专利名称：一种含三磷酸腺苷二钠氯化镁化合物药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及一种三磷酸腺苷二钠氯化镁的药物组合物，本发明还涉及其制备方法。
背景技术：
三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate, ATP)是一种核苷酸(又叫腺苷三磷酸)，作为细胞内能量传递的物质，储存和传递化学能。三磷酸腺苷是体内广泛存在的辅酶，是体内组织细胞所需能量的主要来源，蛋白质、脂肪、糖和核苷酸的合成都需ATP参与。三磷 酸腺苷二钠是核苷酸衍生物，参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。当体内吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应等需要能量时，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同时释放出能量。三磷酸腺苷二钠能够穿透血-脑脊液屏障，能提高神经细胞膜性结构的稳定性和重建能力、促进神经突起的再生长。三磷酸腺苷二钠现有剂型有三磷酸腺苷二钠氯化镁针剂、三磷酸腺苷二钠氯化钠注射剂等剂型。与三磷酸腺苷二钠氯化钠相比，三磷酸腺苷二钠氯化镁由于具有镁离子，能够启动损伤衰竭细胞功能恢复，激活代谢。三磷酸腺苷二钠-氯化镁注射液在体内可以防止外源性三磷酸腺苷与血浆二价阳离子形成络合物，从而发挥三磷酸腺苷的供能、改善线粒体功能的作用，加速脑、心、肝、肾及神经细胞受损后恢复，减轻三磷酸腺苷血管扩张作用所致的持续低血压，补充缺血后细胞能量代谢所需镁，延滞外源性三磷酸腺苷在体内快速脱氨基和去磷酸化作用。该药能增加线粒体腺苷酸储量，减轻缺血细胞的损伤，维持细胞器的完整性，改善微循环，对急性黄疸肝炎、缺血性脑血管病后遗症、脑损伤、肺心病肺动脉高血压、急慢性活动型肝炎、心肌炎、急慢性肾脏疾病、烧伤、外伤以及败血症具有辅助治疗作用。然而，三磷酸腺苷二钠氯化镁的稳定性一直是一个难以解决的难题。专利文献CN1736392A指出，目前市售的三磷酸腺苷二钠氯化镁注射液是由两瓶药液组成，即A液和M液，分别含三磷酸腺苷二钠和氯化镁，临床使用时配制较繁琐，这是由于三磷酸腺苷二钠和氯化镁混合后不稳定，易产生沉淀所致。该文献给出的方式是通过添加辅料，制备成冻干粉来解决稳定性的问题。然而，将其制备成冻干粉一方面增加了成本，另一方面并未从根本上解决注射剂存放稳定性的问题。

发明内容
本发明的目的在于针对现有技术中三磷酸腺苷二钠氯化镁注射液稳定性差的问题，提供一种新的三磷酸腺苷二钠氯化镁药物组合物。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案—种含三磷酸腺苷二钠氯化镁化合物药物组合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二钠50 150、氯化镁100 300、亚硫酸氢钠10 30。优选本发明药物组合物包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二钠80 120、氯化镁150 250、亚硫酸氢钠15 25。更优选本发明药物组合物包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二钠100、氯化镁200、亚硫酸氢钠20。
本发明药物组合物可以使水针剂也可以是粉针剂。当为水针剂时，还包括灭菌用水1000 10000重量份，优先灭菌用水1500 8000重量份，更有选4000重量份。当为冻干粉针剂时，还包括10 20重量份的右旋糖酐40。本发明还提供制备上述药物组合物水针剂的方法，该方法包括如下步骤将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20 25%的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入药用活性炭，搅拌吸附，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌吸附，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，过滤除菌。上述药用活性炭加入量优选为全量的O. 04% (g/ml)。上述过滤除菌优选为两级过滤除菌，分别采用O. 45 μ m微孔滤膜和O. 22 μ m微孔滤膜过滤。优选所述灭菌用水的温度不超过20°C，避免灭菌用水温度过高而导致亚硫酸氢钠以及三磷酸腺苷二钠的功能或活性损失。优选搅拌吸附的方式是搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3 4次。本发明涉及到两次搅拌吸附，采用这种方式一方面可以使杂质被有效吸附，另一方面可以减少溶液中溶解氧的量，从而有效防止亚硫酸氢钠的氧化。本发明还提供制备上述药物组合物冻干粉针剂的方法，其包括如下步骤I)将氯化镁和亚硫酸氢钠用注射用水溶解，搅拌均匀，加入药用活性炭，搅拌吸附，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌吸附，滤除活性炭得溶液I ;2)将右旋糖酐用注射用水溶解，加入活性炭于50 60°C搅拌吸附，冷却至20°C以下得溶液2 ；3)将将溶液I和溶液2混合，加注射用水至全量，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶；4)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-40°C，并于-40°C保温3小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10°C /h逐渐升高板层温度至_4°C，保温3小时，升温至0°C继续保温I小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30°C并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。本发明通过研究意外发现，通过添加亚硫酸氢钠使三磷酸腺苷二钠、氯化镁及亚硫酸氢钠在合理的比例中，能够有效提高注射液的稳定性，防止其发生沉淀。另外，适当提高氯化镁的含量可以增强其在缺血性脑血管病后遗症中的治疗效果。
具体实施例方式以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。实施例I配方三磷酸腺苷二钠100g、氯化镁200g、亚硫酸氢钠20g、灭菌用水4000ml。制备方法
将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20 %的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入全量体积的O. 04% (g/ml)药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌4次，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，分别采用0.45 μ m微孔滤膜和0.22 μ m微孔滤膜过滤。过滤除菌。检验合格后分装。其中灭菌用水的温度不超过20°C。实施例2配方三磷酸腺苷二钠50g、氯化镁100g、亚硫酸氢钠10g、灭菌用水1000ml。制备方法将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积25 %的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入全量体积的O. 03%药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌4次，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，分 别采用0.45 μ m微孔滤膜和0.22 μ m微孔滤膜过滤。过滤除菌。检验合格后分装。其中灭菌用水的温度不超过20°C。实施例3配方三磷酸腺苷二钠80g、氯化镁150g、亚硫酸氢钠15g、灭菌用水1500ml。制备方法将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积25 %的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入全量体积的O. 04%药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，分别采用0.45 μ m微孔滤膜和0.22 μ m微孔滤膜过滤。过滤除菌。检验合格后分装。其中灭菌用水的温度不超过20°C。实施例4配方三磷酸腺苷二钠120g、氯化镁250g、亚硫酸氢钠30g、灭菌用水10000ml。制备方法将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20%的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入全量体积的O. 5%药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，分别采用0.45 μ m微孔滤膜和0.22 μ m微孔滤膜过滤。过滤除菌。检验合格后分装。其中灭菌用水的温度不超过20 °C。实施例5配方三磷酸腺苷二钠150g、氯化镁300g、亚硫酸氢钠25g、灭菌用水8000ml。制备方法将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20 %的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入全量体积的O. 05%药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，分别采用0.45 μ m微孔滤膜和0.22 μ m微孔滤膜过滤。过滤除菌。检验合格后分装。其中灭菌用水的温度不超过20°C。实施例6配方三磷酸腺苷二钠120g、氯化镁150g、亚硫酸氢钠20g、灭菌用水5000ml。
制备方法将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20 %的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入全量体积的O. 03%药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌4次，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，分别采用0.45 μ m微孔滤膜和0.22 μ m微孔滤膜过滤。过滤除菌。检验合格后分装。其中灭菌用水的温度不超过20°C。实施例7配方三磷酸腺苷二钠100g、氯化镁200g、亚硫酸氢钠20g、右旋糖酐4015g制备方法I)将氯化镁和亚硫酸氢钠用IOOOml的注射用水溶解,搅拌均匀,加入全量体积的O. 04% (g/ml)药用活性炭，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3次，加入三磷酸腺 苷二钠，搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌4次，滤除活性炭得溶液I ;2)将右旋糖酐用200ml注射用水溶解，加入活性炭于55°C搅拌吸附，冷却至20°C以下得溶液2 ；3)将将溶液I和溶液2混合，加注射用水至4000ml，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶；4)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-40°C，并于-40°C保温3小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10°C /h逐渐升高板层温度至_4°C，保温3小时，升温至0°C继续保温I小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30°C并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。结果制得的冻干粉冻型良好，复溶性及澄清度均符合规定，长时间放置后(24个月)稳定性高，含量、有关物质、澄明度等各项指标变化均不明显。实验例I :安全性试验参考林秀珍等(三磷酸腺苷二钠2氯化镁注射液的安全性试验，海峡药学，2006年，第18卷第4期)的实验方法来考察本发明试剂的安全性，试验方法及结果如下一、血管刺激性实验取体重为2. 0-2. 5kg的新西兰大白兔21只，随机分为7组(实验组I 7，分别对应注射施例I 7的三磷酸腺苷二钠氯化镁药物组合物)，每组3只。分别用兔箱固定，双侧耳缘脱毛并用酒精消毒皮肤，左耳缘静脉缓慢注射受试液O. 6mL · k^1,(将实施例I 7的三磷酸腺苷二钠氯化镁药物组合物用生理盐水注射液稀释至三磷酸腺苷二钠Img/ml (下称lmgATP/ml))右耳缘静脉注射同量生理盐水注射液，做为阴性对照，注射速度为ImL ^irT1,每日I次，连续7天。每日注射的部位逐次由耳缘静脉的远端向近端前移，注意观察给药后兔耳缘静脉反应情况，并于末次给药后24h将兔放血处死，于末次注射部位的近端(距注射部位O. 5cm)和远端(距末次注射部位I. 5cm)各剪取一段标本，放入10%甲醛固定液中固定，送病理科做常规组织切片，并观察有无血栓形成，内皮损伤及其它病理变化。目检结果实验组I 7组给药侧与注射生理盐水侧均未见明显异常。镜检结果两组兔耳组织学改变基本一致，无显著差别；表皮均有轻度角化，无明显萎缩或增厚改变。可见本发明三磷酸腺苷二钠-氯化镁注射液静脉给药无明显刺激性。
二、溶血实验取新西兰白兔，清醒状态下从心脏取血约20mL放入置有玻璃珠的烧杯中，不断振摇以除去纤维蛋白，再倒入试管中并加入生理盐水，摇匀，2500rpm离心5min，弃上清液后，沉淀的红细胞再用生理盐水洗涤和离心3次，至上清液不呈红色。将所得红细胞再用生理盐水配成2 %红细胞悬液，供试验用。取干净试管7支，按表I所示依次加入2 %红细胞悬液和生理盐水，置37°C恒温水浴中温育30min后，第I 5管分别加入受试液O. 1、0. 2、0. 3、O. 4,0. 5mL，第六管为生理盐水对照管，第七管为蒸馏水对照管，摇匀后，置37°C保温箱中，观察4h内各试管的溶液是否有溶血或红细胞凝集现象。表I溶血试验加药表
权利要求
1.一种含三磷酸腺苷二钠氯化镁化合物药物组合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二钠50 150、氯化镁100 300、亚硫酸氢钠10 30。
2.根据权利要求I所述的药物组合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二钠80 120、氯化镁150 250、亚硫酸氢钠15 25。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其包括以下重量份的成分三磷酸腺苷二钠100、氯化镁200、亚硫酸氢钠20。
4.根据权利要求I 3任一项所述的药物组合物，其特征在于，其为水针剂或冻干粉针剂。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述水针剂还包括灭菌用水1000 10000重量份。
6.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述冻干粉针剂还包括10 20重量份的右旋糖酐40。
7.制备权利要求5所述药物组合物的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20 25%的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入药用活性炭，搅拌吸附，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌吸附，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，过滤除菌。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述灭菌用水的温度不超过20°C。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述搅拌吸附的方式是搅拌均匀后静置每隔5分钟搅拌一次，搅拌3 4次。
10.制备权利要求6所述药物组合物的方法，其包括如下步骤 1)将氯化镁和亚硫酸氢钠用注射用水溶解，搅拌均匀，加入药用活性炭，搅拌吸附，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌吸附，滤除活性炭得溶液I; 2)将右旋糖酐用注射用水溶解，加入活性炭于50 60°C搅拌吸附，冷却至20°C以下得溶液2 ; 3)将将溶液I和溶液2混合，加注射用水至全量，再经除菌滤器过滤至储罐，半成品检验合格后，分装入瓶； 4)将分装好的半成品置于冷冻干燥机制品室板层，4小时降温至-40°C，并于-40°C保温3小时，开启捕水器制冷开关，于预冻保温结束后，开启真空泵，当真空泵读数降至20帕以下时，按10°C /h逐渐升高板层温度至_4°C，保温3小时，升温至0°C继续保温I小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30°C并保温2小时，当制品温度与板层温度接近时结束冻干。
全文摘要
本发明提供了一种含三磷酸腺苷二钠氯化镁化合物药物组合物，本发明药物组合物包括以下重量比的成分三磷酸腺苷二钠50～150、氯化镁100～300、亚硫酸氢钠10～30、灭菌用水1000～10000。本发明药物组合物的制备方法是将氯化镁和亚硫酸氢钠用全量体积20～25％的灭菌用水溶解，搅拌均匀，加入药用活性炭，搅拌吸附，加入三磷酸腺苷二钠，搅拌吸附，滤除活性炭，加灭菌用水至全量，过滤除菌。本发明制备方法简单，并且可以有效降低有效成分的损失。本发明药物组合物稳定性高，另外在在缺血性脑血管病后遗症中的具有较佳的治疗效果，具有较高的应用前景。
文档编号A61K9/19GK102895259SQ201210354969
公开日2013年1月30日 申请日期2012年9月24日 优先权日2012年9月24日
发明者罗诚 申请人:罗诚