专利名称：一种药物组合物的指纹图谱质量检测方法
技术领域：
本发明属于药物(中药)分析领域，涉及一种含药物(中药)组合物的质量检测 方法，特别涉及一种含有薄荷油与香葵油的药物组合物的指纹图谱质量检测方法。
背景技术：
本项专利的申请人于2001年10月29日申请了名称为一种治疗肝胆结石的溶石 性药物及其制备方法的中国专利，申请号为01134090. 8，公开号为CN 1358530A。这项专利 申请提供了一种由薄荷油与香葵油(又名“香叶油”)为主要有效成分的治疗肝胆结石的药 物组合物及其制备方法，该药物被命名为“利胆溶石软胶囊”。多年来，申请人对上述药物组合物进行不懈地深入研究，已研究制定出一种指纹 图谱的质量检测方法，对上述药物组合物进行质量检测，可以更为全面、有效地控制该药物 组合物的质量。

发明内容
本发明的目的是提供一种含有薄荷油与香葵油(又名“香叶油”)的药物组合物的 指纹图谱质量检测方法。该检测方法适用于所述药物组合物的所有常规剂型，如胶囊剂、片剂、丸剂、软胶
囊剂等。依据现有技术，在本发明中，含有薄荷油与香葵油的药物组合物继续被命名为“利 胆溶石软胶囊”。本发明的目的是通过下列方式实现的一种采用气相色谱指纹图谱法对含有薄荷油与香葵油的药物组合物进行质量检 测，其标准指纹图谱至少包含有7个主要色谱峰，其中各色谱峰与参照峰(S号峰)之间的 相对保留时间为1号峰为0. 20 0. 50、2号峰为0. 30 0. 60、3号峰为0. 40 0. 80、4号 峰为0. 65 1. 15、5号峰为0. 70 1. 20、S号峰为1、6号峰为0. 90 1. 55 ；在上述的标准指纹图谱中，包含的主要色谱峰与参照峰(S号峰)之间的相对峰面 积为1号峰为0. 15 0. 35、2号峰为0. 15 0. 35、3号峰为0. 40 0. 75、4号峰为0. 30 0. 60、S号峰为1、6号峰为0. 15 0. 40 ；在本发明中，S号峰为薄荷脑的色谱峰。所述气相色谱指纹图谱检测方法的检测步骤为参照气相色谱法，结合指纹图谱的要求进行测定(1)色谱条件与系统适应性试验采用毛细管色谱柱，分流，程序升温法测定；(2)对照品溶液的制备取薄荷脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成溶液， 即得；(3)供试品溶液的制备取供试品，称定，加乙酸乙酯制成溶液，即得。(4)测定法精密吸取参照物溶液与供试品溶液，分别注入气相色谱仪，测定。上述检测方法优选的步骤为
(1)色谱条件与系统适应性试验用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物为固定 相的毛细管色谱柱；进样口温度220 260°C ；检测器温度220 260°C ；分流比为45 55 1 ；程序升温初始温度50°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至80°C，保持5分钟，以每分 钟2°C升至120°C，保持6分钟，再以每分钟10°C升至210°C，保持3分钟，测定；载气流速 1. 0 2. Oml/min ；(2)对照品溶液的制备取薄荷脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每Iml 含0. 8 1. 2mg的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取供试品约45 55mg，精密称定，置IOml容量瓶中，加乙 酸乙酯至刻度，摇勻，即得。(4)测定法精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1 20 μ 1，分别注入气相色谱 仪，测定。上述检测方法更为优选的步骤为参照气相色谱法，结合指纹图谱的要求进行测定(1)色谱条件与系统适应性试验用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物为固定相 的毛细管色谱柱；进样口温度240°C ；检测器温度240°C ；分流比为50 1 ；程序升温初 始温度50°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至80°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至120°C，保 持6分钟，再以每分钟10°C升至210°C，保持3分钟，测定；载气流速1. 5ml/min ；理论板数 按对照品(薄荷脑)峰计算，应不低于30000 ；(2)对照品溶液的制备取薄荷脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每Iml 含1. Omg的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取供试品约50mg，精密称定，置IOml容量瓶中，加乙酸乙 酯至刻度，摇勻，即得。(4)测定法精密吸取参照物溶液与供试品溶液各2μ 1，分别注入气相色谱仪，测 定；(5)检测结果供试品指纹图谱与标准指纹图谱经计算软件计算，相似度应大于 0. 85，为合格品。本发明技术方案中所述的供试品为利胆溶石软胶囊的内容物。本发明中所使用的计算软件为国家药典委员会提供中药色谱指纹图谱相似度评 价系统。对本发明指纹图谱质量检测方法的研究与说明一、概述利胆溶石软胶囊内容物由薄荷油、香葵油组成，为了更全面、有效的控制产品内在 质量，提高质量控制水平，和国际接轨，让临床用药安全及疗效更加有所保证，发明人参照 液相指纹图谱的要求，对利胆溶石软胶囊指纹图谱进行了研究，因为其主要成分薄荷脑、香 叶醇等均为挥发性成分，所以采用气相色谱法进行研究。色谱条件优选，建立了气相指纹图 谱测定条件并进行了方法学考察。在对十批利胆溶石软胶囊指纹图谱检测结果的基础上， 逐渐积累数据，提出了利胆溶石软胶囊的指纹图谱，作为指纹图谱的标准，从而达到能够更 全面、有效地控制制剂质量的目的。对所测得的指纹图谱的辨认，发明人采用中国药品生物检定所、浙江大学、空军雷
5达学院所提供的中药色谱图分析和数据管理系统，经多次试验研究，且通过与计算相对保 留时间及相对保留峰面积的方法相比较，所得出的评价结论基本一致，使用中药色谱图分 析和数据管理系统评价利胆溶石软胶囊指纹图谱的相似度，操作方便、快捷，以其得出的相 似度结果，对制剂指纹图谱进行评价，结论较为客观、准确。所以，发明人采用该软件做为利 胆溶石软胶囊指纹图谱相似度计算软件。二、指纹图谱质量检测标准的起草说明1、参照物利胆溶石软胶囊主要内容物为薄荷油及香葵油，主要成分都具有挥发性，发明人 通过试验研究，选择薄荷脑作为参照物。薄荷脑由中国药品生物制品检定所提供。2、供试品溶液的制备实验考察了用无水乙醇、乙酸乙酯作为溶剂，制备供试品，经过综合分析，发现用 乙酸乙酯作为溶剂，样品分离较好，且重复性好。该方法能够较多地保留了样品中的化学成 分，从而能够客观准确地对利胆溶石软胶囊中挥发性成分进行分析，达到有效控制质量的 目的。经研究，供试品溶液的制备方法为取供试品约50mg，精密称定，置IOml容量瓶 中，加乙酸乙酯至刻度，摇勻，即得。3、检测方法(1)仪器和试剂仪器Agilent 6890气相色谱仪色谱柱因挥发性成分多为非极性成分，且成分复杂，所以选用非极性固定相的细 口径毛细管色谱柱HP-5(5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物为固定相的毛细管色谱柱， 30mX0. 32mmX0. 25 μ m)。色谱条件发明人考察了不同的气相色谱分析条件，柱温是色谱条件的重要参数， 它对各组分分离的影响很大，发明人摸索了以下几种程序升温条件①起始50 °C (维持 5min)，3。C /min 升至 80 °C (维持 5min)，3。C 120°C (维持 3min)，再以 10°C /min 升至 210°C (维持 IOmin)②起始50 °C (维持 5min)，2。C /min 升至 80 °C (维持 5min)，2。C 120°C (维持 3min)，再以 10°C /min 升至 210°C (维持 3min)③起始50°C (维持 5min)，1。C /min 升至 80°C (维持 5min)，1。C 120°C (维持 3min)，再以 20°C /min 升至 210°C (维持 3min)实验结果表明起始50°C (维持5min)，2V /min升至80°C (维持5min)，2V /min 升至120°C (维持3min)，再以10°C /min升至210°C (维持3min)的程序升温条件下，色谱 峰的分离较好，其分离度、拖尾因子均符合规定。经过试验优选，最终确定测定条件为进样口温度240°C ；检测器温度(FID) 2400C ；分流比为50 1 ；程序升温初始温度50°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至80°C， 保持6分钟，再以每分钟2°C升至130°C，保持10分钟，再以每分钟10°C升至210°C，保持3 分钟，测定；载气流速1.5ml/min;进样量2μ1;理论板数按对照品(薄荷脑)峰计算，应 不低于30000。(2)稳定性试验
/min升至 /min升至 /min升至
取利胆溶石软胶囊，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，每隔3小时测定 指纹图谱，共测定6次，测定结果见表1，以0小时进样所得指纹图谱为对照计算相似度，相 似度结果均不小于0. 99，表明供试品溶液15小时内成分是稳定的，符合指纹图谱的技术要 求(不小于0. 95)。表1利胆溶石软胶囊气相指纹图谱稳定性试验的相似度分析结果
权利要求
一种含有薄荷油与香葵油的药物组合物的质量检测方法，其特征在于采用气相色谱指纹图谱法进行测定，其标准指纹图谱至少包含有7个主要色谱峰，其中各色谱峰与参照峰(S号峰)之间的相对保留时间为1号峰为0.20～0.50、2号峰为0.30～0.60、3号峰为0.40～0.80、4号峰为0.65～1.15、5号峰为0.70～1.20、S号峰为1、6号峰为0.90～1.55；S号峰为薄荷脑的色谱峰。
2.如权利要求1所述的标准指纹图谱，其特征在于该指纹图谱包含的主要色谱峰与参 照峰(S号峰)之间的相对峰面积为1号峰为0. 15 0. 35、2号峰为0. 15 0. 35、3号峰 为0. 40 0. 75、4号峰为0. 30 0. 60,S号峰为1、6号峰为0. 15 0. 40 ；S号峰为薄荷脑 的色谱峰。
3.如权利要求1或2所述气相色谱指纹图谱检测方法，其特征在于该检测方法的步骤为参照气相色谱法，结合指纹图谱的要求进行测定(1)色谱条件与系统适应性试验采用毛细管色谱柱，分流，程序升温法测定；(2)对照品溶液的制备取薄荷脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取供试品，称定，加乙酸乙酯制成溶液，即得。(4)测定法精密吸取参照物溶液与供试品溶液，分别注入气相色谱仪，测定。
4.如权利要求3所述检测方法，其特征在于 参照气相色谱法，结合指纹图谱的要求进行测定(1)色谱条件与系统适应性试验用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物为固定相的毛 细管色谱柱；进样口温度220 260°C;检测器温度220 260°C;分流比为45 55 1 ； 程序升温初始温度50°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至80°C，保持5分钟，以每分钟2V 升至120°C，保持6分钟，再以每分钟10°C升至210°C，保持3分钟，测定；载气流速1. 0 2.Oml/min ；(2)对照品溶液的制备取薄荷脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每Iml含0.8 1. 2mg的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取供试品约45 55mg，精密称定，置IOml容量瓶中，加乙酸乙 酯至刻度，摇勻，即得。(4)测定法精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1 20μ1，分别注入气相色谱仪，测定。
5.如权利要求4所述检测方法，其特征在于 参照气相色谱法，结合指纹图谱的要求进行测定(1)色谱条件与系统适应性试验用5%二苯基-95%二甲基硅烷共聚物为固定相的毛 细管色谱柱；进样口温度240°C ；检测器温度240°C ；分流比为50 1 ；程序升温初始温 度50°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至80°C，保持5分钟，以每分钟2°C升至120°C，保持6 分钟，再以每分钟10°C升至210°C，保持3分钟，测定；载气流速1. 5ml/min ；理论板数按对 照品(薄荷脑)峰计算，应不低于30000 ；(2)对照品溶液的制备取薄荷脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每Iml含1.Omg的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取供试品约50mg，精密称定，置IOml容量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇勻，即得。(4)测定法精密吸取参照物溶液与供试品溶液各2μ1，分别注入气相色谱仪，测定；(5)检测结果供试品指纹图谱与标准指纹图谱经计算软件计算，相似度应大于0.85。
6.如权利要求5所述计算软件，该软件为国家药典委员会提供中药色谱指纹图谱相似度评价系统。
全文摘要
本发明提供了一种含有薄荷油与香葵油的药物组合物的质量检测方法，其特征在于采用气相色谱指纹图谱法进行测定，其标准指纹图谱至少包含有7个主要色谱峰，其中各色谱峰与参照峰(S号峰)之间的相对保留时间为1号峰为0.20～0.50、2号峰为0.30～0.60、3号峰为0.40～0.80、4号峰为0.65～1.15、5号峰为0.70～1.20，S号峰为1、6号峰为0.90～1.55；S号峰为薄荷脑的色谱峰。本发明提供的质量控制方法，准确，精密，稳定性好，能够有效地控制药物制剂的质量。
文档编号A61K36/534GK101953884SQ20091014034
公开日2011年1月26日 申请日期2009年7月12日 优先权日2009年7月12日
发明者吴云, 毕宇安, 王振中, 窦霞, 章晨峰, 萧伟, 陈凤龙 申请人:江苏康缘药业股份有限公司