对应IOml浓度为3g/100ml的双氧水的量，将沙培林菌体悬浮于双氧水中，置0-5°C温度下冰浴30分钟；然后过滤菌体，用浓度为0. 9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，每次洗涤需用的氯化钠注射液按体积量与前一步双氧水相同；收集菌体，再悬浮于浓度为0. 2g/100ml的新洁尔灭水溶液中，新洁尔灭溶液按体积量与双氧水相同，置于37°C水浴处理20分钟，再于45°C处理30分钟；再次过滤菌体，再用浓度为0. 9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，氯化钠注射液的取用量与前次洗涤用量相同，收集菌体加入到2. 5倍双氧水体积用量的BBM保护液中，然后用超声波处理8-10分钟完成菌体灭活，灭活工艺结束；其中，BBM保护液按每Ig麦芽糖加入98ml注射用水溶解后，依次加入20g /IOOml的KH2PO4(pH7. 0)水溶液9ml、2g /IOOml的MgSO4. 7H20水溶液18ml的比例配料混合后，经两级0. 22 y m滤器无菌过滤获得，不同量BBM保护液的获得按以上各成分的配比投量生产。
2.根据权利要求I所述的沙培林菌体灭活工艺，其特征在于灭活过程均在洁净度A级下无菌操作，所用水均为注射用水，所用物料与器具均经过灭菌处理。
全文摘要
一种沙培林菌体灭活工艺，按1g沙培林菌体对应10ml浓度为3g/100ml的双氧水的量，将沙培林菌体悬浮于双氧水中，置0-5℃温度下冰浴30分钟；然后过滤菌体，用浓度为0.9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，每次洗涤需用的氯化钠注射液按体积量与前一步双氧水相同；收集菌体，再悬浮于浓度为0.2g/100ml的新洁尔灭水溶液中，新洁尔灭水溶液按体积量与双氧水相同，置于37℃水浴处理20分钟，再于45℃处理30分钟；再次过滤菌体，再用浓度为0.9g/100ml氯化钠注射液洗涤3次，收集菌体加入到2.5倍双氧水体积用量的BBM保护液中，然后用超声波处理8-10分钟完成灭活工艺。本发明工艺中不使用青霉素，彻底解决因青霉素带来的过敏问题，保证用药的安全，方便易操作实现对沙培林药品生产过程的菌液灭活处理，使用的双氧水、新洁尔灭廉价易得、无高致敏性、无交叉污染，超声波物理灭活环保。
文档编号A61K35/74GK102670665SQ201210159488
公开日2012年9月19日 申请日期2012年5月22日 优先权日2012年5月22日
发明者宋昭震, 张守洋, 李坤山, 王冬荣, 王成华 申请人:山东鲁亚制药有限公司