专利名称：小檗胺用作预防及治疗白内障病的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及小檗胺的一种新的药物用途。更具体地说，本发明涉及到从植物中药三棵针中提取的单体化合物用于预防及治疗白内障病。
小檗胺(Berbamine)是存在于小檗属植物中的一种双苄基异喹啉类生物碱。小檗属植物产于我国，约200余种，土名三棵针。其根、根皮和茎皮中含有多种生物碱，其中最主要的为小檗碱(Berberine)，即商品“黄连素”。其他较主要的生物碱即为小檗胺(Berbamine)、还有巴马亭等。
已知小檗胺的医疗作用主要有升高白细胞。用于各种原因引起的白细胞减少症，在癌症患者进行放疗、化疗中，同时还能防止白细胞减少。
上述作用见(88)陕卫药准字010号《关于同意生产“盐酸小檗胺”等一批药品的批复》。另外该药具有抗快速心率失常、抗心肌缺血、减低心肌耗氧量适合于高血压伴冠心病心绞痛患者。
广义地讲，任何因素造成晶体部分或完全失去透明性，即称之为白内障。白内障的形成是多种因素，综合作用所致，而远非单因素，线性发展结果。在众多的白内障中，糖性白内障研究的最多，对其机理也了解最深入的一种。其中渗透应力学说是目前流行最广的学说，另一种为脂类的氧化学说。
1985年卫生部组织全国盲及低视力的流行病学调查双眼盲的患病率为0.43％，致盲的首位病因为白内障(41.06％)。临床治疗以手术摘除及人工晶体植入为主。1987年，我国年手术10万例左右，而因白内障致盲患者约400-500万人。在我国随着工业的迅速发展，中毒性白内障时有发生，另外，随人均寿命的增长，老年性白内障的发生也日趋突出。目前，临床上使用的抗白内障药物很少。国产只有白内停为卫生部指定使用药物且疗效不肯定。其余数种均为进口药，价格昂贵，疗效不确定。目前，国内抗白内障药物的研究中，以醛糖还原酶抑制剂一类抗糖性白内障的为主，其中以胡天圣等研究的sorbinil为代表Tian-sheng Hu，etal(1983)Reversal of galactose cataract with sorbinilin rats.Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.24640-644.国外目前大部分为化学合成药，毒付作用大，疗效久佳。如美国使用的BHA、BHT，现已淘汰。
筛选一种原料药价格便宜，加工简便，预防及治疗白内障病有效的中草药提取物是本发明的目的。
我们在众多药物的筛选中，首选了小檗胺，它是强的抗氧化剂及自由基清除剂，具有较强的抗DNA损伤功能。
本发明的目的涉及提供了一种新的预防及治疗白内障病的药物用途，该药物是从植物中药三棵针中提取的单体化合物小檗胺，其分子式为C17H40N2O6，结构式为
本发明再一目的涉及的是含有小檗胺的药物组合物，该药物组合物对白内障病的预防及治疗作用。根据本发明，该药物组合物中可以加有各种药用赋形剂，添加剂及载体。
根据本发明，将小檗胺药用本领域专业技术人员熟知的方法制备成滴眼剂型，口服片剂、胶囊及冲剂，针剂剂型等。
根据本发明，其滴眼剂剂型的渗透压最好等于生理盐水，PH在7.2-7.4，剂型中小檗胺的浓度在0.4-1.4％(重量/体积)之间。
本发明利用中草药提纯的单体化合物小檗胺制成制剂，在两种动物模型即链脲佐菌素(STZ)型和半乳糖型，经两种给药途径(局部点眼、腹胫注射)进行白内障的预防和治疗实验。
结果显示1.对早中期糖性白内障的发生，发展具有显著的预防作用，能推迟晶体出现周边空泡的时间。2.对早中期白内障有显著的治疗作用。3.首次发现DNA损伤在糖性白内障中的存在，此损伤可被小檗胺明显抑制并修复。可望用检测晶体上皮细胞DNA SSB的受抑程度，做抗障药物药效评估的检测指标。
实施例一、白内障动物模型的诱发1.链脲佐菌素(streptozotocin STZ)型2％STZ溶液腹腔注射，剂量70mg/kg b.wt。挑选体重120-130g之间雄性Wistar大鼠，禁食过夜，注射STZ后三天采血，测血糖，血糖浓度500-900mg/dL间的动物，用于实验。
2.半乳糖型雄性Wistar大鼠，体重80-100mg，饲以含50％半乳糖的饲料，饮普通水。
二、小檗胺制剂的形成将药物制成液体制剂，渗透压与生理盐水相同，PH在7.2-7.4之间。
三、给药1.腹腔注射法①STZ组给药组I剂量小檗胺3.4mg.kg/b.wt(1/17.75mg LD50)II剂量小檗胺1.74mg/kg b.wt每日腹腔注射一次对照组生理盐水代替小檗胺每日腹腔注射一次②半乳糖组给药组小檗胺剂量同STZ组，每日腹腔注射一次，自饲料喂50％半乳糖时开始注射。
对照组以50％半乳糖条件饲养，不做任何处理2.滴眼剂滴眼法预防实验组糖尿病大鼠随机分为三组，分别用0.04％，0.2％及1％浓度的小檗胺滴眼剂处理双眼，每日滴三次。滴眼处理从注射SIZ后24/小时开始。
治疗实验组大鼠注射STZ后每周用裂隙灯镜检，待白内障发展至III期时，随机分为二组。一组白内障对照组。另一组1％滴眼剂处理双眼，每日三次糖尿病对照组用生理盐水替代小檗胺滴眼剂处理动物双眼正常对照组正常大鼠，不做任何处理四、晶体混浊的检查与分级动物注射STZ后，每周用裂隙灯检查一次。50％半乳糖饲料组每隔一天裂隙灯检查一次，记录晶体出现混浊的时间和发展情况。
晶体混浊程度参照Mlitsuyoshi Azuma等人的标准分级I、无混浊晶体透明清亮II、轻度混浊晶体周边出现空泡III、中度混浊晶体周边空泡向中心扩展，出现雾状混浊IV、高度混浊空泡扩展到核区，核区雾状混浊加重V、核混浊成熟白内障晶体核及周边部均出现混浊。
五、单细胞电泳法(Single cell Gel Assay SCG)检测晶体上皮细胞DNA单链断裂(SSB)，参照Singh等人的方法修改后进行。
六、有关小檗胺预防治疗白内障的结果1.小檗胺滴眼剂预防和治疗糖性白内障的结果预防实验组小檗胺对糖性白内障的发生、发展速度具有非常显著的延缓作用，延缓作用随药物浓度增加而加强。基中1％小檗胺剂量组效果最好，第12周裂隙灯镜检IV及V期(核混浊)出现。
治疗实验组注射STZ后第12周晶状体混浊度在IV期、V期的大鼠，糖尿病对照组占总数的90％，而同一时间内1％小檗胺治疗组中仅占60％，表明小檗胺滴眼剂治疗早期糖性白内障具有显著效果。
2.腹腔注射小檗胺对STZ型糖生白内障的预防作用各组60％以上出现II期及II期以上白内障的时间，糖尿病组第四周达81.25％；腹腔注射小檗胺3.48mg/kg.bwl(1/17.75mg LD50)组第六周达到70％，另一组1.74mg/kg.bwt(1/31.51LD50)组第六周达到80％。即给药使空泡出现推迟两周时间。
3.腹腔注射小檗胺对半乳糖型糖性白内障的预防作用饲喂50％半乳糖饲料的Wistar大鼠在第三天晶体均出现周边空泡，到第15天出现核混浊，20天晶体全部混浊。给药组的变化最大特点是，两种浓度小檗胺(3.48mg/kg.b.wt和1.74mg/kg.b.wt)腹腔注射后，均能抑制早期晶体空泡的出现，比半乳糖组推迟4天，即第7天晶体出现周边空泡。
4.DNA损伤与糖性白内障发生、发展的关系本实验首次发现在糖性白内障中DNA损伤的存在。Wistar大鼠在腹腔注射STZ后3-4天开始出现有显著意义的DNA单链断裂(SSB)，至第12周SSB始终存在于混浊晶体中。
5.小檗胺对糖性白内障晶体上皮细胞DNA损伤的抑制作用Wistar大鼠在腹腔注射STZ后12小时，再腹腔注射1/20，1/40半数致死量(LD50)的小檗胺，七天后才出现有显著意义的SSB，其中1/20LD50组第5周白内障形成率明显低于STZ组，同时SSB也恢复到对照水平；而1/40LD50组抑制SSB程度略逊于1/20LD)50组，但较之STZ组的SSB要轻得多。提示用检测晶体上皮细胞DNASSB受抑程度作抗白内障药物药效筛选的评估的短期实验。
权利要求
1.一种从植物中药三棵针中提取的单体化合物小檗胺，其分子式为C17H40N2O6，结构式
其特征是用于制备成预防及治疗白内障病的药物中的用途。
2.一种用于预防及治疗白内障病的药物组合物，其特征包括作为活性成份的权利要求1的小檗胺，及药用赋形剂或载体。
3.根据权利要求2所述的预防、治疗白内障病的药物组合物，其特征是制成的药物组合物剂型可以是滴眼剂，口服片剂，胶囊，冲剂剂型。
4.根据权利要求3所述的药物制成的滴眼剂型，其特征是渗透压最好等于生理盐水。
5.根据权利要求3所述的药物制成的滴眼剂型，其特征是pH值在7.2-7.4之间。
6.根据权利要求3所述的药物制成的滴眼剂型，其特征是小檗胺的浓度在0.4-1.4％(重量/体积)之间。
全文摘要
本发明提供了一种药物预防及治疗白内障病的药物新用途,及制成用于预防及治疗白内障病的药物组合物,该药物是从植物中药三棵针中提取的单体化合物小檗胺。用小檗胺做成的滴眼剂型其渗透压最好等于生理盐水,pH值为7.2—7.4,小檗胺的浓度在0.4—1.4%(重量/体积)之间。
文档编号A61K31/47GK1181932SQ9612060
公开日1998年5月20日 申请日期1996年11月7日 优先权日1996年11月7日
发明者何浩, 张昌颖 申请人:何浩