专利名称：：一种治疗糖尿病的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种治疗糖尿病的组合物，具体涉及主要由月季花或其提取物和牛磺酸组成的药物组合物，以及用该月季花或其提取物和牛磺酸的药物组合物治疗糖尿病或合并糖尿病的患者，及该药物组合物的制剂。技术背景糖尿病是一种多病因的代谢性疾病，随着人们生活水平的提高及饮食结构和生活方式的变化，糖尿病的发病率日益升高。据不完全统计，我国现有糖尿病患者近3000万人，每年还以70万人的发展速度增长。糖尿病有多种分型，主要可分为i型和n型糖尿病。i型为胰岛素依赖型，患者需要依赖注射胰岛素来控制血糖；n型为非胰岛素依赖型，患者可通过化学药物控制血糖。非胰岛素依赖型糖尿病患者占糖尿病患者总人数的90%左右，严重威胁着人们的健康和生命。西医治疗糖尿病大多使用磺脲类、双胍类与胰岛素等药物，其降血糖作用虽然明显，但不能调节身体的整体代谢机能，对糖尿病引发的代谢综合症也难以防治，停药后血糖均有不同程度的"反跳"现象。中药治疗糖尿病在这些方面已经日益显出其优越性，本发明中所提到的月季花或其提取物就是一个很好实例。1999年4月郭增军申请的CN99103552.6，公开了单独使用月季花用于降糖，或者月季花与香附、仙鹤草、赤芍合用治疗糖尿病。申请人2003年申请了中国专利CN200310121579.9，公开了月季花提取物的制备方法及其用于治疗糖尿病的用途。虽然以上教导可以让人想到月季花与其他药物合用治疗糖尿病，但是发明人经过大量试验，筛选得出，月季花或其提取物与牛磺酸合用不仅具有协同或相加治疗糖尿病的作用，临床前实验研究还显示出牛磺酸的使用还可以降低某种月季花提取物的毒性。牛磺酸是一种含硫氨基酸，存在于人的体内，具有多种生理功能，研究显示牛磺酸具有降血糖作用(袁敏生，黄泳齐.牛磺酸对糖尿病患者血糖的作用及疗效分析.药学进展.1996,20(4):225-227;李辉,李俭春,牛磺酸对糖尿病大鼠心肌组织肾素一血管紧张素系统的抑制作用.中华内分泌代谢杂志.1997,13(2):108-110;张能，张徽.牛磺酸对链脲佐菌素糖尿病大鼠胰岛0细胞的保护作用.中国糖尿病杂志.1998,6(1):30-33)，目前尚未有月季花提取物与牛磺酸合用的相关报道。
发明内容为了增加月季花的疗效，并降低月季花提取物的现有毒副作用，本发明提供了一种新的治疗糖尿病的药物组合物，主要由月季花或其提取物和牛磺酸组成，其重量比为120:150。本发明提供的治疗糖尿病的药物，由月季花或其提取物、牛磺酸按重量比为14:16组成。本发明提供的治疗糖尿病的药物还包含黄连素，月季花或其提取物、牛磺酸和黄连素的重量比为120:150:120。本发明提供的治疗糖尿病的药物，由月季花或其提取物、牛磺酸、黄连素按重量比为14:16:12.5组成。其中月季花提取物可采用下述任一方式提取，具体提取方法为1)使用中国专利200310121579.9中的月季花总酚酸的提取方法月季花加水提取，合并提取液，过分离柱，用水和醇或水和酸水依次洗脱，即得月季花提取物；2)使用中国专利200310121579.9中的月季花总多糖的提取方法月季花用石油醚脱脂，药渣挥干石油醚，加水提取，过滤，滤液浓縮，用乙醇进行沉淀，静置过夜，过滤，取沉淀，干燥即得月季花提取物；3)使用中国专利200310121579.9中的月季花总黄酮的提取方法醇提法得到的提取液，过滤，滤液合并，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，即得月季花提取物；4)用12倍量乙醇回流提取月季花两次，每次l-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓縮至适量，离心，加于已处理好的大孔吸附树脂上，依次用水及乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，或浓縮至适量，即得月季花提取物。提取方法4)中的乙醇浓度选30%、50%、70%、75%或85%。提取方法4)中的大孔树脂选AB-8型、X-5型、D-28Z0型、860021型、DM11型或CAD-40型。本发明的另一个目的是月季花或其提取物和牛磺酸的药物组合物用于治疗糖尿病或合并糖尿病的患者。本发明的目的还在于提供含有月季花或其提取物和牛磺酸的药物组合物的制剂，由治疗糖尿病的药物组合物与可药用辅料组成，以常规的制剂方法制备成任何一种常用剂型，如丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液、注射液等。本发明的优点在于1、通过药效学研究实验显示，月季花或其提取物和牛磺酸合用在降糖方面具有一定的协同作用，月季花提取物、牛磺酸和黄连素合用也具有协同降糖作用。2、通过毒性研究数据显示，月季花或其提取物和牛磺酸合用毒性比月季花提取物单方毒性小，复方中牛磺酸的使用降低了月季花提取物的毒性。具体实施方式以下通过实施例进一步阐述本发明药物的制备方法以及药效学研究和急性毒性研究，但是该实施例不应成为对本发明的限制。实施例l:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸10份2、月季花提取物的提取方法用12倍量30%的乙醇回流提取两次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇并浓縮至适量，离心，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂上，依次用水及50%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并浓縮至适量，喷雾干燥，粉碎，即得月季花提取物。3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例2:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸20份2、月季花提取物的提取方法用12倍量50%的乙醇回流提取两次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂上，依次用水及50%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，粉碎，即得月季花提取物。3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例3:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸30份2、月季花提取物的提取方法用12倍量85%的乙醇回流提取两次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇并浓縮至适量，离心，加于己处理好的X-5型大孔吸附树脂上，依次用水及30%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并浓縮至适量，喷雾干燥，粉碎，即得月季花提取物。3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例4:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花10份牛磺酸60份2、称取处方量的月季花，研磨粉碎，称取处方量的牛磺酸，与月季花粉末混合均匀，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例5:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸200份72、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例七。3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例6:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花10份牛磺酸500份2、称取处方量的月季花，研磨粉碎，过筛，再称取处方量的牛磺酸，与月季花粉末混合均匀，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例7:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物20份牛磺酸10份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例十五。3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例8:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物40份牛磺酸10份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例十三；3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例9:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物60份牛磺酸10份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例九；3、称取处方量的月季花提取物和牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例10:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物100份牛磺酸10份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例十六；3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例ll:治疗糖尿病药物的组合物处方月季花提取物200份牛磺酸10份月季花提取物的提取方法及制剂的制备方法同实施例1实施例12:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸10份黄连素5份2、月季花提取物的提取方法用12倍量70%的乙醇回流提取两次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，加于已处理好的X-5型大孔吸附树脂上，依次用水及30%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并浓縮至适量，喷雾干燥，粉碎，即得月季花提取物。3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸和黄连素，加入可药用辅料,以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例13:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸30份黄连素10份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例二十。3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸和黄连素，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例14:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸60份黄连素15份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例十七。3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸和黄连素，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例15:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物10份牛磺酸70份黄连素20份2、月季花提取物的提取方法参见CN200310121579.9的实施例十八。3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸和黄连素，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例16:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物20份牛磺酸10份黄连素25份2、月季花提取物的提取方法用12倍量30%的乙醇回流提取两次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇并浓縮至适量，离心，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂上，依次用水及50%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并浓縮至适量，喷雾干燥，粉碎，即得月季花提取物。3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸和黄连素，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。实施例17:治疗糖尿病药物的组合物1、处方月季花提取物20份牛磺酸120份黄连素50份2、月季花提取物的提取方法用12倍量50%的乙醇回流提取两次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇并浓縮至适量，离心，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂上，依次用水及50%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓縮成稠膏，喷雾干燥，粉碎，即得月季花提取物。3、称取处方量的月季花提取物、牛磺酸和黄连素，加入可药用辅料，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型。同时，本发明通过建立动物实验模型，进行了与功能主治有关的主要药效学实验和急性毒性试验数据分析。实施例18:对四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型的降糖作用实验动物昆明种小鼠180只，SPF级，体重18-22g,雌雄各半。实验仪器材料美国强生稳豪型血糖仪，四氧嘧啶(Sigma公司)，二甲双胍，月季花提取物(实施例3中月季花提取物的提取方法提取)，黄连素，牛磺酸，本发明的实施例3和实施例14为基础的药物，灭菌注射水，葡萄糖测定试剂盒，其余试剂均为国产分析纯。实验方法健康昆明种小鼠180只，禁食不禁水16h后，随机选择10只作为正常对照组，给生理盐水(0,2ml/10g)，其余170只小鼠禁食16小时后腹腔注射2。/。四氧嘧啶生理盐水溶液200mg/kg体重，给药72h后禁食不禁水16h，经眼眶取血，测定血糖值。血糖值大于llmmol/L的动物为糖尿病模型鼠，选取血糖浓度为1630mmol/l四氧嘧啶糖尿病模型小鼠进行实验，值得注意的是在注射四氧嘧啶一周后小鼠的血糖值不应小于15mmol/L和大于30mmol/L，以免动物发生自愈或由于血糖过高弓I起酮症酸中毒而死亡。根据血糖水平将模型小鼠随机分为模型组、阳性对照组(二甲双胍)、月季花提取物组、黄连素组、牛磺酸组、实施例3复方组、实施例14复方组，各组连续给药14天，服药方式为灌胃给药。小鼠自由采食、饮水，末次给药后所有动物禁食16小时，用强生稳豪型血糖仪及试纸测定各组小鼠尾静脉血糖值。实验结果-表1四氧嘧啶致糖尿病小鼠给药前后血糖体重值(5±S￡>)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注与正常对照组比较，#WP<0.01;与模型组比较，''P<0.01;与月季花提取物组比较，&&PO.01;与牛磺酸组比较，"PO.01;与黄连素组比较，％%PO.01结果显示，与正常对照组比较，各模型组血糖值显著升高，造模成功。与模型组比较，阳性对照组、牛磺酸组、实施例3复方组、实施例14复方组的血糖值明显降低，其他组对该糖尿病模型降糖作用不显著。月季花提取物和牛磺酸复方具有显著的降血糖作用，比月季花提取物和牛磺酸单方使用降糖作用更优；月季花提取物与牛磺酸、黄连素的复方降血糖作用效果明显，比月季花提取物、牛磺酸和黄连素单方使用的降糖作用更优。结论月季花提取物和牛磺酸合用具有一定的降糖协同作用；月季花提取物、牛磺酸和黄连素合用具有一定的降糖协同作用。实施例19:对链脲佐菌素加高糖高脂饲料致II型糖尿病大鼠的降糖作用实验动物Wistar雄性大鼠100只，SPF级，体重180-220g。实验仪器材料美国强生稳豪型血糖仪，鼠饲料和高脂饲料(基础词料100kg，全蛋粉6kg,蔗糖23kg，炼猪油26.5kg)，月季花提取物(按照实施例1中月季花提取物的提取方法提取)，二甲双胍，牛磺酸，本发明的实施例1为基础的药物，葡萄糖测定试剂盒，链脲佐菌素(规格lg/瓶，Sigma公司提供)，柠檬酸，其余试剂均为国产分析纯。实验方法健康Wistar雄性大鼠100只，体重180-220g，用高糖高脂词料喂养8周，8周后禁食不禁水16h，腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg(0.1mol/L柠檬酸pH4.2配制成1%溶液，注射时冰浴)。注射链脲佐菌素后14d，取血测血糖，选血糖大于8.0mmol/L的动物为造模成功的大鼠进行实验。根据血糖水平将糖尿病模型鼠随机分为5组(各组动物平均血糖值相差不大于lmmol/L)，每组10只，分别为阴性模型对照组、二甲双胍组、牛磺酸组、月季花提取物组、实例1复方组。各组连续给药30d，自由采食、饮水。末次给药后，所有动物禁食16小时后测血糖值，使用强生稳豪型血糖仪和试纸测大鼠尾静脉血糖值。实验结果表2链脲佐菌素致n型糖尿病大鼠模型给药前后血糖体重值(^士SD)分组动物数n给药剂量(g/kg)血糖值(mmol/L)体重(g)给药前给药后给药前给药后阴性模型对照组1016.6±78.7±2301±30286±48二甲双胍组100.2516.4±75.6±1'295±32299±47月季花提取物组100.216.4±77.0±2'288±28242±59牛磺酸组100.216.4±78.0±2313±29311±41实例1复方组90.416.6±76.4±0.4*&$311±41304±32注与模型组比较'P〈0.05;与月季花提取物组比较，&P<0.05;与牛磺酸组比较，$PO.05表2的结果表明，与模型组比较，二甲双胍组、月季花提取物组、实施例1复方组的大鼠血糖值明显降低，牛磺酸组对该糖尿病模型降糖作用较小。月季花提取物和牛磺酸组合的实例1复方比月季花提取物和牛磺酸单方使用降糖作用更优。结论月季花提取物和牛磺酸合用具有一定的降糖协同作用。12实施例20:月季花提取物与复方对小鼠的急性毒性比较实验动物昆明种小鼠48只，SPF级，体重20-30g，雌性。实验仪器材料电子天平，月季花提取物(按照实施例2中月季花提取物的提取方法提取)，牛磺酸，本发明的实施例2和实施例3为基础的药物。实验方法将小鼠随机分为4组，每组12只，分别为月季花提取物低剂量组、月季花提取物高剂量组、实例3复方组和实例2复方组。各组连续给药14d，自由采食、饮水。观察小鼠状态和死亡情况，末次给药后，所有动物禁食16小时后测体重值。实验结果表3对小鼠实验过程中的毒性数据(H5D)分<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>注与月季花提取物高剂量组比较'PO.05''PO.01表3结果显示，月季花提取物低剂量组有1只动物死亡，而实施例3复方组无动物死亡；月季花提取物高剂量组有2只动物死亡，而实施例2复方组无动物死亡。与月季花提取物低剂量组比较，实施例3复方组体重降低幅度小；与月季花提取物高剂量组比较，实施例2复方组体重降低幅度小，具有显著性差异。月季花提取物高剂量体重显著低于实施例2复方组体重。结论以上结果表明复方毒性比月季花提取物单方毒性低，说明复方中牛磺酸的使用降低了月季花提取物对小鼠的急性毒性。实施例21:月季花提取物与实施例1复方对大鼠的急性毒性比较实验动物Wistar大鼠48只，SPF级，体重180-300g，雄性。实验仪器材料电子天平，月季花提取物(按照实施例l中月季花提取物的提取方法提取)，牛磺酸，本发明的实施例l为基础的药物。实验方法将大鼠随机分为4组，每组10只，分别为月季花提取物低剂量组、月季花提取物高剂量组、实例1低剂量组和实例1高剂量组。各组连续给药30d，自由采食、饮水。观察小鼠状态和死亡情况，末次给药后，所有动物禁食16小时后测体重值。实验结果表4对大鼠实验过程中的毒性数据(^±<SD)分组给药剂量(g/kg)体重(g)(给药后)体重降低(g)动物死亡数月季花提取物低剂量组0.15242±59460月季花提取物高剂量组0.6268±55535实施例1低剂量组0.3304±32*70实施例1高剂量组1.2281±5680注与月季花提取物低剂量组比较'PO.05''PO.01表4结果显示，月季花提取物高剂:量组有5只动物死亡，而实施例1高剂量组、实施例1低剂量组均无动物死亡。实施例1复方低剂量组比月季花提取物低剂量组动物体重降低幅度小，具有显著性差异；实施例1复方高剂量组比月季花提取物高剂量组动物体重降低幅度小，具有显著性差异。月季花提取物组体重显著低于复方组体重。结论以上结果表明复方毒性比月季花提取物单方毒性低，说明复方中牛磺酸的使用降低了月季花提取物对大鼠的毒性。权利要求1、一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于主要由月季花或其提取物和牛磺酸组成，月季花提取物可采用下述任一方式提取1)使用中国专利200310121579.9中的月季花总酚酸的提取方法月季花加水提取，合并提取液，过分离柱，用水和醇或水和酸水依次洗脱，即得月季花提取物；2)使用中国专利200310121579.9中的月季花总多糖的提取方法月季花用石油醚脱脂，药渣挥干石油醚，加水提取，过滤，滤液浓缩，用乙醇进行沉淀，静置过夜，过滤，取沉淀，干燥即得月季花提取物；3)使用中国专利200310121579.9中的月季花总黄酮的提取方法醇提法得到的提取液，过滤，滤液合并，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，即得月季花提取物；4)用12倍量乙醇回流提取月季花两次，每次1-2小时，合并提取液，回收乙醇并浓缩至适量，离心，加于已处理好的大孔吸附树脂上，依次用水及乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，或浓缩至适量，即得月季花提取物。2、根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于由月季花和牛磺酸按重量比为120:150组成。3、根据权利要求2所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于月季花和牛磺酸重量比为14:16。4、根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于还包含黄连素，月季花、牛磺酸和黄连素的重量比为120:150:120。5、根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于月季花、牛磺酸和黄连素的重量比为14:16:12.5。6、根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于其中月季花提取物的具体提取方法4)中，使用的乙醇是浓度为30%、50%、70%、75%或85%乙醇。7、根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于月季花提取物的具体提取方法4)中，使用的大孔树脂为AB-8型、X-5型、D-28Z0型、860021、DM11型或CAD-40型大孔树脂。8、一种由月季花或其提取物和牛磺酸组成的药物组合物在治疗制备糖尿病药物中的应用。9、一种由月季花或其提取物和牛磺酸组成的药物组合物的制剂，其特征在于由主要由月季花和牛磺酸组成的治疗糖尿病的药物组合物与可药用辅料组成，以常规的制剂方法制备成任何一种常用剂型。全文摘要本发明涉及一种治疗糖尿病的药物组合物，主要由月季花提取物和牛磺酸组成，还可以包含黄连素，经过药效试验和急性毒理试验显示，牛磺酸的加入不仅增加了月季花提取物的药效，还降低了其毒性。文档编号A61K31/185GK101322762SQ20071012616公开日2008年12月17日申请日期2007年6月12日优先权日2007年6月12日发明者何颖娜,刘海丽,张宏武,张彦玲,张福军,李清娟,杨汉煜,乔肖,蔡东晨,倩赵申请人:石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司