专利名称：：促神经重塑药物的新颖的药学组合物及其制备方法促神经重塑药物的新颖的药学组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及天然植物有效成分和西药成分的组合物及其优化的配比及药物用途，特别涉及麻黄碱和纳洛酮的组合物对缺血性脑血管疾病有明显治疗作用。
背景技术：
：虽然在脑梗死后极早期进行溶栓治疗，可以抢救梗死灶边缘区尚未死亡的缺血神经细胞。然而，卒中病灶中心区神经元死亡引起的神经功能缺损至今仍无确切有效的治疗方法。但有研究表明，卒中后的神经功能缺损在一定时期内可有不同程度的自行改善。这除了与卒中后脑水肿消退有关外，目前认为残存脑组织的可塑性对脑梗塞后神经功能缺损的自行改善起重要作用。在此过程中神经递质如去甲肾上腺素(NE)、神经特异性蛋白如生长相关蛋白43(GAP43)、突触素(SYP)，神经营养因子和神经抑制因子等都起着重要作用。某些药物如拟肾上腺素药物麻黄碱可通过对这些物质的调节促进神经可塑性变化而加快神经康复。传统中药麻黄应用历史悠久，历来有治疗中风的临床佐证，近期文献也支持麻黄具有正性康复作用。1887年日本学者长井首次从中分离出其主要药用成分是2-甲基氨基-l-苯基-l-丙醇，即麻黄碱。后经研究确定麻黄碱是a和B-肾上腺素受体激动药，具有显著的拟肾上腺素能作用。麻黄碱极性小，口服易吸收，可通过血脑屏障，血浆半衰期3-6小时。动物实验表明麻黄碱可显著促进中枢神经系统内多种神经递质释放，如去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺等，其中去甲肾上腺素的神经再生作用业已成为共识。Laifenfeld等人研究发现，应用去甲肾上腺素处理体外培养的人神经母细胞瘤细胞，可使细胞颗粒状突起延长，并增加突起的数量。同时，去甲肾上腺素可以直接导致细胞内GAP-43表达增多，增加参与细胞轴突延伸的两种蛋白(神经细胞黏附分子-Ll，层粘连蛋白)基因的表达。另有研究显示，去甲肾上腺素对突触的形成和维持有营养作用，参与正常神经细胞的发育、分化、信息传递等生理过程，对中频的联系记忆和空间记忆的恢复有重要作用，增强皮质运动神经的兴奋性，从而在神经可塑性中起重要作用。急性脑梗死是由于脑局部供血区血流中断，造成脑组织缺血、缺氧，软化坏死，从而出现一系列相应的神经系统症状和体征。脑梗死发作时，缺血刺激下丘脑弓形核释放大量的e-内啡肽，e-内啡肽可降低梗死灶周围缺血半暗带的血流量，抑制缺血区神经元的电活动，又f神经元造成直接的细胞毒性损伤作用，加速缺血性脑水肿损伤的发展。因此尽早恢复缺血半暗带区血流灌注的关键之一。纳洛酮是一种选择性阿片受体拮抗剂，血浆半衰期为60-90分钟，其亲和力大于吗啡月太，与脑内吗啡受体结合，成为竞争性吗啡抑制剂，使e-内啡肽失活，从而减轻或逆转脑水肿；逆转脑组织水肿区半暗带所致神经功能障碍，促进神经功能恢复；增加其区域的血流量，减轻脑缺血再灌流损害。有研究表明，单用大剂量纳洛酮治疗急性脑梗死能取得较好的疗效，显效率为68.97%[4]。较多临床疗效观察，纳洛酮安全性高、副作用小，仅个别病人出现轻微头痛、恶心等副作用。本研究组前期研究证实，脑缺血大鼠经过促肾上腺素药物麻黄碱治疗后可促进大鼠脑缺血后的运动功能恢复，脑内神经丝蛋白(NF)、微管相关蛋白(,P2)、生长相关蛋白43(GAP43)、突触素(SYP)等参与祌经元重塑的几种重要蛋白表达显著提高。脑缺血再灌注损伤明显改善，运动功能恢复速度明显提高。小剂量(0.lmg/kg，qd)纳洛酮不能明显促进运动功能恢复，也不能使GAP-43、SYP、MAP2等蛋白显著增加，但与麻黄碱联合用药能增强麻黄碱的药效，使GAP-43、SYP、MAP2等蛋白表达进一步增高，加速新生突触的形成，进一步证实提高脑内神经重塑和结构重建的分子表达是麻黄碱促进神经康复的机制之一
发明内容乐盈VI发现公开了一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物及各种成分的剂量和配合比例，给药方法。该组合是由麻黄碱、纳洛酮两种成分所组成，其治疗缺血性脑血管疾病所用剂量为麻黄碱1.5mg/kg/d，纳洛酮0.lmg/kg/d,0.2mg/kg/d，0.3rag/kg/d,分别按照15:1，7.5:1，5:1(质量比)进行混合，即将麻黄碱结晶150呢、纳洛酮IO呢、20呢、30呢用注射用水1000ml分别配成液体后，再将两种液体按上述比例混合在一起(临用前临时配制)，该配方可用于制备治疗脑缺血性疾病，其中优化的配方为麻黄碱纳洛酮=5:1(质量比)，此时按麻黄碱(L5tng/kg/d)和纳洛酮(0.3mg/kg/d)剂量给药，药效最好。麻黄碱:纳洛酮组合物配方促进神经康复的疗效稳定，安全可靠。本配方工艺简单，易于生产。具体实施例方式实例l将麻黄碱结晶150mg、纳洛酮10mg、20mg、30mg用注射用水1000ml分别配成液体后，超滤清除细菌及杂质，巴氏消毒，再将两种液体按上述比例混合在一起(临用前临时配制)，该配方可用于制备治疗脑缺血性疾病，其中麻黄碱(1.5mg/kg/d)和纳洛酮(0.3mg/kg/d)配比是三个剂量中药效最好的比例，对脑缺血后运动功能恢复和脑功能康复效果明显。实例2麻黄碱配伍纳络酮干预脑缺血再灌注大鼠神经可塑性变化SD大鼠采用改良Koizumi线栓法建立左侧MCAO模型，随机分为8组模型组，麻黄碱治疗组，小剂量、中剂量和高剂量纳洛酮治疗组，麻黄碱+小剂量纳洛酮治疗组，麻黄碱+中剂量纳洛酮治疗组，麻黄碱+高剂量纳洛酮治疗组。在术后1周，2周，3周，4周横木行走试验测定感觉运动整合功能，免疫组化方法检测海马生长相关蛋白-43(GAP-43)，突触素(SYP)，'P-内啡肽(6-endorphin,日-EP)表达的动态变化。横木行走实验显示，麻黄碱组在卜3周得分明显高于模型组(P<0.05)，三个剂量的纳洛酮与模型组相比无显著性差异(P〉0.05);而在麻黄碱+纳洛酮治疗组，随着纳洛酮剂量的增加，在相应时间点得分越高；平均光密度值麻黄碱组和麻黄碱+纳洛酮各治疗组GAP-43、SYP的水平高于模型组，麻黄碱+高剂量纳洛酮组在2、3周时表达最高，差异具统计学意义；而麻黄碱组和麻黄碱+纳洛酮各治疗组P-EP的表达在2、3周时明显低于模型组，其中麻黄碱+0.3mg/kg/d纳洛酮组e-EP持续低表达，差别具有统计学意义。麻黄碱组和麻黄碱+纳洛酮各治疗组均能有效加速脑缺血大鼠运动功能的恢复和脑缺血区域神经可塑性速度，其中麻黄碱+高剂量纳洛酮治疗组促进作用最好，其机制可能与纳洛酮'在脑缺血早期显著抑制并持续维持0-内啡肽的表达，减轻缺血局部脑组织水肿，改善局部血流量从而与麻黄碱形成协同作用而加速神经重塑有关。表1各实验组横木行走试验评分(^±5,n=6)分组术后观察时间点l周2周3周4周模型组1.17±0.652.66±0.784.00±0.805.50±0.55麻黄碱组2.33±0.81a4.17土0.66a5."土0.68a5.67±0.52小剂量纳洛酮组1.18±0.492.50±0.624.20±0.525.30±0.60中剂量纳洛酮组1,16±0.532.79±0.584.18土0.685.45±0.45高剂量纳洛酮组L20士0.722.81±0.724.68±0.345.68±0.44麻黄碱+小剂量纳洛酮组2.23±0.74a4.06±0.75a5.28±0.50a5.89±0.42麻黄碱+中剂量纳洛酮组3.45±0.38ab5.69±0.64ab5.82±0.40a5.90±0.30麻黄碱+高剂量纳洛酮组4.68±0.36ab5.70±0.77ab5.91土0.49a6.00±0.00a:与相同时间点模型组比较P〈0.05;b:与相同时间点麻黄碱治疗组比较P<0.05表2各组BDNF的表达(7±s，n=6，平均光密度)分组术后观察时间点l周2周3周4周模型组0.6578±0.01280.7088±0.01320.7563±0.01700.6661±0.01905<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>a:与相同时间点模型组比较P〈0.05;b:与相同时间点麻黄碱治疗组比较P<0.05表3各组GAP-43的表达(^±5，n-6，平均光密度)术后观察时间点<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>a-与相同时间点模型组比较P〈0.05;b:与相同时间点麻黄碱治疗组比较P<0.05表4各组SYP的表达(7土S，n=6，平均光密度)术后观察时间点<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>a:与相同时间点模型组比较P〈0.05;b:与相同时间点麻黄碱治疗组比较P<0.05表5各组P-EP的表达(歹士S'n=6，平均光密度)术后观察时间点组别l周2周3周4周模型组0.2414±0.00620.2378±0.00570.2119±0.00980.1642±0.0147麻黄碱组0.1197±0.0093a0.2004±0.02540.2254±0.00870.1605±0.0076小剂量纳洛酮组0.2394±0.02400.2366±0.01540.2210±0.01070.1666±0.0177中剂量纳洛酮组0.2387±0.01290.2311±0.01290.2064±0.01980.1621±0.0117高剂量纳洛酮组0.2358±0.01720.2300±0.01820.1989±0.00820.1632±0.0133麻黄碱+低剂量纳洛酮组0.2463±0.0670.2097±0.03210.1201士0.0i79ab0.1233土0.0106ab麻黄碱+中剂量纳洛酮组0.1335土0.0184a0.1201±0.0074ab0.1560士0.0102ab0.1629±0.0221麻黄碱+高剂量纳洛酮组0.1482±0.0253a0.1201±0.0094ab0.1495±0.0144ab0.1138±0.0099aba:与相同时间点模型组比较P〈0.05;b:与相同时间点麻黄碱治疗组比较P<0.05表6各试验组TUNEL阳性细胞数(7士S，n=6，平均光密度)术后观察时间点分组1周2周3周4周模型组77.1±1.170.2±1.662.2±1.846.4±0.7麻黄碱组64.3±1.2a51.1士1.0a40.1±1.7a30.7±l.la小剂量纳洛酮组76.7±1.772.4±0.863.U0.945.9±1.2中剂量纳洛酮组77.1±1.170.2±1.662.2±1.846.4±0.7高剂量纳洛酮组74.8±0.769.4±1.560.2±0.844.3±1.0麻黄碱+小剂量纳洛酮组74.0±0.967.7±2.259.6±1.444.0±1.1麻黄碱+中剂量纳洛鹏组59,]土l,4a50.4±1.5a30.6±0.8ab21.5±0.7a麻黄碱+高剂量纳洛酮组50,8±L0ab34.4±1.7ab19.8士2.0ab13.9±〗.0aba:与相同时间点模型组比较P〈0.05;b:与相同时间点麻黄碱治疗组比较P〈0.05权利要求1.一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物，其特征在于它是由下列剂量配比的植物有效成分和西药成分所组成麻黄碱与纳洛酮按5∶1(质量比)的比例混合后使用。2.—种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物，其特征在于它是由下列剂量配比的植物有效成分和西药成分所组成-麻黄碱与纳洛酮按7.5:1(质量比)的比例混合后使用。3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是组合物的剂量配比为麻黄碱1.5mg/kg/d，纳洛酮0.3mg/kg/d。4.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征是组合物的剂量配比为麻黄碱1.5mg/kg/d，纳洛酮02mg/kg/d。5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是在组合物为液体，采用常规物理泡合制成注射液。6.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征是在组合物为液体，采用常规物理泡合制成注射液。7.权利要求3所述的药物组合物在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中的应用。8.权利要求4所述的药物组合物在制备治疗缺血性脑血管疾病药物中的应用。全文摘要发现公开了一种治疗缺血性脑血管疾病的药物组合物及各种成分的剂量和配合比例，给药方法。该组合是由麻黄碱、纳洛酮两种成分所组成，其治疗缺血性脑血管疾病所用剂量为麻黄碱1.5mg/kg/d，纳洛酮0.1mg/kg/d，0.2mg/kg/d，0.3mg/kg/d，分别按照15∶1，7.5∶1，5∶1(质量比)进行混合，即将麻黄碱结晶150mg、纳洛酮10mg、20mg、30mg用注射用水1000ml分别配成液体后，再将两种液体按上述比例混合在一起(临用前临时配制)，该配方可用于制备治疗脑缺血性疾病的药物配方，其中麻黄碱(1.5mg/kg/d)和纳洛酮(0.3mg/kg/d)5∶1的配比是三个剂量中药效最好的比例，且其促进神经康复的疗效稳定，安全可靠，工艺简单，易于生产等优点。文档编号A61K31/137GK101543496SQ20091010372公开日2009年9月30日申请日期2009年4月30日优先权日2009年4月30日发明者张景勍,李晓阳,农肖,陈玉霞申请人:重庆医科大学附属儿童医院