专利名称：一种复方斑蝥总提取物制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种复方斑蝥总提取物制剂及其制备方法，属于中药制药 技术领域。
背景技术：
中药注射制剂是以中药材为原料，经提取、分离、精制等步骤制成的灭 菌制剂。它改变了中药传统的给药方式，具备药效迅速，生物利用度高，剂量更准确，适用于 不宜口服或急重症的病例，并可使某些药物发挥定向或定位给药等特点，较好地发挥了中 药治疗急病重症及疑难病的作用。但是，随着临床应用的日益增多，中药注射剂引起药物不 良反应的事件屡有发生，已引起广大医药工作者的关注。中药注射制剂发生不良反应的主 要原因在于中药注射剂原料的化学成份十分复杂，其中一些高分子化合物，如鞣质、动植 物蛋白极易引起过敏反应；另外，由于中药注射剂的生产工艺有欠成熟，造成个别批号药液 纯度欠佳，进而引起过敏反应。复方斑蝥由斑蝥、人参、黄芪、刺五加、三棱、半枝莲、莪术、山茱萸、女贞子、熊胆 粉、甘草共十一味药物组成，具有破血消瘦、攻毒蚀疮的作用，临床上主要用于治疗原发性 肝癌、肺癌、直肠癌、恶性淋巴瘤、妇科恶性肿瘤等，其中复方斑蝥胶囊为《国家卫生部药品 标准》中药成方制剂第十七册收载品种。目前公开的复方斑蝥药材提取工艺有很多，大致方 法有方中君药斑蝥的提取有粉末直接入药、氯仿浸泡提取或氯仿渗漉法提取；人参、山茱 萸、女贞子、半枝莲四味药材或粉碎成细粉入药，或采用水提/醇提方法获得清膏浓缩液; 黄芪等五味加水煎煮浓缩成稠膏；熊胆粉加水溶解。但是经研究发现，上述剂型工艺中还存 在药物直接入药导致杂质含量高、药液中成分变化不稳定、制备工艺中有效成分提取分离 不完善等缺点，不利于产品的质量控制；另外采用氯仿提取药材，生产安全性差，对环境影 响大；同时由于有效药物成分损失多，收率低，也使得大量具有抗肿瘤作用的多糖成分没有 得到利用。本申请人在研究的过程中发现将方中斑蝥药材采用醇提或者水提，熊胆粉直接入 药，其余九味药材先用水提或醇提得到粗提取物，然后进行有机溶剂萃取、大孔树脂吸附、 多次醇沉或者中空纤维柱超滤纯化有效成分。上述工艺引入了药材中所含有的大量多糖， 使疗效有所提高，但是其对多糖没有有效截留，这是由于多糖的分子量范围很大，极小分子 的多糖药用效率低，大分子量的多糖在注射给药中又容易引起不良反应；同时在大孔树脂 洗脱纯化步骤中，树脂的选择、洗脱液的选择、洗脱速度的控制都极大地影响了对有效成分 的获取。所以探索一种可行有效的中药注射制剂的制备方法，以提高疗效，降低中药注射制 剂的不良反应是医药工作者要解决的问题。

发明内容
本发明的目的在于提供一种复方斑蝥总提取物制剂及其制备方法。本发明将药 材分别进行醇、水分提，然后采用无机陶瓷膜微滤、有机膜超滤等膜分离技术结合树脂精制 处理相结合的方法对提取液进行纯化、分离和浓缩，富集有效成分，滤除杂质，从而降低了 药品的不良反应，提高了疗效。本发明所述复方斑蝥总提取物制剂是从斑蝥、人参、黄芪、刺五加、三棱、半枝莲、莪术、山茱萸、女贞子、熊胆粉、甘草中提取出的具有药用价值的提取物制成的制剂。按照重量配比计算，复方斑蝥总提取物制剂是用斑蝥4-12份、人参10-30份、黄芪 50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝莲60-180份、莪术16-48份、山茱萸20-60 份、女贞子20-60份、熊胆粉0. 4-1. 2份、甘草10-30份按制成。优选的配比为斑蝥7. 9份、人参19. 8份、黄芪99. 2份、刺五加99. 2份、三棱31. 7 份、半枝莲119份、莪术31. 7份、山茱萸39. 7份、女贞子39. 7份、熊胆粉0. 8份、甘草19. 8 份其中复方斑蝥提取物是按下述方法制成的步骤1)斑蝥粉碎成粗粉，用75% -95%的乙醇超声提取，提取液用水进行沉淀，过 滤，滤液高速离心，离心液浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步骤幻取人参切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人参提取液备用；药渣 与除熊胆粉外的黄芪等七味药材共水提取，提取液与人参醇提液混合，浓缩，过滤，精制，得 总皂苷提取物；步骤幻刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，浓缩， 无机膜过滤，树脂精制，得刺五加总苷提取物；步骤4)将上述刺五加总苷提取物、人参等共9味的总皂苷提取物混合均勻，用有 机膜进行超滤，然后与斑蝥素提取物混合，再加入熊胆粉混勻，即得复方斑蝥总提取物。具体的制备方法为步骤1)取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入6-10倍量 75% -95%的乙醇浸泡30-40分钟后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30_50Hz，提取 2-3次，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入6-10倍量的水，搅拌，静置，过 滤，滤液以10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥 素提取物；步骤2)取人参切片，用60%-90%乙醇浸泡10-14小时，然后回流提取2-4次，每 次加入乙醇6-10倍量、提取0. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇，得人参醇提取液备用；药渣 与除熊胆粉外的黄芪等七味药材加4-6倍量水提取2-4次，每次0. 5-2小时，合并提取液， 与人参醇提取液混合，适当浓缩，无机陶瓷膜进行过滤，过滤后的药液直接上聚酰胺柱，以 每秒0. 5-2ml过柱，用1-5倍柱体积去离子水洗脱，收集药液，用1_5倍柱体积0. 05-0.2% NaOH溶液洗脱，收集洗脱液调PH至4-6，得总皂苷提取物；步骤幻刺五加粉碎，用60%-80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、 提取0. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；将初提取液浓缩，无机陶瓷 膜进行过滤，过滤后的药液直接上聚酰胺柱，以每秒0. 5-2ml过柱，用1-5倍柱体积去离子 水洗脱，收集药液，用1-5倍柱体积0. 05-0. 2% NaOH溶液洗脱，收集洗脱液调PH至4_6，即 得刺五加总苷提取物；步骤4)将上述刺五加总苷提取物、人参等共9味的总皂苷提取物混合均勻，用有 机膜进行超滤，然后与斑蝥素提取物混合，再加入熊胆粉混勻，即得复方斑蝥总提取物。优选的制备方法为步骤1)取斑蝥，粉碎成60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入8倍量85%的乙醇 浸泡30分钟后超声振荡提取，时间30分钟，频率30-50HZ，提取3次，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入8倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速 度离心15分钟，离心液减压浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步骤2)取人参切片，用80%乙醇浸泡12小时，然后回流提取3次，每次加入乙醇 8倍量、提取1小时，合并提取液，回收乙醇，得人参醇提取液备用；药渣与除熊胆粉外的黄 芪等七味药材加5倍量水提取3次，每次1小时，合并提取液，与人参醇提取液混合，适当浓 缩，无机陶瓷膜进行过滤，过滤时分多次加入2-3倍药液体积量的水洗涤有效成分，过滤后 的药液直接上聚酰胺柱，以每秒Iml过柱，用2倍柱体积去离子水洗脱，收集药液，用2倍柱 体积0. 1 % NaOH溶液洗脱，收集洗脱液调PH至5，得总皂苷提取物；步骤幻刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小 时，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；将初提取液浓缩，无机陶瓷膜进行过滤， 过滤时分多次加入2-3倍药液体积量的水洗涤有效成分，过滤后的药液直接上聚酰胺柱， 以每秒Iml过柱，用2倍柱体积去离子水洗脱，收集药液，用2倍柱体积0. 1 % NaOH溶液洗 脱，收集洗脱液调PH至4-6，即得刺五加总苷提取物；步骤4)将上述刺五加总苷提取物、人参等共9味的总皂苷提取物混合均勻，用有 机膜进行超滤，然后与斑蝥素提取物混合，再加入熊胆粉混勻，即得复方斑蝥总提取物。本发明的复方斑蝥总提取物制剂可以根据需要加入一种或多种药学上可以接受 的载体，如稀释剂、赋形剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、粘合剂、表面活性剂、吸收促进剂、润滑 剂等等，按照药学领域的常规方法，制备需要的剂型。本发明所述的复方斑蝥总提取物制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、丸剂、水 针、输液、粉针和冻干粉针制剂等。优选为胶囊剂。中药材提取液的组分复杂，其中除了有效成分外还含有大量的杂质，各组分的结 构不同，分子大小也不一样，使用膜技术(包括超滤膜、微滤膜、半透膜、反渗透膜等)可以 在原生物体系环境下实现物质分离，可以高效浓缩富积产物，有效脱出杂质。陶瓷膜微滤 是以新型无机陶瓷膜为滤过介质的一种高效、节能、无污染的新型分离技术，具有分离精度 高，化学性质稳定，富集产物或滤除杂质效率高，无需加热浓缩、药效成分不被破坏，缩短生 产周期，提高生产效率等优点；树脂纯化是近年来国内外新发展的处理技术，并在医药领域 特别是天然药物精制中广为运用，是提取精制中草药中水溶性有效成分的一种有效方法。 因此，本发明采用无机陶瓷膜、聚酰胺树脂和有机膜相结合的方法纯化精制中药注射制剂， 其特点为用物理方法取代了传统的化学方法，可有效除去中药提取液中的大分子物质，同 时不引入其它的无机离子，较好地保持了中药复方制剂的特点，能有效降低药物的不良反 应。本发明所述的技术方案是申请人经过大量试验研究而获取的，主要试验内容如 下实验例1、提取工艺分析1. 1刺五加提取工艺原艾迪注射液的工艺是将刺五加与黄芪等共同煎煮，本发明人将刺五加单独进行 处理，与原方法进行比较，结果发现将刺五加单独提取更有利于后续工艺处理。1.1.1提取方法选择取刺五加药材，分别采用加水煎煮、乙醇回流两种方法进行提取，以含量、提取液色泽、澄明度为指标，考察药材的提取率。水提、醇提刺五加效果评价表
工艺色泽含量(mg/L)澄明度水提深棕褐色768浑浊醇提棕红1216澄明结果表明，采用醇提工艺，提取液经处理后澄明度较好、色泽较浅，浅棕红色；而水 提的刺五加在澄明度、色泽、含量等方面均较差，色泽较深，浅褐色。故选择醇提。1.1.2提取工艺研究提取溶媒的加入量，提取时间和次数是影响提取工艺的重要因素，以紫丁香苷含 量为指标，对以上参数进行考察，以优选最佳工艺条件。a.乙醇浓度考察样品制备取刺五加药材50g，粉碎，按下表浓度加入乙醇溶液，加热回流3次，每 次1小时，合并回流液，滤过。乙醇浓度考察表
乙醇浓度50%60%70%80%90%含量(mg/L)8621174121312201225表中数据显示，乙醇浓度为60% -80%时紫丁香苷几乎已经提取完全，其中70% 浓度为最佳，比较经济合理。b.提取时间考察取刺五加药材50g共6份，切片，同等乙醇量分别加热回流0. 5、1、1· 5、2、2· 5、3小 时，滤过，定容至一定体积，取样测定。结果如下提取时间考察表
提取时间0. 511. 522. 53含量(mg/L)95210831135115711761181由表中数据可看出，提取2小时后，紫丁香苷含量无明显改变，说明刺五加提取2 小时后，物质的溶出已趋于饱和。考虑到实际生产效率，优选提取时间为1小时。c.乙醇用量的考察样品制备取刺五加药材50g共3份，依下表条件加入不同量70%乙醇，加热回流 3次，每次1小时，滤过，收集滤液。结果如下乙醇用量考察表
权利要求
1.一种复方斑蝥总提取物制剂，按照重量配比计算，它是用斑蝥4-12份、人参10-30 份、黄芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝莲60-180份、莪术16-48份、山 茱萸20-60份、女贞子20-60份、熊胆粉0. 4-1. 2份、甘草10-30份制成，其特征在于其中 复方斑蝥总提取物是按下述方法制成的步骤1)斑蝥粉碎成粗粉，用75% -95%的乙醇超声提取，提取液用水进行沉淀，过滤， 滤液高速离心，离心液浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步骤幻取人参切片，用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，得人参提取液备用；药渣与除 熊胆粉外的黄芪等七味药材共水提取，提取液与人参醇提液混合，浓缩，过滤，精制，得总皂 苷提取物；步骤3)刺五加粉碎，用60%-80%的乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，浓缩，无机 膜过滤，树脂精制，得刺五加总苷提取物；步骤4)将上述刺五加总苷提取物、人参等共9味的总皂苷提取物混合均勻，用有机膜 进行超滤，然后与斑蝥素提取物混合，再加入熊胆粉混勻，即得复方斑蝥总提取物。
2.按照权利要求1所述的复方斑蝥总提取物制剂，其特征在于按照重量配比计算，它 是用斑蝥7. 9份、人参19. 8份、黄芪99. 2份、刺五加99. 2份、三棱31. 7份、半枝莲119份、 莪术31. 7份、山茱萸39. 7份、女贞子39. 7份、熊胆粉0. 8份和甘草19. 8份制成的。
3.按照权利要求1或2所述复方斑蝥总提取物制剂，其特征在于所述复方斑蝥总提 取物的制备方法为步骤1)取斑蝥，粉碎成40-60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入6-10倍量75 % -95 % 的乙醇浸泡30-40分钟后超声振荡提取，时间20-40分钟，频率30-50HZ，提取2_3次，合 并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入6-10倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以 10000转/分以上的速度离心10-20分钟，离心液减压浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步骤2)取人参切片，用60% -90%乙醇浸泡10-14小时，然后回流提取2-4次，每次加 入乙醇6-10倍量、提取0. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇，得人参醇提取液备用；药渣与除 熊胆粉外的黄芪等七味药材加4-6倍量水提取2-4次，每次0. 5-2小时，合并提取液，与人 参醇提取液混合，适当浓缩，无机陶瓷膜进行过滤，过滤后的药液直接上聚酰胺柱，以每秒 0. 5-2ml过柱，用1-5倍柱体积去离子水洗脱，收集药液，用1_5倍柱体积0. 05-0. 2% NaOH 溶液洗脱，收集洗脱液调PH至4-6，得总皂苷提取物；步骤幻刺五加粉碎，用60% -80%乙醇回流提取2-4次，每次加入乙醇6-10倍量、提 取0. 5-2小时，合并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；将初提取液浓缩，无机陶瓷膜 进行过滤，过滤后的药液直接上聚酰胺柱，以每秒0. 5-2ml过柱，用1-5倍柱体积去离子水 洗脱，收集药液，用1-5倍柱体积0. 05-0. 2% NaOH溶液洗脱，收集洗脱液调PH至4_6，即得 刺五加总苷提取物；步骤4)将上述刺五加总苷提取物、人参等共9味的总皂苷提取物混合均勻，用有机膜 进行超滤，然后与斑蝥素提取物混合，再加入熊胆粉混勻，即得复方斑蝥总提取物。
4.按照权利要求3所述复方斑蝥总提取物制剂，其特征在于所述复方斑蝥总提取物 的制备方法为步骤1)取斑蝥，粉碎成60目的粗粉，放入超声振荡器中，加入8倍量85%的乙醇浸泡30分钟后超声振荡提取，时间30分钟，频率30-50HZ，提取3次，合并提取液，静置，过滤，滤液减压浓缩成稠膏，加入8倍量的水，搅拌，静置，过滤，滤液以10000转/分以上的速 度离心15分钟，离心液减压浓缩，干燥，粉碎，得斑蝥素提取物；步骤2、取人参切片，用80%乙醇浸泡12小时，然后回流提取3次，每次加入乙醇8倍 量、提取1小时，合并提取液，回收乙醇，得人参醇提取液备用；药渣与除熊胆粉外的黄芪等 七味药材加5倍量水提取3次，每次1小时，合并提取液，与人参醇提取液混合，适当浓缩， 无机陶瓷膜进行过滤，过滤时分多次加入2-3倍药液体积量的水洗涤有效成分，过滤后的 药液直接上聚酰胺柱，以每秒Iml过柱，用2倍柱体积去离子水洗脱，收集药液，用2倍柱体 积0. 1 % NaOH溶液洗脱，收集洗脱液调PH至5，得总皂苷提取物；步骤3)刺五加粉碎，用70%乙醇回流提取3次，每次加入乙醇8倍量、提取1小时，合 并提取液，回收乙醇，即得刺五加初提取液；将初提取液浓缩，无机陶瓷膜进行过滤，过滤时 分多次加入2-3倍药液体积量的水洗涤有效成分，过滤后的药液直接上聚酰胺柱，以每秒 Iml过柱，用2倍柱体积去离子水洗脱，收集药液，用2倍柱体积0. 1 % NaOH溶液洗脱，收集 洗脱液调PH至4-6，即得刺五加总苷提取物；步骤4)将上述刺五加总苷提取物、人参等共9味的总皂苷提取物混合均勻，用有机膜 进行超滤，然后与斑蝥素提取物混合，再加入熊胆粉混勻，即得复方斑蝥总提取物。
5.按照权利要求1所述复方斑蝥总提取物制剂，其特征在于所述的复方斑蝥总提取 物制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、丸剂、水针、输液、粉针和冻干粉针制剂。
6.按照权利要求按照权利要求5所述复方斑蝥总提取物制剂，其特征在于所述的复 方斑蝥总提取物制剂为胶囊剂。
全文摘要
本发明公开了一种复方斑蝥总提取物制剂及其制备方法，它是用斑蝥4-12份、人参10-30份、黄芪50-150份、刺五加50-150份、三棱16-48份、半枝莲60-180份、莪术16-48份、山茱萸20-60份、女贞子20-60份、熊胆粉0.4-1.2份、甘草10-30份，将斑蝥醇提离心，人参、黄芪等分别进行醇、水分提，提取液经浓缩，无机陶瓷膜微滤，聚酰胺树脂精制，再用有机膜进行超滤，然后与斑蝥的提取液混合，再加入熊胆粉制成的不同制剂。与现有技术相比，本发明将药材分别进行醇、水分提，采用膜分离技术与树脂精制处理相结合的方法对提取液进行纯化、分离和浓缩，富集有效成分，有效除去中药提取液中的大分子物质，较好地保持了中药复方制剂的特点，有效降低了药物的不良反应，从而提高和保证了产品的质量。
文档编号A61K35/413GK102078560SQ20091010289
公开日2011年6月1日 申请日期2009年11月26日 优先权日2009年11月26日
发明者窦啟玲 申请人:贵州益佰制药股份有限公司