专利名称：：一种白芍总苷的新用途及其药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种白芍总苷的新用途及其药物组合物。属于药物领域。
背景技术：
：肠易激综合征(IrritableBowelSyndrome,IBS)最早于1820年由Powell报道，属于胃肠功能紊乱性疾病，指一组包括腹痛、腹胀、排便习惯和大便性状异常，持续存在或间歇发作，而无形态学和生化异常改变的症候群，是临床上最为常见的功能性胃肠病之一。目前IBS诊断主要以症状学为依据并建立在排除器质性疾病的基础上。近年来许多研究显示胃肠动力障碍和内脏感觉异常是本病症状的主要病理生理基础，而其发病明显受到心理社会因素的影响。各地研究报道显示IBS是一种世界范围内的常见病、多发病，其发病率相当高。根据流行病学调查，西方国家的人群患病率约9%_22%，以女性较男性多见，比例约21-31。在我国所进行的调查显示，北京地区IBS的人群患病率是(罗马标准)-7%(Manning标准)，广东地区用罗马Π标准调查的IBS人群患病率为5.67%，中国人群患病率估计在20%。IBS的病因与发病机制尚未完全清楚，尽管人们不断提出各种假说试图阐明其发病机制及病理生理，但都不能以一种单一的发病机制来完全解释所有IBS的临床表现，而且各种可能的发病机制间又有着相互的联系。其发病机制包括动力异常、内脏感觉异常、脑-肠轴异常、炎症、内分泌异常、神经-免疫-内分泌网络调控异常及心理社会因素等。由于临床上IBS的病因病机以肝郁脾虚型最为常见，因此多数医家在治疗腹泻型IBS时均采用疏肝健脾法为基础随证加减。常用的基础方主要有四逆散、痛泻要方、柴胡疏肝散、参苓白术散、逍遥散、芍药甘草汤等。目前对芍药甘草汤的某些有效部位进行了研究，例如，专利号02156681.x，该专利中公开了芍药甘草提取物可用于神经、肌肉和内脏的急慢性挛急疼痛的解痉止痛和养血护肝、解毒止痛，降酶退黄，治疗急慢性病毒肝炎。芍药甘草提取物中，白芍总苷、甘草三萜酸和甘草总黄酮的总含量大于50%；通过其实施例1、2可知，该提取物中含有白芍提取物约为32-35%，该白芍提取物中含有白芍总苷50%以上。其中，该专利还公开了白芍总苷、甘草三萜酸的制备方法，其中，白芍总苷的制备方法为将白芍用40-80%乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加蒸馏水，去除沉淀，滤液上大孔树脂，先用水洗，再用20-95%乙醇洗脱，所得提取物中，白芍总苷含量高于50%。专利申请号200610144333.7，该申请使用了前述专利(02156681.χ)中的芍药甘草提取物，通过药理学试验证明，芍药甘草提取物可用于制备治疗肠易激综合征的药物。该专利中还指出，芍药甘草提取物给药200mg/Kg时才具有显著的药效，将其换算成人用剂量为22.20mg/kg，即1.33g/人；结合专利号:02156681.χ中的相关内容可以推知，200mg的芍药甘草提取物中含有白芍提取物约64-70mg，将其换算为成人用计量为7.1-7.8mg/Kg,即0.43-0.47g/人。白芍为芍药甘草汤的组成药物之一，为毛茛科植物芍药I^aeonialactifloraPall.的根，具有养血敛阴、平抑肝阳的功效，它主要含有单萜苷类化合物、三萜类化合物以及鞣质等。其中，单萜苷类化合物主要有芍药苷、白芍苷、氧化芍药苷和苯甲酰芍药苷等。目前，还未见将白芍总苷用于治疗肠易激综合征的报道。
发明内容乐盈VI本发明的目的在于提供一种白芍总苷的新用途。本发明的另一目的在于提供一种药物组合物及其用途。本发明提供了白芍总苷在制备治疗肠易激综合征的药物中的用途。进一步地，所述药物是治疗内脏高敏感性肠易激综合征的药物。、进一步地，所述药物是治疗腹痛、结肠功能紊乱的药物。其中，所述白芍总苷中，单萜苷类成分的含量以苯甲酸计不得低于50%W/W。进一步地，所述白芍总苷是由如下方法制备得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，滤液浓缩至无醇味后，加水溶解，取上清液备用；B、将步骤A所得上清液通过大孔吸附树脂柱，先以水洗至无molish反应，再用50-70%V/V乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，即得白芍总苷。更进一步地，步骤A中，乙醇浓度为70%V/V；步骤B中，采用非极性或中极性的大孔吸附树脂柱，以60%V/V乙醇洗脱。进一步优选地，步骤B中，采用AB-8型大孔吸附树脂柱。其中，所述药物是以白芍总苷为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂；其中，每日用制剂中有效成分的含量以白芍总苷计为0.25g/人。本发明还提供了一种治疗肠易激综合征的药物组合物，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂白芍总苷1-3份、甘草总皂苷1-3份。进一步地，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂白芍总苷1份、甘草总皂苷1份。其中，所述白芍总苷中，单萜苷类成分的含量以苯甲酸计不得低于50%W/W;所述甘草总皂苷中，含有皂苷的含量以甘草酸单铵盐计不得低于50%W/W。进一步地，所述白芍总苷是由如下方法制备得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，滤液浓缩至无醇味后，加水溶解，取上清液备用；B、将步骤A所得上清液通过大孔吸附树脂柱，先以水洗至无molish反应，再用50-70%V/V乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，即得白芍总苷；所述甘草总皂苷是由如下方法制备得到的(1)取甘草粗粉，先用80-95%V/V乙醇提取，提取液回收乙醇后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇萃取液备用；(2)步骤(1)的药渣再用10-30%V/V乙醇提取，所得的提取液回收乙醇后，用正丁醇萃取，所得萃取液与步骤(1)所得正丁醇萃取液合并，回收正丁醇后，加水溶解，将上清液过大孔吸附树脂柱，先用水洗至无molish反应后，再用30-50%V/V乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，即得甘草总皂苷。进一步地，步骤A中，乙醇浓度为70%V/V；步骤B中，采用非极性或中极性的大孔吸附树脂柱，以60%V/V乙醇洗脱；步骤(1)中，选用95%V/V乙醇进行提取；步骤O)中，用20%V/V乙醇提取，再选用非极性或中极性大孔吸附树脂，以40%V/V乙醇洗脱。进一步优选地，步骤B中，采用AB-8型大孔吸附树脂柱；步骤(3)中，选用DlOl型大孔吸附树脂。其中，所述药物组合物是以白芍总苷甘草总皂苷=11为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂；其中，每日用制剂中有效成分的含量以白芍总苷和甘草总皂苷的总质量计为0.28g/人。本发明还提供了上述药物组合物在制备治疗肠易激综合征的药物中的用途。进一步地，所述药物是治疗内脏高敏感性肠易激综合征的药物。、进一步地，所述药物是治疗腹痛、结肠功能紊乱的药物。白芍总苷、以及它与甘草总皂苷的混合物，可通过改善肠敏感性，降低结肠频率、峰电位、峰峰值及峰面积，降低血浆中升高的CCK含量，升高血清中降低的GAS含量，显著升高患者低水平的血清DA含量及降低结肠中增多的肥大细胞数，从而在对肠易激综合征的治疗中发挥显著疗效。同时，将白芍总苷和甘草总皂苷混合使用后，仅在低剂量下就能发挥显著药效，能够用于肠易激综合征的治疗。白芍总苷、以及它和甘草总皂苷的混合物，能够抑制肠易激综合征所致的腹痛，改善结肠功能紊乱的现象，为临床用药提供了一种新的选择。以下通过具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。具体实施例方式实施例1白芍总苷的制备取白芍粗粉，以70%V/V乙醇为提取溶媒，溶媒用量为8倍量w/v，回流提取1.5h，共提取3次。过滤，合并滤液，减压浓缩至无醇味，加适量水溶解，离心，取上清液，调节其浓度至lg/ml(每Iml药液中含白芍药材Ig)，药液通过径高比为120的AB-8大孔吸附树脂柱(药液与大孔吸附树脂体积比为12)，药液在树脂柱上吸附30min后，以4BV蒸馏水洗去杂质，收集6BV60%V/V乙醇洗脱液，流速为!3BV/h，减压回收乙醇，浓缩液干燥后即得白芍总苷。白芍总苷中有效成分的含量测定以苯甲酸作为对照品，采用分光光度法，在230nm波长处制定了标准曲线，并对白芍总苷进行了含量测定。实验结果白芍总苷中单萜苷类成分的含量以苯甲酸计为50.12%W/W。实施例2甘草总皂苷的制备方法(1)取甘草粗粉，用20倍量95%乙醇渗漉，渗漉液过滤后，70°C减压浓缩成稠膏状，加热水搅拌溶解后，依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，乙酸乙酯所得部分为总黄酮，正丁醇萃取液部分备用。(2)取步骤(1)所得滤渣，用20倍量20%V/V乙醇渗漉，渗漉液过滤后，提取液在60-70°C减压浓缩至无醇味，再用水饱和正丁醇萃取，所得萃取液与步骤(1)所得正丁醇萃取液合并，减压回收正丁醇后，残渣加水溶解，离心，取上清液，调节至一定浓度后，通过径高比为120的DlOl大孔吸附树脂柱，吸附流速1.5ml/min,以3BV蒸馏水洗去杂质，收集5BV40%V/V乙醇洗脱液，流速为1.5ml/min，减压回收乙醇，浓缩液干燥后即得甘草总皂苷。甘草总皂苷中有效成分的含量测定以甘草酸单铵盐作为对照品，以5%香草醛-冰醋酸溶液及高氯酸作为显色剂，采用分光光度法，在589nm波长处制定了标准曲线，并对甘草总皂苷提取物进行了含量测定。实验结果甘草总皂苷中皂苷的含量以甘草酸单铵盐计为50.2%W/W。实施例3本发明药物组合物的制备取实施例1制备的白芍总苷IOOg和实施例2制备的甘草总皂苷300g，再加入适量微晶纤维素，混勻后，装胶囊，即得。实施例4本发明药物组合物的制备取实施例1制备的白芍总苷300g和实施例2制备的甘草总皂苷100g，再加入适量可溶性淀粉和糊精，以乙醇为粘合剂，制粒，即得。以下通过药效学试验进一步证明本发明的有益效果。本发明的药效实验中，均采用冰醋酸、芥末油制作肠易激综合征(IBS)模型，对目标药物进行药效研究。本发明所用具体造模方法，是采用朱力阳等报道的内脏高敏感性模型建立的(朱力阳，等，《中国药理学通报》，2010年沈卷2期，267-269页)。该造模方法，在一段时间内连续给予化学刺激后，出现了明显的IBS临床表现，实验表明，该方法重复性良好。实验例1白芍总苷治疗冰醋酸内脏高敏感性IBS疾病模型的实验研究1.1材料和方法L1.1药物1.1.1.1受试药物白芍总苷(由实施例1制备得到)。1.1.1.2阳性药物曲美布丁片，天津田边制药有限公司生产，生产批号0905005，规格0.Ig/片X20片/盒。实验时用蒸馏水配制成浓度为2%(每毫升含曲美布丁0.02g)的药液，备用。1.1.1.3主要试剂0.5%冰醋酸(体积分数)，1.5%戊巴比妥钠，生理盐水，液体石蜡。1.1.2动物SD大鼠，雌雄兼有，体重200士20g，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，许可证号SCXK(川)2008-11，检疫后备用。1.1.3器材电子天平PA2003(上海天平仪器厂生产)8F导尿管(湛江市事达实业有限公司)BL-420E生理机能仪(成都泰盟科技有限公司生产)秒表、温度计、卷尺、注射器1.1.4实验方法SD大鼠雌雄兼有，随机分为空白组，模型组，自然恢复组，阳性药组，白芍总苷高、中、低剂量组。所有需造模大鼠禁食24h后，在清醒状态下用钝针头经肛门插入直肠灌注0.5%冰醋酸(体积分数)，5ml/kg,首剂剂量浓度加倍，连续6天，灌注后使大鼠头部朝下，肛门朝上托10秒。从第7天开始，除空白组、模型组外，各组分别灌胃生理盐水，2%曲美布丁，各组分高、中、低剂量药液，IOmlAg01次/天，连续3天。末次给药/造模前禁食Mh，末次给药/造模后Ih经肛门直肠扩张(CRD)后，观察动物腹部撤离反射(AWR)，评价动物的内脏敏感性。肠敏感性测定结束后，立即用1.5%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉动物，按外科常规手术行下腹正中切口，将自制针灸针银电极埋置于结肠浆膜面，距回盲部约2cm，双极的间距5mm，用BL-420E生理记录仪同步描记胃肠电，时间常数^，高频滤波0.3Hz0待波形稳定后，记录5分钟内的电生理活动，计算频率、峰电位、峰峰值、峰面积。1.2实验结果见表1、2。表1白芍总苷对冰醋酸所致IBS模型大鼠肠敏感性的影响(I±SD)il生药给药量~~提取物给药量有效成分给药组别抬腹阈值(ml)拱背阈值(ml)_(只)(g/kg)(mg/kg)量(mg/kg)__空白对照组8OMiO.Of0.78+0.08**~上BS模型组9-------0.56±0.040.62±0.04自然恢复组10——————0.62±0.110.68±0.12曲美布丁组10020.69+0.10**0.74+0.11~白芍总苷高剂量组9512562.650.65±0.160.72±0.17~白芍总苷中剂量组102.562.531.32~0.73±0.10"0.79±0.10*~白芍总苷低剂量组101.2531.2515.66~0.64+0.090.69+0.10~注与模型组比较*P<0.05，**P<0.01。表2白芍总苷对冰醋酸所致IBS模型大鼠结肠肌电的影响(f±SD)8权利要求1.白芍总苷在制备治疗肠易激综合征的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述药物是治疗内脏高敏感性肠易激综合征的药物。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述药物是治疗腹痛、结肠功能紊乱的药物。4.根据权利要求1-3任意一项所述的用途，其特征在于所述白芍总苷中，单萜苷类成分的含量以苯甲酸计不得低于50%W/W。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于所述白芍总苷是由如下方法制备得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，滤液浓缩至无醇味后，加水溶解，取上清液备用；B、将步骤A所得上清液通过大孔吸附树脂柱，先以水洗至无molish反应，再用50-70%V/V乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，即得白芍总苷。6.根据权利要求1-5任意一项所述的用途，其特征在于所述药物是以白芍总苷为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂；其中，每日用制剂中有效成分的含量以白芍总苷计为0.25g/人。7.一种治疗肠易激综合征的药物组合物，其特征在于它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂白芍总苷1-3份、甘草总皂苷1-3份；优选为，白芍总苷1份、甘草总皂苷1份。8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述白芍总苷中，单萜苷类成分的含量以苯甲酸计不得低于50%W/W;所述甘草总皂苷中，含有皂苷的含量以甘草酸单铵盐计不得低于50%W/W。9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于所述白芍总苷是由如下方法制备得到的A、取白芍粗粉，以60-80%V/V乙醇提取，滤液浓缩至无醇味后，加水溶解，取上清液备用；B、将步骤A所得上清液通过大孔吸附树脂柱，先以水洗至无molish反应，再用50-70%V/V乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，即得白芍总苷；所述甘草总皂苷是由如下方法制备得到的(1)取甘草粗粉，先用80-95%V/V乙醇提取，提取液回收乙醇后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇萃取液备用；(2)步骤(1)的药渣再用10-30%V/V乙醇提取，所得的提取液回收乙醇后，用正丁醇萃取，所得萃取液与步骤(1)所得正丁醇萃取液合并，回收正丁醇后，加水溶解，将上清液过大孔吸附树脂柱，先用水洗至无molish反应后，再用30-50%V/V乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，干燥，即得甘草总皂苷。10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于步骤A中，乙醇浓度为70%V/V；步骤B中，采用非极性或中极性的大孔吸附树脂柱，以60%V/V乙醇洗脱；步骤(1)中，选用95%V/V乙醇进行提取；步骤O)中，用20%V/V乙醇提取，再选用非极性或中极性大孔吸附树脂，以40%V/V乙醇洗脱。11.权利要求7-10任意一项所述的药物组合物在制备治疗肠易激综合征的药物中的用途。全文摘要本发明公开了白芍总苷在制备治疗肠易激综合征的药物中的用途。本发明还公开了一种药物组合物及其用途。本发明中白芍总苷、以及它与甘草总皂苷的混合物，可通过改善肠敏感性，降低结肠频率、峰电位、峰峰值及峰面积，降低血浆中升高的CCK含量，升高血清中降低的GAS含量，显著升高患者低水平的血清DA含量及降低结肠中增多的肥大细胞数，从而在对肠易激综合征的治疗中发挥显著疗效。同时，将白芍总苷和甘草总皂苷混合使用后，仅在低剂量下就能发挥显著药效，能够用于肠易激综合征的治疗。白芍总苷、以及它和甘草总皂苷的混合物，能够抑制肠易激综合征所致的腹痛，改善结肠功能紊乱的现象，为临床用药提供了一种新的选择。文档编号A61K36/71GK102416048SQ201110401688公开日2012年4月18日申请日期2011年12月6日优先权日2010年12月6日发明者彭成,朱力阳,李瑜,郭力申请人:成都中医药大学