专利名称：一种羊蹄鞣质的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种羊蹄鞣质的制备方法，尤其是一种采用超临界二氧化碳萃取技术脱脂和大孔树脂除杂对羊蹄鞣质进行精制纯化的方法。
背景技术：
羊蹄为蓼科植物羊蹄或尼泊尔羊蹄的根。分布于西南及陕西、甘肃、青海、江苏、江西、湖北、湖南、西藏等地。羊蹄根及根茎含有结合及游离的大黄素(emodin)，大黄素甲醚 (physcion)，大黄酚(chrysophanol)，总量1. 73%，其中结合型0. 27%，游离型1.46%。还含有酸模素(musizin)即是尼泊尔羊蹄素；还含有酸模素和鞣质。羊蹄具有清热解毒，止血， 通便，杀虫的功效。用于鼻出血，吐血衄血，肠风便血，痔血，崩漏功能性子宫出血，血小板减少性紫癜，慢性肝炎，肛门周围炎，大便秘结；外用治外痔，急性乳腺炎，黄水疮，疥癣，白秃， 痈疮肿毒，跌打损伤。鞣质又称单宁，是存在于植物体内的一类结构比较复杂的多元酚类化合物。目前对中药中的鞣质研究较少，但是鞣质的作用却不容忽视。鞣质具有收敛性，内服治疗胃出血、水泻等症，外用于创伤、灼伤，可使创伤后渗出物中蛋白质凝固，形成痂膜，可减少分泌和防止感染，鞣质能使创面的微血管收缩，有局部止血作用。还能凝固微生物的原生质，有一定的抗菌作用，有的可抗肠道病菌，用作止痢药；鞣质外用能沉淀蛋白质，用作创面保护药和局部止血药，治疗烧、烫伤；鞣质还能作为生物碱和重金属中毒时的化学解毒剂，它能与这些物质生成沉淀，减少吸收或不被人体吸收。此外还具有抗衰老抗变态反应、抗炎、驱虫、降血压等作用。鞣质作为一类重要的中药成分，由于提取与分离的困难，使得鞣质的研究一直很少，进展也很慢，所以鞣质的其他作用与应用还有待继续研究，特别是在提纯技术和抗肿瘤、艾滋病研究上具有很大的进展空间。目前，国内对鞣质的研究较少，尚处于起步阶段，赵素霞等(辽宁中医药大学学报， 2008,10 (10):134-135)以70%丙酮超声提取30min，所得产品纯度不高。因此，研究出一种制备羊蹄中鞣质的方法是非常必要的，对于扩大药源以及羊蹄的综合利用具有很重要的
眉、ο

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单，产品纯度较高的羊蹄鞣质提取方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案
(1)将羊蹄药材进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质；
(2)残渣加入5-8倍(V/W)丙酮溶液进行超声循环提取1-3次，每次1-池，合并提取
液；
(3)提取液回收丙酮，加入热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行^00-3000rpm的离心，分出沉淀，加入丙酮溶液，在30-50 °C下加热溶解，30 V保温30-60min，滤除明胶，得到滤液；
(4)滤液回收丙酮，上大孔树脂吸附，先用水和10-20%乙醇溶液洗去杂质，再用60-70% 的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得羊蹄鞣质。所述步骤(1)中超临界二氧化碳萃取温度为30_55°C，压力为20_28MPa，萃取时间为 0.5-lh。所述步骤(2)中丙酮溶液浓度为50-70%。所述步骤(2)中超声频率为25-35KHZ。所述步骤(3)中明胶溶液浓度为2-5%，丙酮溶液浓度为70-100%。所述步骤(4)中大孔树脂可选HPD-400、ADS_17和S_8中的一种或几种，洗脱流速为 0. 8-1. 2BV/h0综上所述，本发明存在以下优点
(1)采用超临界二氧化碳萃取技术脱除油脂类物质，快速、高效；
(2)采用超声循环提取的方法提取羊蹄鞣质，提取效率高；
(3)以50-70%的丙酮溶液作为提取溶剂，减少了多糖的溶出；
(4)采用大孔树脂粗分羊蹄鞣质，成本低，分离效果好；
(5)本发明所有工艺步骤均在相对较低的温度下进行，节省能源，且保证了鞣质的生物活性。下面将结合具体实施方式
对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
将羊蹄药材进行干燥、粉碎，取lkg，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质，萃取温度为30°c，压力为20MPa，萃取时间为lh，残渣加入5倍(V/W) 70%丙酮溶液进行超声循环提取3次，每次lh，超声频率为25KHz，合并提取液，回收丙酮，加入5%热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行3000rpm的离心，分出沉淀，加入100%丙酮溶液，在30°C下加热溶解，30°C保温60min，滤除明胶，得到滤液，回收丙酮，上ADS-17型大孔树脂吸附，先用水和10%乙醇溶液洗去杂质，再用60%的乙醇溶液洗脱，洗脱流速为1. 2BV/h，收集洗脱液， 浓缩，冷冻干燥即得羊蹄鞣质15. 9g，含量为73. 1%。实施例2:
将羊蹄药材进行干燥、粉碎，取lkg，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质，萃取温度为35°C，压力为25MPa，萃取时间为lh，残渣加入8倍(V/W) 50%丙酮溶液进行超声循环提取1次，超声频率为25KHz，每次池，合并提取液，回收丙酮，加入3%热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行^OOrpm的离心，分出沉淀，加入90%丙酮溶液，在40°C下加热溶解，30°C保温50min，滤除明胶，得到滤液，回收丙酮，上ADS-17型大孔树脂吸附，先用水和15%乙醇溶液洗去杂质，再用70%的乙醇溶液洗脱，洗脱流速为0. 8BV/h，收集洗脱液， 浓缩，冷冻干燥即得羊蹄鞣质23. 7g，含量为72. 0%。实施例3:将羊蹄药材进行干燥、粉碎，取lkg，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质，萃取温度为55°C，压力为^MPa,萃取时间为0.证，残渣加入5倍(V/W) 60%丙酮溶液进行超声循环提取2次，超声频率为35KHz，每次lh，合并提取液，回收丙酮，加入洲热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行^OOrpm的离心，分出沉淀，加入70%丙酮溶液，在50°C下加热溶解，30°C保温30min，滤除明胶，得到滤液，回收丙酮，上ADS-17型大孔树脂吸附，先用水和20%乙醇溶液洗去杂质，再用70%的乙醇溶液洗脱，洗脱流速为1. 2BV/h，收集洗脱液， 浓缩，冷冻干燥即得羊蹄鞣质22. lg，含量为65. 8%。实施例4:
将羊蹄药材进行干燥、粉碎，取lkg，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质，萃取温度为45°C，压力为25MPa，萃取时间为0.证，残渣加入8倍(V/W) 60%丙酮溶液进行超声循环提取3次，超声频率为25KHz，每次1.证，合并提取液，回收丙酮，加入5%热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行^OOrpm的离心，分出沉淀，加入80%丙酮溶液，在30°C下加热溶解，30°C保温60min，滤除明胶，得到滤液，回收丙酮，上HPD-400型大孔树脂吸附，先用水和15%乙醇溶液洗去杂质，再用65%的乙醇溶液洗脱，洗脱流速为lBV/h，收集洗脱液， 浓缩，冷冻干燥即得羊蹄鞣质22. 0g，含量为66. 3%。实施例5:
将羊蹄药材进行干燥、粉碎，取lkg，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质，萃取温度为55°C，压力为25MPa，萃取时间为lh，残渣加入8倍(V/W) 70%丙酮溶液进行超声循环提取3次，超声频率为25KHz，每次lh，合并提取液，回收丙酮，加入5%热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行3000rpm的离心，分出沉淀，加入90%丙酮溶液，在50°C下加热溶解，30°C保温30min，滤除明胶，得到滤液，回收丙酮，上S-8型大孔树脂吸附，先用水和 15%乙醇溶液洗去杂质，再用65%的乙醇溶液洗脱，洗脱流速为1. 2BV/h,收集洗脱液，浓缩， 冷冻干燥即得羊蹄鞣质18. 7g，含量为82. 5%。
权利要求
1.一种羊蹄鞣质的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)将羊蹄药材进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质；(2)残渣加入5-8倍(V/W)丙酮溶液进行超声循环提取1-3次，每次1-池，合并提取液；(3)提取液回收丙酮，加入热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，进行^00-3000rpm的离心，分出沉淀，加入丙酮溶液，在30-50°C下加热溶解，30°C保温30-60min，滤除明胶，得到滤液；(4)滤液回收丙酮，上大孔树脂吸附，先用水和10-20%乙醇溶液洗去杂质，再用60-70% 的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得羊蹄鞣质。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中超临界二氧化碳萃取温度为30-55°C，压力为20-28MPa，萃取时间为0. 5_lh。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中丙酮溶液浓度为 50-70%ο
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中超声频率为25-35KHZ。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中明胶溶液浓度为2-5%， 丙酮溶液浓度为70-100%。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤(4)中大孔树脂可选 HPD-400、ADS-17和S-8中的一种或几种，洗脱流速为0. 8-1. 2BV/h。
全文摘要
本发明涉及一种羊蹄鞣质的制备方法，包括以下步骤(1)将羊蹄药材进行干燥、粉碎，采用超临界二氧化碳技术萃取羊蹄中的油脂类物质；(2)残渣加丙酮溶液进行超声循环提取；(3)提取液回收丙酮，加入热明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，分出沉淀，加入丙酮溶液，加热溶解，保温30-60min，滤除明胶，得到滤液；(4)滤液回收丙酮，上大孔树脂吸附，先用水和10-20%乙醇溶液洗去杂质，再用60-70%的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥即得产品。本发明可得到含量较高的鞣质，含量可到65%以上，且工艺方法提取溶剂少，提取周期短，提取率高，易于实现产业化放大。
文档编号A61P29/00GK102283904SQ20111026485
公开日2011年12月21日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司