专利名称：京都酚逆序列修饰的脂肪胺/醇衍生物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种人工合成的多肽化合物，特别是涉及一种对二肽的羧基端用脂肪胺、脂肪醇进行保护修饰而得到的化合物及其制备方法以及在制备镇痛抗炎药物中的应用。
背景技术：
疼痛作为人类主要生命指征之一，具有重要的生物学意义。世界疼痛大会将疼痛确认为继呼吸、脉搏、体温和血压之后的“人类第5大生命指征”，众多患者正在忍受着疼痛的折磨。目前，临床上使用的镇痛药物都存在各自的毒副作用，例如阿片类镇痛药的成瘾性和水杨类镇痛药对胃肠道的刺激性，寻找镇痛药物是新药研究的热点之一。在镇痛剂设计 中发明人认识到京都酚逆序列(Arg-Tyr)是一种有潜力的镇痛二肽，以及口服活性差。按照这种认识，发明人对二肽的羧基端用脂肪胺、脂肪醇进行保护修饰，形成了本发明。

发明内容
本发明要解决的第一个技术问题是，提供通式I中的化合物(5a_l)Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 式中，X 为 NH 或 0;式中，n 为 6、8、10、12、14 或 16。对所合成的通式I中的化合物(5a_l)进行编号5a中X = NH，n = 6 ;5b中X =NH, n = 8 ；5c 中 X = NH, n = 10 ；5d 中 X = NH, n = 12 ；5e 中 X = NH, n = 14 ；5f 中 X =NH,n = 16 ；5g 中 X = 0,n = 6 ；5h 中 X = 0,n = 8 ；5i 中 X = 0,n = 10 ；5j 中 X = 0,n =12 ；5k 中 X = 0，n = 14 ；51 中 X = 0，n = 16。以上编码号只是为了方便描述，并无任何对发明的限制意义。本发明所要解决的第二个技术问题是提供通式化合物5a_l的制备方法，该方法包括(I)浓硫酸、浓硝酸条件下，Arg硝基化得Ne-Arg (NO2)；(2)弱碱性水二氧六环条件下，Nc-Arg(NO2)与(Boc)2O反应制得Na-Boc-Nc-Arg(NO2)，L-Tyr 与(Boc)2O 反应制得 Boc-Tyr ；(3)在 DCC 和 HOBt 存在下，Boc-Tyr 在无水 THF 中与脂肪胺(CH3(CH2)nCH2NH2,n = 6,8,10,12,14,16)或脂肪醇(CH3(CH2)nCH2OH, n = 6，8，10，12，14，16)缩合成Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 ；(4)在含氯化氢的乙酸乙酯中，Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3脱Boc保护，得Tyr-XCH2-(CH2)nCH3 ；(5)在 DCC 和 HOBt 存在下，Na-Boc-Nc-Arg(NO2)在无水 THF 中与Boc-Tyr-X-CH2 (CH2) nCH3 缩合，制备得到 Na-Boc-Ne-Arg (NO2) -Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ；(6)H2/Pd 条件下 Na-Boc-Ns-Arg(NO2)-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 脱-NO2 保护，得Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ；
(7)在含氯化氢的乙酸乙酯中，Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3脱Boc保护，得Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3O该制备方法可以用图I的路线概括。本发明所要解决的第三个技术问题是提供了所述的化合物在制备镇痛和抗炎药物中的应用。本发明所要解决的第四个技术问题是在小鼠热甩尾法模型上评价本发明的化合物的镇痛活性。本发明的第五个目的是在小鼠耳肿胀模型上评价本发明的化合物的抗炎活性。



图I为本发明通式5a_l化合物的合成路线示意图。i)DCC,HOBt,CH3(CH2)nCH2NH2(n = 6,8,10,12,14,16)或CH3(CH2)nCH2OH, (n = 6,8,10，12，14，16) ；ii)EtoAc/HCl,冰浴；iii)DCC, HOBt, Boc-Tyr ；iv)H2, Pd/C ；v)EtOAc/HCl,冰浴；5a 中 X = NH, n = 6 ;5b 中 X = NH, n = 8 ;5c 中 X = NH, n = 10 ;5d 中 X = NH, n =12 ；5e 中 X = NH, n = 14 ；5f 中 X = NH, n = 16 ；5g 中 X = 0，n = 6 ；5h 中 X = 0，n = 8 ;5i 中 X = 0，n = 10 ;5j 中 X = 0，n = 12 ；5k 中 X = 0，n = 14 ；51 中 X = 0，n = 16。
具体实施例方式为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。实施例 I 制备 Ns-Arg (NO2)冰盐浴搅拌条件下，向500ml茄瓶中加入80ml浓硝酸，然后缓慢加入80ml浓硫酸。IOmin后，分批加入47. 33g(272mmol)L-Arg，反应混合物冰盐浴下搅拌反应2h。向反应混合物中缓慢加入冰水96ml，然后缓慢加入浓氨水，调pH = 8，再用冰醋酸调pH = 6，有大量无色固体析出，放入4°C冰箱中继续析晶。减压过滤，弃去滤液，滤饼用80°C热水溶解，放入4°C冰箱中重结晶。室温下减压过滤，收集不溶物52. 5g，为无色固体，产率88% .ESI-MS (m/e) :220 [M+H]+ 实施例2 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2)称取I. 752g Nc-Arg (NO2)于反应瓶中，加入3ml水溶解，冰浴条件下，缓缓滴加INNaOH 8ml，将溶有I. 92g(Boc)20的二氧六环缓缓倒入其中，调反应液pH为9，反应48h，期间每隔2h用单通抽反应体系中CO2—次。TLC检测反应完全后,调反应液pH为7,旋除二氧六环，再调反应液PH为2，用乙酸乙酯萃取反应液三次，得到的乙酸乙酯层再用饱和NaCl萃洗三次，得到乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥过夜，过滤除去NaSO4,旋干乙酸乙酯得到标题化合物 2. 4g，为无色固体，产率 94% .ESI-MS (m/e) :320 [M+H]+.实施例3制备Tyr-OMe将120ml无水甲醇放入反应瓶中，冰浴搅拌下滴加10. 4ml氯化亚砜，30min内滴加完毕，分批加入7. 24g(40mmol) L-Tyr,反应混合物室温搅拌24小时，薄层层析监测至原料消失。水泵减压抽干反应液，加入甲醇溶解，抽干，重复3次；加入乙醚，抽干，重复3次。用甲醇-乙醚重结晶，过滤得标题化合物8. 78g，为无色固体，产率87% .ESI-MS(m/e)196 [M+H]+.实施例4制备Boc-Tyr称取0. 905g Boc-Tyr于反应瓶中，加入2ml水溶解，冰浴条件下，缓缓滴加INNa0H5ml，将溶有I. 199g (Boc)2O的二氧六环缓缓倒入其中，调反应液pH为9，反应48h，期间每隔2h用单通抽反应体系中CO2—次。TLC检测反应完全后,调反应液pH为7,旋除二氧六环，再调反应液PH为2，用乙酸乙酯萃取反应液三次，得到的乙酸乙酯层再用饱和NaCl萃洗三次，得到乙酸乙酯层用无水NaSO4干燥过夜，过滤除去NaSO4,旋干乙酸乙酯得到标题化合物 0. 91g，为无色固体，产率 65% .ESI-MS (m/e) :282 [M+H]+.实施例5 制备 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (Ia)将2. 256g (8. 03mmol) Boc-Tyr溶20ml无水四氢呋喃(THF)，冰浴下往里加 I.35g (IOmmol) N-羟基苯并三唑(HOBt)和2. 472g (12mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将I. 29g(IOmmol) CH3(CH2)7NH2溶于20ml无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶，用N-甲基吗啉(NMM)调pH = 8 9。得到的反应混合物室温反应24小时。TLC(展开剂CHCl3 CH3OH = 30 I)显示CH3(CH2)7NH2消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，重结晶纯化，得到标题化合物2. Og，为无色固体，产率64% . ESI-MSWe) :415. 7[M+Na]+.实施例6 制备 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (Ib)按照实施例5 的方法，3. 472g (12mmol) Boc-Tyr 与 I. 57g (IOmmol) CH3 (C-H2) 9NH2 反应，得到标题化合物3. lg，为无色固体，产率74% . ESI-MS (m/e) :443. 5 [M+Na]+.实施例7 制备 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 (Ic)按照实施例5 的方法，3. 372g(12mmol) Boc-Tyr 与 I. 85g (IOmmol) CH3 (C-H2) nNH2 反应，得到标题化合物3. 45g，为无色固体，产率77% .ESI-MS (m/e) :471. 5 [M+Na]+.实施例8 制备 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (Id)按照实施例5 的方法,5. 48g Boc-Tyr (18mmol)与 3. 215g (15mmol) CH3 (C-H2) 13NH2反应，得到标题化合物5. 81g，为无色固体，产率81% .ESI-MS (m/e) :499. 5 [M+N4a]+.实施例9 制备 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (Ie)按照实施例5 的方法，3. 372g(12mmol) Boc-Tyr 与 2. 42g (IOmmol) CH3 (C-H2) 15NH2 反应，得到标题化合物3. 17g，为无色固体，产率63% .ESI-MS (m/e) :527. 7 [M+Na]+.实施例10 制备 Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (If)按照实施例5 的方法，5. 062g(18mmol)Boc-Tyr 与 4. 035g(15mmol) CH3-(CH2) 17NH2反应，得到标题化合物7g，为无色固体，产率88% .ESI-MS (m/e) :555. 5 [M+Na]+.实施例11 制备 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (Ig)将4. 125g(15mmol) Boc-Tyr溶于30ml无水四氢呋喃(THF),冰浴下往里加0. 525g(15mmol)N-羟基苯并三唑(HOBt)和3. 708g(18mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。
将2. 34g(18mm0l) CH3 (CH2)7OH溶于20ml无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶。得到的反应混合物室温反应24小时。TLC(展开剂CHCl3 CH3OH =30 I)显示Boc-Tyr消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，柱层析纯化，得I. 204g标题化合物，为无色油状物，产率20% .ESI-MS (m/e) :416. 7 [M+Na]+.实施例12 制备 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (Ih)按照实施例11 的方法，3. 372g(12mmol) Boc-Tyr 与 2. 775g (15mmol) CH3- (CH2)9OH反应，得到标题化合物2. 5g，为无色油状物，产率49% .ESI-MS (m/e) :444. 7 [M+Na]+.实施例13 制备 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (Ii) 按照实施例24 的方法，2. 81g (IOmmol) Boc-Tyr 与 2. 232g (12mmol) CH3-(CH2) n0H反应，得到标题化合物I. 4g，为无色油状物，产率31% . ESI-MS (m/e) :472. 8 [M+Na]+.实施例14 制备 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 (Ij)按照实施例11 的方法，5. 058g (19. 8mmol) Boc-Tyr 与 4. 922g (23mmol)CH3- (CH2) 130H反应，得到标题化合物2. 2g，为无色油状物，产率23 % . ESI-MS (m/e)500. 7[M+Na]+.实施例 I5 制备 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (Ik)
按照实施例11 的方法，5. 06g(20mmol) Boc-Tyr 与 5. 808g (24mmol) CH3-(CH2) 150H反应，得到标题化合物2. 4g，为无色油状物，产率24% . ESI-MS (m/e) :528. 8 [M+Na]+.实施例I6 制备 Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (11)按照实施例11 的方法，6. 744g (24mmol) Boc-Tyr 与 5. 4g (20mmol) CH3-(CH2) 170H 反应，得到标题化合物2. 9g，为无色油状物，产率27% . ESI-MS (m/e) :556. 8 [M+Na]+.实施例17 制备 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (2a)3. Og (7. 65mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2)6CH3 溶于适量乙酸乙酯，加入约 25ml4N 无水氯化氢-乙酸乙酯液，室温搅拌3小时，TLC(展开剂石油醚丙酮=5 I)显示原料点消失。反应混合液在室温下减压浓缩，残留物再用乙酸乙酯溶解并室温下浓缩，如此反复4 次；然后向浓缩物中加入乙醚，室温下减压浓缩，如此反复3次，直至除净游离的氯化氢，得标题化合物2. 45g，为无色固体，产率97% .ESI-MS (m/e) :293. 5 [M+H]+.实施例18 制备 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (2b)按照实施例17 的方法，以 3. Ig (7. 38mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 为原料，得标题化合物 2. Olg,为无色固体，产率 97% ESI-MS (m/e) :321. 5 [M+H]+.实施例19 制备 HCl Tyr-NH CH2 (CH2) 10CH3 (2c)按照实施例17 的方法，以 2. 75g (5. 58mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 为原料，得标题化合物 2. 05g，为无色固体，产率 94% .ESI-MS (m/e) :349. 5 [M+H]+.实施例 20 制备 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (2d)按照实施例17 的方法，以 4. Og (8. 4mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 为原料，得标题化合物 2. 98g，为无色固体，产率 86% .ESI-MS (m/e) :377. 6 [M+H]+.实施例21 制备 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (2e)
按照实施例17 的方法，以 3. 17g (6. 29mmol) Boc-Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 为原料，得标题化合物 2. 67g，为无色固体，产率 96% .ESI-MS (m/e) :405. 6 [M+H]+.实施例22 制备 HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (2f)按照实施例17 的方法，以 7. Og(13. 2mmol)Boc-Tyr-NHCH2(CH2)16CH3 为原料，得标题化合物 5. 5g，为无色固体，产率 89% .ESI-MS (m/e) :433. 5 [M+H]+ 实施例23 制备 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (2g)按照实施例17的方法，以2. 2g (5. 6mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3为原料，得标题化合物 I. 8g，为无色固体，产率 98% ESI-MS (m/e) :294. 7 [M+H]+.实施例24 制备 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (2h)按照实施例17的方法，以2. 5g (5. 94mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3为原料，得标题 化合物 2. 02g，为无色固体，产率 95% . ESI-MS (m/e) :322. 6 [M+H]+.实施例25 制备 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (2i)按照实施例17 的方法，以 I. 9g (4. 23mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 为原料，得标题化合物 I. 53g，为无色固体，产率 94% . ESI-MS (m/e) :350. 5 [M+H]+.实施例26 制备 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 (2j)按照实施例17 的方法，以 2. 2g (4. 61mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 为原料，得标题化合物 I. 87g，为无色固体，产率 98% .ESI-MS (m/e) :378. 6 [M+H]+.实施例27 制备 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (2k)按照实施例17 的方法，以 2. 4g (4. 75mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 为原料，得标题化合物 2. 02g，为无色固体，产率 96% . ESI-MS (m/e) :406. 6 [M+H]+.实施例28 制备 HCl Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (21)按照实施例17 的方法，以 2. 9g (5. 44mmol) Boc-Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 为原料，得标题化合物 2. 46g，为无色固体，产率 97% . ESI-MS (m/e) :434. 5 [M+H]+.实施例29 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OMe将2. 807g (8. 8mmol) Na-Boc-Nc-Arg (NO2)溶于 20ml 无水四氢呋喃(THF)，冰浴下往里加I. 08g(8mmol)N-轻基苯并三唑(HOBt)和I. 978g (9. 6mmol) 二环己基羰二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将I. 852g(6. 57mmol)HCl Tyr-OMe溶于30ml无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶，用N-甲基吗啉(NMM)调pH = 8 9。得到的反应混合物室温反应14小时。TLC显示HCl .Tyr-OMe消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次,饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，柱层析纯化，得标题化合物 I. 7g，为无色固体，产率 52% .Mp 72°C,Mo = - 89.1 (c = 1.04, CH3OH),ESI-MS (m/z) 519. 6 [M+Na]+. IR(KBr) 3325. 14, 2958. 48 , 1657. 85, 1524. 64,1260.73.屮-匪1 (3001泡，01^0-(16) 8 /ppm = 9. 21 (s，1H)，8. 49 (s，1H)，8. 12-8. 09 (d，J=9Hz, 1H), 7. 90-7. 88 (m, 1H), 6. 70-6. 97 (d, J = 9Hz，2H)，6. 83—6. 81 (d，J = 6Hz，lH)，6. 67-6. 64 (d, J = 9Hz，3H)，4. 43-4. 37 (Q, J = 6Hz，lH)，3. 95-3. 93 (m，1H)，3. 13-3. 11 (d, J=6Hz,2H)，2. 88-2. 81 (m, 2H)，I. 57-1. 52 (m, 2H)，I. 45 (s, 2H)，I. 38 (s,9H).
实施例30 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (3a)将I. 914g(6mmoI)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)溶于 20ml 无水四氢呋喃(THF),冰浴下往里加0. 599g (4. 44mmo1) N-轻基苯并三唑(HOBt)和I. 098g (5. 33mmol) 二环己基擬二亚胺(DCC)的无水THF溶液。反应混合物冰浴搅拌30分钟，得对应的活泼酯溶液，待用。将I. 46g (4. 44mmol) HCl Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 溶于 30ml 无水四氢呋喃(THF)，然后与上面待用的活泼酯溶液混溶，用N-甲基吗啉(NMM)调pH = 8 9。得到的反应混合物室温反应14小时。TLC显示HCl Tyr-NHCH2(CH2)6CH3消失。反应混合物减压浓缩至干，残留物用乙酸乙酯溶解，滤除不溶物。滤液依次用5%碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次；5%硫酸氢钾水溶液洗3次,饱和氯化钠水溶液洗3次和饱和碳酸氢钠水溶液洗3次，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出的乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥、过滤、滤液32°C减压浓缩，柱层析纯化，得标题化合物I. 5g，为无色固体，产率57% .Mp87 0C, [a]2D° =- 120.1 (c= 1.01,CH3OH), ESI-MS (m/z) :592. 9 [M-H]'IR(KBr) :3318. 41, 2930.42，1650. 26，1529. 87，1263. 40,684. 95. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 11 (s，1H), 8. 45 (s, 1H), 7. 78 (m, 1H), 7. 70-7. 67 (d, J = 9Hz，2H)，6. 97—6. 94 (d，J = 9Hz，2H)，
6.63-6. 61 (d, J = 6Hz,2H)，4. 40-4. 33 (Q, J = 6Hz, 1H)，3. 86-3. 84 (m, 1H)，3. 10-2. 90 (m,4H), 2. 83-2. 72(m，2H)，I. 54-1. 47(m，6H)，I. 38(s，9H)，I. 23 (s，10H) ,0. 88-0. 84 (t, J =
6.0Hz,3H).实施例31 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (3b)按照实施例30 的方法,3. 062g (9. Bmmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 2. 56g (7. 18mmo1)HCl Tyr-NH-CH2 (CH2)8CH3反应，得标题化合物3. 05g，为无色固体，产率68% .Mp 98 °C，[a]2° = - 85.7 (c = 2.05, CH3OH), ESI-MS (m/z) :644. 3 [M+Na]+ IR (KBr) :3312. 67,2934. 92，1646. 79，1529. 90，1262. 13，1165. 64,683. 16. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 15 (s，lH) ,8.49-8. 47 (m，lH)，7.91 (s，lH)，7.81 (m，2H) ,7.72-7. 69 (d，J = 9Hz,1H) ,6. 97-6. 94 (d, J = 9Hz，3H)，6. 63—6. 61 (d，J = 6Hz，2H)，4. 39—4. 34 (m，1H)，3. 84 (s，1H)，3. 09 (m, 2H)，3. 03-2. 89 (m, 1H)，2. 83-2. 69 (m, 2H)，I. 54-1. 47 (m, 2H)，I. 38 (s,9H)，I. 44-1. 37(m，4H)，I. 23 (m, 10H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例32 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 (3c)按照实施例30 的方法，I. 914g (6mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 2. 05g (5mmol)HCl Tyr-NH-CH2(CH2) 10CH3反应，得标题化合物2. 2g，为无色固体，产率64% .Mp 104°C,[a]2D° = - 32.8 (c = 6.8, CH3OH), ESI-MS (m/z) :672. 3 [M+Na]+ IR (KBr) :3319. 46,
2925.19,2855. 17，1638. 89，1520. 02，1260. 59，1166. 98,684. 44. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 15(s，lH)，8. 47 (s，1H)，7. 91 (s，1H)，7. 81 (s，2H)，7. 72-7. 70 (d, J = 6Hz，lH)，
6.96-6. 93 (d, J = 9Hz,3H)，6. 63-6. 60 (d, J = 9Hz,2H)，4. 39 (s, 1H)，3. 84 (s, 1H)，3. 08 (m,2H)，3. 03-2. 94 (m, 1H)，2. 80-2. 72 (m, 1H)，I. 37 (m, 15H)，I. 22 (s, 18H)，0. 86-0. 82 (t, J =
6.0Hz,3H).实施例33 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (3d)按照实施例30 的方法，I. 6g (5mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 I. 504g (3. Bmmol)HCl Tyr-NH-CH2(CH12CH3反应，得标题化合物0. 81g，为无色固体，产率33% .Mp 105°C,[a]2D° = - 207.8 (c = 0.73, CH3OH), ESI-MS (m/z) 700. 3 [M+Na]+. IR(KBr) :3326. 27,2930.89,2342. 47，1652. 85，1529. 62，1263. 94,672. 84. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 16 (s, 1H), 8. 48 (s, 1H), 7. 94 (s, 1H), 7. 82 (m, 1H), 7. 72-7. 70 (d, J = 6Hz，lH)，
7.00 (s,2H)，6. 96-6. 93 (d, J = 9Hz,2H)，6. 63-6. 60 (d, J = 9Hz,2H)，4. 37-4. 35 (m, 1H)，
3.83 (m, 1H), 3. 08 (m, 2H), 3. 03-2. 89 (m, 3H), 2. 86-2. 67 (m, 1H)，I. 37 (s, 9H)，I. 22 (m, 28H)，
0.86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例 34 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (3e)按照实施例30 的方法，I. 914g (6mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)与 2. Og (5mmol)HCl Tyr-NH-CH2 (CH2) 14CH3反应，得标题化合物I. 96g，为无色固体，产率56% .MpllO0C,[a]2D° = - 64.0 (c = 2.86, CH3OH), ESI-MS (m/z) :728. 5 [M+Na]+ IR (KBr) :3321. 22, 2931.61，1638. 03，1533. 06，1258. 94,685. 21. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 14 (s，1H)，8. 48 (s, 1H)，7. 94-7. 92 (m, 1H)，7. 84-7. 80 (d, J = 6Hz, 1H)，7. 72-7. 70 (d, J = 6Hz,1H) ,7. 00-6. 98 (d, J = 6Hz, 1H) ,6. 96-6. 93 (d, J = 9Hz,2H) ,6. 62-6. 59 (d, J = 9Hz,2H), 4. 39-4. 33 (Q, J = 6Hz 1H), 3. 85-3. 83 (m, 1H), 3. 08-3. 00 (m, 3H), 2. 97-2. 70 (m, 1H)，
2.81-2. 69(m，2H)，I. 58-1. 45 (m, 6H)，I. 37(s，9H)，I. 22(s，26H)，0. 87-0. 83 (t, J = 6. OHz,3H).实施例35 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (3f)按照实施例30 的方法，I. 914g(6mmol)Na-Boc_NG-Arg(NO2)与 2. 16g(4. Bmmol)HCl Tyr-NH-CH2 (CH2) 16CH3反应，得标题化合物I. 74g，为无色固体，产率52% . Mp 108°C，[a]2° = - 299.2 (c = 0.44, CH3OH), ESI-MS (m/z) 756. 4[M+Na]+. IR(KBr) :3318. 16,2934. 39,2344. 03，1648. 16，1529. 94，1262. 19,678. 71. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 14 (s, 1H), 8. 48 (s, 1H), 7. 91 (s, 1H), 7. 82 (m, 1H), 7. 72-7. 69 (d, J = 9Hz，lH)，7.21-7. 19 (m, 1H), 7. 00 (m, 1H), 6. 96-6. 94 (d, J = 6Hz，2H)，6. 63—6. 60 (d，J = 9Hz，2H)，
4.37-4. 31 (m, 1H)，4. 14-4. 08 (Q, 1H)，3. 18-3. 16 (m, 2H)，3. 07-2. 98 (m, 2H)，2. 95-2. 91 (m,1H), 2. 84-2. 67 (m, 1H)，I. 38 (m, 15H)，I. 22(m，30H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例36 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (3g)按照实施例30 的方法，I. 914g(6mmol)Na-Boc_NG-Arg(NO2)与 I. 64g(4. 98mmol)HCl Tyr-O-CH2(CH2)6CH3反应，得标题化合物I. 4g，为无色固体，产率47% .Mp 55。。，[af° = 102 (c = 3.93, CH3OH), ESI-MS (m/z) :617. 5 [M+Na]+ IR (KBr) :3326. 55,2940. 62，1652. 29，1523. 28，1262. 36,574. 71. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 24 (s，1H)，8. 13-8. 11 (d, J = 6Hz，lH)，7. 00-6. 97 (d, J = 9Hz，2H)，6. 86-6. 83 (d, J = 9Hz，lH)，
6.66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 38-4. 34 (t，J = 6Hz，1H)，3. 97-3. 93 (t，J = 6Hz 3H)，
3.11 (s，2H)，2. 86-2. 84 (m, 2H)，I. 62-1. 58 (m, 2H)，I. 57-1. 45 (m, 4H)，I. 37 (s,9H)，I. 23 (s,10H) ,0. 88-0. 84(t, J = 6. 0Hz,3H).实施例37 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (3h)按照实施例30 的方法，2. 105g (6. Bmmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2)与 2. 2g (6. 15mmol)HCl .Tyr-OCH2(CH2)8CH3反应，得标题化合物2. 0g，为微黄色固体，产率49% .Mp 65。。，[a]2° = 131.6 (c = 1.76, CH3OH ) , ESI-MS (m/z) :645. 6 [M+Na]+ IR (KBr) :3328. 67,2934. 64，1648. 66，1520. 60，1263. 29,566. 41. 1H-MirOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =9. 24 (s, 1H) ,8. 13-8. 10 (d, J = 9Hz, 1H) ,7. 00-6. 97 (d, J = 9Hz,2H) ,6. 86-6. 83 (d, J=9Hz,2H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H) ,4. 38-4. 34 (t, J = 6Hz，1H)，3. 97—3. 93 (t，J =6Hz 3H)，3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 84 (m, 2H)，I. 57-1. 46 (m, 6H)，I. 37 (s,9H)，I. 23 (s, 14H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例38 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (3i)按照实施例30 的方法，I. 194g(6mmol)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)与 I. 3g(3. 37mmol)HCl Tyr-OCH2(CH2)ltlCH3反应，得标题化合物I. 05g，为无色固体，产率48 % .Mp 60。。，[a]2D° = - 75.9 (c = 2.53, CH3OH), ESI-MS (m/z) :673. 8 [M+Na]+ IR (KBr) :3325. 14,
2932.24，1650. 58，1524. 25，1263. 84，566. 08. 1H-MirOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =9. 23(s, 1H) ,8. 12-8. 09(d, J = 9Hz，1H)，7. 00—6.97 (d，J = 9Hz，2H)，6. 85—6.82 (d，J=9Hz,2H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz,2H) ,4. 38-4. 34 (t, J = 6Hz，1H)，3. 97—3. 93 (t，J = 6Hz 3H) ,3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 84(m，2H)，I. 57-1. 46 (m, 6H)，I. 37(s，9H)，I. 23 (s，18H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例39 制备 N°-Boc-NG-Arg(N02)-Tyr-0CH2(CH2)12CH3 (3j)按照实施例30 的方法，I. 76g (5. 52mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)与 2. Ig (5. 08mmol)HCl Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 反应，得标题化合物 I. 04g，产率 32 % .Mp 61 °C，[a]2° = - 119.8 (c = 1.98, CH3OH), ESI-MS(m/z) :679. 8[M+H]+. IR(KBr) :3325. 27，
2933.53，1652. 46，1524. 26，1262. 52,571. 07. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 23 (s,1H)，8. 51 (s，1H)，8. 11-8. 09 (d, J = 6Hz, 1H)，6. 99-6. 96 (d, J = 9Hz,2H)，6. 85-6. 82 (d, J =9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 35 (t, J = 6Hz, 1H)，3. 97-3. 93 (t, J = 6Hz,3H), 3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 84 (m, 2H)，I. 57(m，2H)，I. 46 (m, 4H)，I. 37(s，9H)，I. 23(s，22H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例40 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (3k)按照实施例30 的方法，1.837g (5. 76mmol)N°-Boc-NG-Arg (NO2)与
1.94g (4. 39mmol) HCl Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 反应，得标题化合物 I. 8g，为无色固体，产率 58 % .Mp 64. 7 V，[a]2^ = - 5.3 (c = 0.6, CH3OH), ESI-MS(m/z) :707. 9[M+H]+ IR(KBr) :3322. 96,2933. 28,2855. 09，1659. 90，1519. 15，1264. 00，569. 82. 1H-NMR (300MHz,DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 22 (s，1H)，8. 51 (s，1H)，8. 11-8. 08 (d, J = 9Hz，1H)，6. 99-6. 96 (d，J = 9Hz，2H)，6. 85-6. 82 (d, J = 9Hz，1H)，6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 35 (m, 1H)，
3.97-3. 93 (t，J = 6Hz，3H)，3. 11 (s，2H)，2. 86-2. 85(m，2H)，I. 58 (m, 2H)，I. 46(m，4H)，I. 38(s,9H)，I. 23(s,26H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例41 制备 N° -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (31)按照实施例30 的方法，2. Ig (6. 58mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)与 2. 55g (5. 44mmo1)HCl Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3反应，得标题化合物I. 9g，为无色固体，产率48 % Mp 72 °C，[a]2D° = - 39.3 (c = 1.18, CH3OH), ESI-MS (m/z) :736. 3 [M+H]+ IR (KBr) :3323. 01,
2925.30,2854. 27，1655. 84，1518. 10，1262. 25，1126. 54,567. 18. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 23(s，lH)，8. 51(s，lH)，8. 12-8. 09 (d, J = 9Hz，1H)，6. 99-6. 96 (d，J = 9Hz,2H), 6. 86-6. 83 (d, J = 9Hz, 1H) ,6. 66-6. 63 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 35 (t, J = 6Hz, 1H)，
3.97-3. 93 (t，J = 6Hz，3H)，3. 11 (s，2H)，2. 98-2. 89 (m, 2H)，I. 58 (m, 2H)，I. 45(m，4H)，
I.37(s,9H)，I. 23(m,30H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).
实施例42制备Arg-Tyr取I. 8g(3. 63mmol)Na-Boc-Nc-Arg(NO2)-OMe 于反应瓶中，加入适量甲醇溶解，冰浴搅拌条件下缓慢加入IN NaOH水溶液至pH = 12，冰浴下搅拌反应2h。TLC监测Boc-Arg (NO2) -Tyr-OMe消失后，用饱和KHSO4调节反应液pH为7，蒸去甲醇，再将反应液pH调节为2，用乙酸乙酯萃洗反应液三次，得到的乙酸乙酯层用饱和NaCl洗涤三次，随后用无水硫酸钠干燥过夜。滤除硫酸钠，旋除乙酸乙酯得Boc-Arg(NO2)-Tyr I. 2g,为无色固体。将800mg(l. 66mmol)N°-Boc-NG-Arg(N02)-Tyr 用 IOml CH3OH 溶解，再加入 240mgPd/C(5% )，减压排出反应瓶中的空气，通入氢气置换，反复置换三次后，通氢气室温搅拌反应，直至TLC显示Boc-Arg(NO2)-Tyr消失。停止反应,滤除Pd/C,滤液减压浓缩至干,得Boc-Arg-Tyr 704mg,为无色固体。取704mg (I. 61mmol) Na-Boc-Ne-Arg-Tyr 溶于适量乙酸乙酯,加入约 20ml 4N 盐酸乙酸乙酯液，室温搅拌3小时，TLC显示原料点消失。反应混合液在室温下减压浓缩，残留物再用乙酸乙酯溶解并室温下浓缩，如此反复5次；然后向浓缩物中加入乙醚，室温下减压 浓缩，如此反复5次，直至除净游离的氯化氢，得标题化合物480mg，为白色固体，产率59% .Mp 123-124 °C, [a]2° = - 7.1 (c = 2.21, CH3OH), ESI-MS (m/z) 338. 2 [M+H]+. IR(KBr)3174. 85，1665. 97，1513. 64，1233. 75,826. 70,565. 01. 1H-MffiGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 38 (s, 1H)，9. 17-9. 15 (m, 1H)，8. 98-8. 95 (m, 1H)，8. 42-8. 38 (m, 1H)，7. 95-7. 91 (m,1H)，7. 58-7. 53 (m, 1H)，7. 42-7. 39 (m, 1H)，7. 25-7. 22 (m, 1H)，7. 09-7. 06 (d, J = 9Hz,2H)，
6.69-6. 67 (d, J = 6Hz,2H) ,4. 39-4. 35 (dd, J = 3Hz, J = 9Hz，1H)，3. 88-3. 86 (m，1H)，3. 16 (m, 2H)，3. 05-2. 84 (m, 2H)，I. 77-1. 76 (m, 2H)，I. 56 (m, 2H).实施例43 制备 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 6CH3 (5a)取430mg(0. 73mmol)N°-Boc-NG-Arg (NO2)-Tyr-NHCH2 (CH2)6CH3 溶于适量乙酸乙酯，加入约15ml 4N盐酸乙酸乙酯液，室温搅拌3小时，TLC显示原料点消失。反应混合液在室温下减压浓缩，残留物再用乙酸乙酯溶解并室温下浓缩，如此反复5次；然后向浓缩物中加入乙醚，室温下减压浓缩，如此反复5次，直至除净游离的氯化氢，得标题化合物 320mg，为无色固体 90% .Mp 126-127 °C, [a]^0 = - 13.0 (c = 2.29, CH3OH),ESI-MS (m/z) 449. 4 [M+H]+. IR(KBr) :3182. 43,2936. 06，1656. 07，1514. 07，1239. 21，567. 11. 1H-NMR(300MHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 34 (s, 1H) ,8. 80-8. 77 (d, J = 9Hz，lH)，
8.44-8. 43 (d, J = 3Hz, 1H)，8. 39-8. 38 (m, 1H)，8. 10 (s, 1H)，7. 92 (s, 1H)，7. 62-7. 59 (m,1H) ,7. 51-7. 40 (m, 1H) ,7. 29-7. 23 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz，2H)，6. 68-6. 65 (d，J = 9Hz,2H)，4. 37-4. 36 (m, 1H)，3. 82 (s, 1H)，3. 13-3. 02 (m, 3H)，2. 93-2. 88 (m, 1H)，
2.83-2. 72 (m, 2H)，I. 78-1. 76 (m, 2H)，I. 54-1. 51 (m, 2H)，I. 31-1. 27 (m, 2H)，I. 22 (s,9H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例44 制备 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 8CH3 (5b)按照实施例43 的方法，以 800mg (I. 29mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 8CH3为原料，得标题化合物620mg，为无色固体，产率94 % . Mp 127-128 V，[a]2° = - 39.4 (c = 1.31, CH3OH), ESI-MS (m/z) :477. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3101. 92,
2932.95，1657. 55，1515. 14，1357. 76，1239. 89,564. 88. 1H-NMR(30OMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 34(s,1H),8. 79-8.76 (d, J = 9Hz，1H)，8. 43-8. 41 (d，J = 6Hz，1H)，8. 38-8.36 (m，1H) ,8. 12-8. 08 (t, J = 6Hz，lH)，7.91(m，lH)，7.51(m，2H)，7.07-7.04(d，J = 9Hz，2H)，
6.68-6. 65 (d, J = 9Hz,2H)，4. 40-4. 34 (m, 1H)，3. 82-3. 81 (m, 1H)，3. 13-3. 09 (m, 2H)，3. 07-3. 02 (m, 1H)，2. 94-2. 87 (m, 1H)，2. 83-2. 71 (m, 2H)，I. 78-1. 73 (m, 2H)，I. 54-1. 49 (m,2H)，I. 32-1. 28 (m, 2H)，I. 27 (s, 10H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例45 制备 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 10CH3 (5c)按照实施例43 的方法，以 700mg (I. 08mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 10CH3为原料，得标题化合物520mg,为无色固体，产率89 % . Mp 132-133 V，[a]2D° = - 34.5 (c =1.14, CH3OH), ESI-MS (m/z) :505. 5 [M+Na]+ IR (KBr) :3186. 92,
2931.65，1656. 99，1535. 35，1472. 93，1241. 65,821. 43,569. 81. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 34 (s, 1H)，8. 80-8. 77 (d, J = 9Hz，1H)，8. 44-8. 42 (d, J = 6Hz，1H) 8. 39-8. 38 (m,1H) ,8. 11 (m, 1H)，7. 92 (s, 1H)，7. 50 (m, 1H)，7. 54-7. 42 (m, 1H)，7. 29-7. 25 (m, 1H)，
7.07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 68-6. 65 (d, J = 9Hz,2H)，4. 38-4. 34 (m, 1H)，3. 82 (s, 1H)，
3.13-3. 03 (m, 3H)，2. 92-2. 86 (Q, J = 6Hz, 1H)，2. 83-2. 72 (m, 2H)，I. 78-1. 76 (m, 2H)，
1.51 (m, 2H)，I. 31-1. 27 (m, 2H)，I. 22 (s,9H)，0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz，3H).实施例46 制备 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 12CH3 (5d)按照实施例43 的方法，以 540mg (0. 8mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 12CH3为原料，得标题化合物340mg，为无色固体，产率75 % . Mp 138-139 V，[af° = - 23.5 (c = 1.6, CH3OH), ESI-MS (m/z) :533. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3254. 80,2930. 14，1657. 35，1532. 19，1240. 84,686. 11. 1H-NMR(300MHz，DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 36 (s,1H) ,8. 78-8. 76 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 53-8. 50 (m, 1H) ,8. 41-8. 37 (m, 1H) ,8. 10 (m, 1H)，
7.91 (s, 1H) ,7. 44-7. 14 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d，J = 9Hz，2H)，7. 02 (s, 1H) ,6. 68-6. 65 (d,J = 9Hz，2H)，4. 38-4. 36 (m, 1H)，3. 15 (m, 2H)，3. 13-3. 11 (m, 1H)，2. 95-2. 88 (m, 1H)，
2.86-2. 72 (m, 2H)，I. 78-1. 76 (m, 2H)，I. 51 (m, 2H)，I. 33-1. 29 (m, 2H)，I. 23 (s, 22H)，
0.86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例47 制备 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 14CH3 (5e)按照实施例43 的方法，以 400mg (0. 57mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 14CH3为原料，得标题化合物300mg，为无色固体，产率88 % . Mp 141-142 V，[a]2D° = - 26.4 (c = 1.49, CH3OH), ESI-MS (m/z) :561. 6 [M+H]+ IR (KBr) :3171. 12,
2928.33，1656. 44，1514. 55，1410. 90，1241. 34,821. 01,572. 80. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 31 (s, 1H) ,8. 78-8. 76 (d, J = 6Hz，1H)，8. 43-8. 41 (d, J = 6Hz, 1H)，
8.38-8. 37 (d, J = 3Hz，lH)，8. 12-8. 08 (t, J = 6Hz，1H)，7. 91 (s，1H)，7. 63-7. 57 (t，J =9Hz, 1H), 7. 46-7. 40 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 26-7. 20 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H), 6. 68-6. 65 (d, J = 9Hz，2H)，4. 39-4. 34 (dd, J = 6Hz, J = 9Hz, 1H)，3. 82-3. 81 (m, 1H)，
3.13-3. 03 (m, 3H)，2. 94-2. 86 (m, 1H)，2. 83-2. 71 (m, 2H)，I. 78-1. 73 (m, 2H)，I. 54-1. 49 (m,2H)，I. 30-1. 29 (m, 2H)，I. 22(s,9H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例 48 制备 Arg-Tyr-NHCH2 (CH2) 16CH3 (5f)按照实施例 43 的方法，以 500mg (0. 69mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-NH-CH2 (CH2) 16CH3为原料，得标题化合物340mg，为无色固体，产率79 % . Mp 143-144 V，[a]2D° = - 10.7 (c = 1.93, CH3OH), ESI-MS (m/z) :589. 7 [M+H]+ IR (KBr) :3303. 15,2926.49,1653. 90,1536. 20,1237. 58,820. 90,687. 79,558. 56. 1H-NmrUOOMHz, DMS0_d6)8 /ppm = 8. 78-8. 75 (d, J = 9Hz，1H)，8. 44-8. 42 (d，J = 6Hz, 1H), 8. 39-8. 35 (m, 2H),
8.10-8. 06 (t, J = 6Hz, 1H)，7. 93 (m, 1H)，7. 53 (m, 1H)，7. 45-7. 25 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J=9Hz，2H)，6. 68-6. 65 (d, J = 9Hz，2H)，4. 40-4. 34 (m, 1H), 3. 82-3. 81 (m, 1H), 3. 13(m，2H)，
3.07-3. 03 (m, 1H)，2. 94-2. 91 (m, 1H)，2. 86-2. 77 (m, 2H)，I. 79-1. 74 (m, 2H)，I. 58-1. 49 (m,2H)，I. 31-1. 27 (m, 2H)，I. 22(s,30H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例49 制备 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 6CH3 (5g)按照实施例43 的方法，以 750mg (I. 26mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-OC-H2 (CH2) 6CH3为原料，得标题化合物510mg，为无色固体，产率83 % . Mp 109-110 V，[afo = - 33.3 (c = 1.62, CH3OH), ESI-MS (m/z) :450. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3194. 15,2936. 20，1660. 13，1524. 89，1358. 14，1231. 17,833. 14,661. 54. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) 8 /ppm = 9. 41 (s, 1H) ,9. 19-9. 17 (d, J = 6Hz，2H)，8. 46-8. 44 (d，J = 6Hz，lH)，
8.41-8. 39 (m, 2H)，8. 00 (s, 1H)，7. 81 (s，1H)，7. 07-7. 05 (d, J = 6Hz,2H)，6. 70-6. 67 (d, J =9Hz，2H)，4. 42-4. 34 (m, 1H), 4. 01-3. 96 (m，2H)，3. 94-3. 89 (m, 1H), 3. 18-3. 14 (t，J = 6Hz,2H), 2. 92-2. 89 (d, J = 9Hz，2H)，I. 80-1. 74(m，2H)，I. 60-1. 54 (m, 2H)，I. 48-1. 44(m，2H)，
I.23 (s, 10H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例50 制备 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 8CH3 (5h)按照实施例43 的方法，以 800mg (I. 29mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OC-H2(CH2)8CH3为原料，得标题化合物570mg，为无色固体，产率86 % . Mp 112-113 °C,[a]2^ = - 87.7 (c = 1.63, CH3OH), ESI-MS (m/z) :478. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3340. 48,3191. 91,2843. 74，1669. 32，1359. 81,1238. 80,834. 75,671. 82. 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6)8 /ppm = 9. 22-9. 20 (d, J = 6Hz，2H)，8. 49-8. 47 (d，J = 6Hz，1H)，8. 43-8. 39 (m，2H)，8. 00(s，1H)，7. 54(s，1H)，7. 07-7. 04(d，J = 9Hz，2H)，6. 71-6. 68 (d，J = 9Hz,2H)，4. 42-4. 35 (m, 1H)，4. 03-3. 91 (m, 3H)，3. 17 (s，2H)，2. 92-2. 89 (d, J = 9Hz,2H)，
1.80-1. 76 (m, 2H)，I. 60-1. 55 (m, 2H)，I. 48-1. 46 (m, 2H)，I. 23 (s, 14H)，0. 86-0. 82(t, J =
6.0Hz,3H).实施例51 制备 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 10CH3 (5i)按照实施例43 的方法，以 500mg(0. 77mmol) N°-Boc-NG-Arg (NO2)-Tyr-OC-H2 (CH2) 10CH3为原料，得标题化合物320mg，为无色固体，产率77 % . Mp 116-117 V，[afo = - 17.3 (c = 1.81, CH3OH), ESI-MS (m/z) :506. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3401. 62,3135. 64，1660. 13，1527. 30，1222. 44,826. 64,565. 08. 1H-MffiGOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm=9. 38 (s, 1H) ,9. 19-9. 160 (d, J = 9Hz，2H)，8. 46-8. 44 (d，J = 6Hz，1H)，8. 41-8. 39 (m，2H)，7. 97(m，1H)，7. 61-7. 44(m，2H)，7. 07-7. 04(d，J = 9Hz，2H)，6. 70-6. 67 (d，J = 9Hz,2H)，4. 42-4. 37 (m, 1H)，4. 08-4. 02 (m, 2H)，3. 98-3. 89 (m, 2H)，3. 18-3. 14(t, J = 6Hz,2H)，
2.92-2. 89 (d, J = 9Hz,2H)，I. 79-1. 75 (m, 2H)，I. 59-1. 54 (m, 2H)，I. 51-1. 46 (m, 2H)，
I.23 (s, 18H) ,0. 87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例52 制备 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 12CH3 (5 j)按照实施例43 的方法，以 580mg (0. 86mmol) Na -Boc-Nc-Arg (NO2) -Tyr-OC-H2 (CH2) 12CH3为原料，得标题化合物430mg，为无色固体，产率88 % . Mp 139-140 V，[a]2° = -67.2 (c = 1.29, CH3OH), ESI-MS (m/z) :534. 4 [M+H]+ IR (KBr) :3336. 49,3171. 37,2932. 91, 1658. 63，1504. 92，1218. 19. 1H-MffiOOOMHz, DMS0_d6) 8 /ppm =
9.34 (s, 1H) ,9. 20-9. 18 (d, J = 6Hz, 1H) ,8. 38(s,3H) ,8. 01-7. 97 (t, J = 6Hz J = 6Hz,1H), 7. 80 (m, 1H), 7. 53 (m, 1H), 7. 07-7. 05 (d, J = 6Hz，2H)，6. 70-6. 67 (d，J = 9Hz，2H)，
4.42-4. 36 (Q, J = 6Hz 1H)，4. 04-3. 97 (m, 2H)，3. 94-3. 88 (m, 1H)，3. 18-3. 16 (m, 2H)，
2.92-2. 89 (d, J = 9Hz，2H)，I. 80(m，2H)，I. 59-1. 57 (m, 2H)，I. 47(m，2H)，I. 23(s，22H)，
0.87-0. 83 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例 53 制备 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 14CH3 (5k)按照实施例43 的方法，以 800mg (I. 13mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-OC- H2 (CH2) 14CH3为原料，得标题化合物520mg，为无色固体，产率77 % Mp 143-144 V，[af° =-55.9 (c = 1.46, CH3OH), ESI-MS (m/z) :562. 5 [M+H]+ IR (KBr) :3184. 48,
2929.63. 1721. 03. 1661. 55，1513. 36，1357. 11，1227. 39,825. 79,570. 18.1H-NmrGoomHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 22-9. 19 (d, J = 9Hz, 1H) ,8. 48-8. 47 (d,J = 3Hz, 1H) ,8. 43-8. 42 (m, 1H) ,8. 39 (s, 1H) ,8. 00 (m, 1H)，7. 55 (s，1H)，7. 22 (m, 1H)，
7.07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 70-6. 67 (d, J = 9Hz,2H)，4. 42-4. 35 (m, 1H)，4. 07-3. 96 (m,2H) ,3. 94-3. 91 (m, 1H)，3. 17(s，2H)，2. 91-2. 89 (d，J = 6Hz，2H)，I. 80-1. 78(m，2H)，
1.60-1. 57(m，2H)，I. 46 (m, 2H)，I. 22(s，26H)，0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).实施例54 制备 Arg-Tyr-OCH2 (CH2) 16CH3 (51)按照实施例43 的方法，以 850mg (I. 17mmol) Na-Boc_NG-Arg (NO2)-Tyr-OC-H2 (CH2) 16CH3为原料，得标题化合物640mg，为无色固体，产率87 % . Mp 146-147 V，[a]2° = -35.3 (c = 2.41, CH3OH), ESI-MS (m/z) :590. 6 [M+H]+ IR (KBr) :3186. 89,29 28. 04,1739. 68,1661. 65,1513. 79,1356. 93,1225. 64,1111. 31,825. 40,565. 51. 1H-NMR(300MHz, DMS0-d6) 8 /ppm = 9. 38 (s, 1H) ,9. 19-9. 17 (d, J = 6Hz，2H)，
8.47-8. 45 (d, J = 6Hz, 1H)，8. 42-8. 41 (m, 1H)，8. 00 (m, 1H)，7. 63-7. 57 (t, J = 9Hz, 1H)，
7.46-7. 40 (t, J = 9Hz, 1H)，7. 30-7. 23 (m, 1H)，7. 07-7. 04 (d, J = 9Hz,2H)，6. 70-6. 68 (d,J = 6Hz,2H)，4. 42-4. 37 (m, 1H)，4. 07-4. 00 (m, 2H)，3. 98-3. 93 (m, 1H)，3. 26 (m, 2H)，
2.92-2. 89 (d, J = 9Hz，2H)，I. 80-1. 75(m，2H)，I. 56-1. 55 (m，2H)，I. 49-1. 46 (m,2H)，
I.23(s,30H) ,0. 86-0. 82 (t, J = 6. 0Hz,3H).试验例I本发明的化合物5a_l的镇痛活性实验I)受试化合物本发明的化合物5a_l阳性对照品阿司匹林；2)实验动物ICR小鼠，雄性，体重20±2g;每12只小鼠一组，空白及阳性对照各一组。3)剂量设置阿司匹林 165 u mol/kg, Arg-Tyr 100 u mol/kg, 5a-1 10 u mol/kg,
均单次灌胃。药物配制生理盐水(NS)溶解。4)给药方案0. 2ml溶液/鼠。5)动物模型ICR雄性小鼠使用前静息I天，操作间保持室内温度22°C，每组小鼠12只。基础痛阈的测定是在开始时，先测三次，每次间隔5分钟，取其平均值为基础痛阈。每次试验设生理盐水组为平行对照。
6)痛阈提高率的测定
灌胃后每30min测定一次痛阈值，共测定6组180min。痛阈改变以下列公式表示痛阈提高％ =[(给药后痛阈-基础痛阈)/基础痛阈]X 100%。7)统计方法本实验数据统计均采用t检验和方差分析，以X土SD表示。8)实验结果受试化合物热辐射甩尾实验痛阈提高结果如表I所示。在10 ii mol/kg剂量下受试化合物经灌胃给药后对疼痛有显著的抑制作用。表I化合物5a_l的镇痛作用
痛阈提高(X±SD%)
化合物30 min 60 min90 min 120 min150 min 180 min
"^a48.33 ± 11.68c~84.96 ± 12.66°~65.12 ± 8.45° 49.5.7 ± 8.53° 40.38 ± 9.97° 25.47 ±7.24°~
5b39.11 ± 8.14g 84.24 ±12.61e 54.25 ± 12.35c 39.36 ±7.86e 34.05 ±7.14e 19.34 ± 3.89e
5c50.21± 10.83 c 88.57 ±10.00e 46.41 ± 11.IOc 41.66 ± 10.98e 25.90 ± 6.58e 14.19 ± 4.27J
5d55.57±10.08c 80.80±12.57e 49:79±7.59c 39.15±6.35e 23.79 ± 5.12.37±3.91
5e55.74 ±9.17c 82.58 ±12.21e 57.43 ± 12.81f 38.47 ±9.37e 24.84 ± 5.07e 15.40 ± 3.31d
5f64.91 ±9.33e 85.76 ±10.98e 42.63 ± 10.02c 28.26 ± 6.45c 18.87 ± 4.26J 12.32 ±2.68
Sg53.07 ±11.40c 78.56 ±10.50e 55.74 ± 10.75c 42.24 ± 9.42e 26.16 ± 5.83e 13.97 ± 3.61d
5h54.28 ±9.14。 78.66 ±11.21e 55:78 ± 8.24f 33.01 ±7.40f 28.25 ± 5.85e 13.54 ± 3.11b
5i47.81 ±9.55c 77.33 ± 10.06e 50.31 ± 9.78c 40.43 ± 6.00e 27.94 ± 6.07e 14.14 ± 3.32a
5j41.19±6.68c 78.35 ±10.96r 45.11±9.59c 30.67±5.82c 21.22±5.13r 15.78±4.06d
5k45.39 ±9.39c 78.76 ± 8.98e 57.26 ± 12.59f 40.14 ± 8.84e 24.52 ± 5.59e 10.57 ±2.86
SI45.89 ±9.73c 84.49 ± 13.85e 51.25 ± 10.73c 37.40 ± 9.37s 21.55 ± 5.16f 9.25 ±3.02
Ar§29.80 ± 5.54h52.75 + 10.551 26.21 ± 6.36h 18.10 ± 5.64h14.59 ±3.43a11.22 ±3.69Tyr
Aspirin48.88 ± 7.73a64.31 ± 10.85a47.47± 8.77a27.37 ±5.48a16.81 ±2.88a12.95 ± 3.15b
NS6.91 ±2.469.86 ±2.8010.24 ±2.847.66 ± 2.7510.04 ± 3.4110.06 ±2.95Aspirin 剂量165 u mol/kg ；Arg-Tyr 剂量100 u mol/kg ;5a_l 剂量10 u mol/kg. a)与NS组比较P < 0. 01 ；b)与NS组比较P < 0. 05 ；c)与NS组比较P < 0. 01，与Arg-Tyr 组比较 P < 0. 01 ；d)与 NS 组比较 P < 0. 01，与 Arg-Tyr 组比较 P < 0. 05 ；e)与NS 组比较 P < 0.01，与 Arg-Tyr 组比较 P < 0. 01，与 Aspirin 比较 P < 0. 01 ；f)与 NS 组比较 P < 0. 01，与 Arg-Tyr 组比较 P < 0. 01，与 Aspirin 比较 P < 0. 05 ；g)与 NS 组比较 P
<0. 01，与 Arg-Tyr 组比较 P < 0. 05，与 Aspirin 比较 P < 0. 01 ；h)与 NS 组比较 P < 0. 01，与 Aspirin 比较 P < 0. 01 ；i)与 NS 组比较 P < 0. 01，与 Aspirin 比较 P < 0. 05 ；j)与 NS组比较P < 0. 05 ;与Arg-Tyr组比较P < 0. 05试验例2本发明化合物5c，51的镇痛活性剂量和效应的关系试验方法同试验例1，受试化合物为5c, 51 ;将受试化合物分别按IOii mol/kg,IIi mol/kg和0. I Ii mol/kg剂量,均采用灌胃单次给药。试验结果见表2。结果表明,本发明化合物5c，51的镇痛活性呈现剂量依赖关系。表2不同剂量5c，51的镇痛活性
权利要求
1.一种通式为I的化合物Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 I 式中，X为NH或O ;式中，n 为 6、8、10、12、14 或 16。
2.一种制备权利要求I所述的化合物的方法，其特征在于包括以下步骤 (1)浓硫酸、浓硝酸条件下，Arg硝基化得Ne-Arg(NO2)； (2)弱碱性水二氧六环条件下,Nti-Arg(NO2)与(Boc) 20反应制得Na-Boc-Nti-Arg (NO2),L-Tyr 与(Boc)2O 反应制得 Boc-Tyr ； (3)在DCC和HOBt存在下，Boc-Tyr在无水THF中与脂肪胺或脂肪醇缩合成Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 ； (4)在含氯化氢的乙酸乙酯中，Boc-Tyr-XCH2(CH2)nCH3脱Boc保护，得Tyr-XCH2-(CH2)nCH3;(5)在DCC 和 HOBt 存在下，Na-Boc-Nc-Arg(NO2)在无水 THF 中与 Boc-Tyr-X-CH2(CH2)nCH3 缩合，制备得到 Na-Boc-Ns-Arg (NO2) -Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ； (6)H2/Pd条件下 Na-Boc-Ns-Arg(NO2)-Tyr-XCH2(CH2)nCH3 脱-NO2 保护，得Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2) nCH3 ； ⑵在含氯化氢的乙酸乙酯中，Boc-Arg-Tyr-XCH2 (CH2)nCH3脱Boc保护，即得Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3O
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤(3)中所述的脂肪胺为正八胺、正十胺、正十二胺、正十四胺、正十六胺或正十八胺；所述脂肪醇为正八醇、正十醇、正十二醇、正十四醇、正十六醇或正十八醇。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述Arg和Tyr均为L构型氨基酸。
5.权利要求I所述的化合物在制备镇痛和抗炎药物中的用途。
全文摘要
本发明公开了京都酚逆序列(Arg-Tyr)修饰的脂肪胺/醇衍生物及其制备方法和作为镇痛剂和抗炎剂的应用，京都酚逆序列修饰的脂肪胺/醇衍生物的结构为通式I即Arg-Tyr-XCH2(CH2)nCH3，式中X为NH或O；n为6、8、10、12、14或16。本发明采用小鼠热甩尾法模型评价了通式化合物的镇痛活性，采用小鼠耳肿胀模型评价了通式I化合物的抗炎活性，实验结果表明通式I代表的12种化合物具有优秀的镇痛作用，且在相同剂量下具有较好的抗炎活性，可应用于镇痛药和抗炎药的生产中。
文档编号A61P29/00GK102796165SQ201110135588
公开日2012年11月28日 申请日期2011年5月24日 优先权日2011年5月24日
发明者赵明, 彭师奇, 于言言 申请人:首都医科大学