专利名称：应用PPARα或PPARγ拮抗剂治疗X综合征的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的治疗方法，尤其涉及治疗X综合征的方法及用于该方法中的一些化合物。
众所周知，过氧化物酶体增生剂激活的受体(在下文中用PPARγ表示)是核受体超家族中的成员，它包括甾体受体、甲状腺受体和视黄醛衍生物激素受体(Evans,Science 240,889-895,(1988))。从Chawla等的报道中也可知道PPARγ最初在脂细胞分化过程中被表达(Endocrinology 135,798-800,1994)。
Spiegelman等在细胞学杂志(Vol 83,803-812,1995)中报道调整PPARγ活性的信号在调节能量的体内平衡方面起重要作用。他们得出结论(同上，810页)“对有效的PPARγ激动剂和拮抗剂的筛选代表了以开发新的分别治疗NIDDM和肥胖症的治疗药物为目的的一种必然的和可能迅速发展的趋势”。
众所周知，过氧化物酶体增生剂激活的受体(在下文用PPARα表示)的α异构体作用是促进在啮齿动物肝脏中的过氧化物酶体增生，导致增加该器官对脂肪的氧化作用(keller和Wahli:TrenolsEndocrin Metab 1993；4:291-296)。降血脂药物具有激发PPARα的能力，其结果为刺激过氧化物酶体增生及随后的脂肪酸氧化可以解释在血浆中脂肪酸的还原作用(Macdonald和Lane:Current Biology Vol5,618-621页(1995))。
X综合征是具有以下特征的综合征初始的胰岛素抑制状态、引起高胰岛素血症、脂血紊乱和葡萄糖耐受不良，它可以加重非胰岛素依赖型糖尿病(Ⅱ型糖尿病)，特征为高血糖和进一步发展为糖尿病并发症。
我们现在认为在PPARγ降高血糖的药物中包括PPARα作用，由于提高的降血脂作用，将产生对X综合征具有可能的、增强的治疗作用的药剂。
国际专利申请号PCT/EP 95/03038公开了一些式(A)化合物
或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物，其中Ra代表2-苯并噁唑基或2-吡啶基和Rb代表CH2OCH3或CF3。
式(A)的化合物据报道在以下方面具有潜在的作用高血糖尤其Ⅱ型糖尿病中的高血糖、高血脂、高血压、心血管疾病，尤其动脉粥样硬化的治疗和/或预防和肾病的治疗和/或预防，特别是与Ⅱ型糖尿病的发展有关的肾疾病，包括糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾病综合征、高血压性肾硬化和晚期肾病和对微量蛋白尿向蛋白尿进展的预防、逆转、稳定或阻滞作用。
现在已经发现式(A)化合物显示出对PPARα和PPARγ的激动剂活性，除了可以特别有效地治疗和/或预防高血糖外，现在认为式(A)化合物也可以最有效地治疗和/或预防前驱糖尿病抗胰岛素性综合征及其导致的并发症。因而，认为它们可以用于治疗和/或预防抗胰岛素性、糖尿病、脂血紊乱、动脉粥样硬化、高血压、心血管疾病和肥胖症。
因此，首先本发明提供治疗和/或预防人类或非人类哺乳动物X综合症的方法，该方法包括给予需要此治疗的人类或非人类哺乳动物有效、非毒性和药学上有效量的一种PPARα和PPARγ激动剂或其药学上可接受的衍生物。
这样，本发明的一个方面是对X综合症的治疗。
本发明的另一个方面是对X综合症的预防。
特别是提供对高血糖的治疗和/或预防的方法。
尤其提供治疗前驱糖尿病抗胰岛素性综合征及其导致的并发症的方法。
前驱糖尿病抗胰岛素性综合征包括血胰岛素过多症和葡萄糖耐受不良。
其次，本发明提供治疗和/或预防人类或非人类哺乳动物X综合症，包括高血糖和/或前驱糖尿病抗胰岛素性综合征及其导致的并发症的方法，该方法包括给予人类或非人类哺乳动物有效、无毒和药学上有效剂量的PPARα和PPARγ或其药学上可接受的衍生物；前提为所提供的方法不包括给予(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，以用于治疗和/或预防高血糖尤其Ⅱ型糖尿病中的高血糖、高血脂、高血压、心血管疾病尤其动脉粥样硬化及肾病的治疗和/或预防尤其与Ⅱ型糖尿病的发展有关的肾疾病包括糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾病综合征、高血压性肾硬化、晚期肾病和对微量蛋白尿向蛋白尿进展的预防、逆转、稳定或阻滞作用。
可以理解，优选形式的PPARα和PPARγ激动剂为单一化合物(这个化合物在此称作“PPARα和PPARγ激动剂”)，但是，以PPARα激动剂化合物与PPARγ激动剂化合物的结合物(combination)提供的PPARα和PPARγ的激动剂在本发明范围之内。
一个结合的PPARα和PPARγ激动剂是式(Ⅰ)化合物
或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物，其中R0代表2-苯并噁唑基或2-吡啶基和R1代表CH2OCH3或CF3。
优选，R0代表2-苯并噁唑基。
R1适合代表CH2OCH3。
优选，R1代表CF3。
式(Ⅰ)化合物和其药学上可接受的盐可能处于几个互变异构形式之一，无论是以个别的互变异构体形式或其混合物形式均包括在本发明之内。
药学上可接受的衍生物包括药学上可接受的盐和溶剂化物。
合适的药学上可接受的盐包括羧酸盐和酸加成的盐。
合适的药学上可接受的羧酸盐包括金属盐如铝盐，碱金属盐如锂、钠或钾盐，碱土金属盐如钙或镁和铵或取代的铵盐，如低级烷基胺化合物像三乙胺、羟基烷基胺如2-羟基乙胺、双-(2-羟基乙基)胺或三-(2-羟基乙基)胺，环烷基胺如二环己基胺的铵盐，或与普鲁卡因、二苄基哌啶、N-苄基-β-苯乙胺、脱氢松香胺、N,N’-双脱氢松香胺、葡糖胺、N-甲基葡糖胺或吡啶型碱如吡啶、可力丁、奎宁或喹啉的铵盐。
合适的酸加成的盐包括药学上可接受的无机盐如硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、硼酸盐、盐酸盐和氢溴酸盐以及可能的药学上可接受的有机酸加成盐像醋酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、甲磺酸盐、α-氧代戊二酸盐和α-甘油磷酸盐。
合适的药学上可接受的溶剂化物包括水合物。
按照常规的方法可以制备和分离药学上可接受的衍生物，如式(Ⅰ)化合物的盐和/或溶剂化物，例如用甲醇中的甲醇钠可以制备钠盐。
通过水解式(Ⅱ)化合物，可以制备式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的水合物
其中R0和R1是如式(Ⅰ)所定义的基团及L1代表可水解的基团；及其后若需要，制备式(Ⅰ)化合物的药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物。
合适的可水解基团L1为式(a)的基团或其差向异构体
合适的可水解基团L1为Evans手性助剂，例如一个式(b)基团或其差向异构体
合适的可水解基团L1为C1-6烷氧基。
式(Ⅱ)化合物的水解在合适水解选择的具体L1基团的条件下进行，例如当L1为式(a)基团或C1-6烷氧基时，该水解反应在适合酸性条件下进行，如用稀硫酸，在水/二噁烷混合物如1∶1混合物中，在提供形成所需产物的合适速度的任何温度下，一般是在较高的温度如在50℃到120℃范围内，例如90℃方便地进行；或者当L1为式(b)基团时，水解一般用过氧化氢锂在含水的溶剂如含水的四氢呋喃中，在提供形成所需产物的合适速度的任何温度下，一般在一较低温度下如在-10℃到0℃范围内，例如0℃进行。或者，当L1为式(b)基团时，水解可受碱性的影响，如用氢氧化钠水溶液，在适当的溶剂如含水四氢呋喃中，通常在室温下进行。
式(Ⅱ)化合物，其中L1为以上定义的式(a)或(b)的一部分，可以由式(Ⅲ)化合物制备
其中R0和R1是如式(Ⅰ)所定义及L2代表离去基团；(ⅰ)对于其中L1为上述式(a)的一部分的式(Ⅱ)化合物而言，通过与(S)-苯基甘氨醇(glycinol)反应；或者(ⅱ)对于其中L1为上述式(b)的一部分的式(Ⅱ)化合物而言，通过与(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮反应，优选其活性形式；其后从产生的非对映异构体混合物中分离出所需要的异构体。
合适的离去基团L2为卤原子，例如氯原子。
式(Ⅲ)化合物和(S)-苯基甘氨醇之间的反应可以在常规酰胺化作用条件下进行，例如在惰性溶剂如二氯甲烷中，在提供形成所需产物的合适速度的温度下，适合在室温下，优选在碱例如三乙胺的存在下进行。
(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮的合适的活化形式为一种盐的形式，例如一种碱金属盐形式，优选锂盐。
(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮的活化形式可以通过任何适合的常规方法制备。因此，当该活化形式为锂盐时，它可以通过用适合由正-丁基锂提供的锂离子源，在碱存在下，在对质子惰性的溶剂如四氢呋喃中，通常在低温下，如在-78℃到0℃范围内处理(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮来制备。
在式(Ⅲ)化合物和(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮的活化形式之间的反应可以在对质子惰性的溶剂如四氢呋喃中，在提供形成所需产物的合适速度的温度下，方便地使所述反应混合物由-78℃温热至0℃而进行。
优选制备(S)-4-benxyl噁唑烷-2-酮的活化形式，然后就地与式(Ⅲ)化合物反应。
式(Ⅲ)化合物可以通过水解式(Ⅳ)化合物的羧酸酯COOR2制得
其中R0和R1为如式(Ⅰ)定义的基团及R2代表烷基，其后将所形成的羧酸基转变成COL2的一部分。
合适的烷基R2为C1-6烷基，尤其甲基。
羧酸酯的水解可以受使用任何常规的水解剂如碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠的影响。
式(Ⅳ)化合物的水解可以在任何合适的溶剂，如甲醇/水混合物，通常为1∶1的混合物中，在可提供制得所需产物的合适速度的温度下，适合用较高的温度并且通常在溶剂的回流温度下进行。
将羧酸基转变成COL2部分可以使用任何适当的常规步骤进行，取决于选择的L2基团的具体的性质，因此当L2为卤素时，合适的步骤是用草酰卤处理羧酸，例如当L2为氯时用草酰氯。
羧酸基转变为COL2部分的反应条件受L2的特性和所选择的L2源支配，例如当L2为卤素时，L2源是草酰氯，然后所述反应在惰性溶剂如二氯甲烷或苯中，在提供形成所需产物的合适速度的温度下，合适在室温或在高温例如所述溶剂的回流温度下进行。
可以理解式(Ⅱ)化合物(其中L1为上述(a)和(b)部分定义的差向异构体)的制备和分离及其后水解作用得到式(Ⅰ)化合物可以通过使用上述的式(Ⅱ)化合物(其中L1代表上述(a)或(b)部分)的制备、分离和水解的类似方法实现。
式(Ⅱ)化合物(其中L1为式(b)的一部分)也可以通过式(Ⅴ)化合物的去羟基化作用得到
其中R0和R1为如式(Ⅰ)定义的基团，X为上述定义的式(b)的一部分。
式(Ⅴ)化合物的去羟基化作用可以通过用三烷基硅烷，如三乙基硅烷，优选在三氟乙酸存在下和方便地使用三氟乙酸作为溶剂，在提供形成所述产物的合适速度的任何温度下，例如从0℃到室温的温度范围内处理方便地进行。
可以理解，通过式(Ⅴ)化合物(其中立体中心所带的羟基被差向异构化)的去羟基化作用也可以得到式(Ⅱ)化合物(其中L1为式(b)的一部分)。
式(Ⅴ)化合物可以通过式(ⅥA)化合物与式(ⅥB)化合物反应制得
其中R0为如式(Ⅰ)定义的基团，所述式(ⅥB)化合物如下
其中R1为如式(Ⅰ)定义的基团；其后，从生成的非对映体混合物中分离出所需的异构体。
适宜在以上提及的反应中，式(ⅥB)化合物为活化形式，它优选通过用三氟甲磺酸烷基硼，如三氟甲磺酸二丁基硼，优选在胺碱如三乙胺存在下处理式(ⅥB)化合物而得到。
式(ⅥB)化合物的活化形式可以依据选择的活化形式的特性，通过适当的常规方法制得，例如使式(ⅥB)化合物与三氟甲磺酸二丁基硼和三乙基胺，在惰性溶剂如二氯甲烷中，在-78℃到0℃温度范围内进行反应。
式(ⅥA)和(ⅥB)化合物之间的反应可以在惰性溶剂如二氯甲烷中，在提供形成所需产物的合适速度的温度下，方便地通过使所述反应混合物由-78℃缓慢温热至0℃而进行。
优选先制得式(ⅥB)化合物的活化形式，然后就地与式(ⅥA)化合物反应。
对于其中R0代表2-苯并噁唑基的式(Ⅰ)化合物而言，合适的式(ⅥA)化合物是4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲醛。
从非对映体混合物中分离出任何所需的单一异构体的适合的方法是色谱法，例如制备型高压液相色谱法或硅胶柱色谱法。
制备式(Ⅱ)化合物(其中L1为C1-6烷氧基)的一种方便的方法为式(Ⅱ)化合物(其中L1为式(b)中的一部分)的碱性醇解。
一种合适的碱为碱金属醇盐，例如当L1为甲氧基时，用甲醇中的甲醇钠处理式(Ⅱ)化合物(其中L1为(b)中的一部分)。
式(Ⅰ)化合物也可以通过拆分式(Ⅶ)化合物的外消旋化合物制备
其中R0和R1如式(Ⅰ)所定义；并且其后如果需要，可以制备式(Ⅰ)化合物的药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物。
式(Ⅶ)化合物的拆分可以用已知的拆分步骤进行，例如通过使式(Ⅶ)化合物与一种拆分试剂，如一种光学活性的酸或碱反应，得到一种非对映体盐的混合物，该混合物随后通过分级结晶分离并且其后式(Ⅰ)化合物可以利用常规的方法如水解作用从分离的非对映体盐中再生。
可以理解，式(Ⅶ)化合物包括式(Ⅰ)化合物和其它光学异构体的掺合成分。式(Ⅶ)化合物或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物形成本发明另外的一个方面。除了式(Ⅰ)化合物外，式(Ⅶ)化合物的分离的异构体或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物也包括在本发明之中。
用于拆分式(Ⅶ)化合物的合适的酸或碱在“对映体、外消旋体和拆分”(J Jaques等1981年，Wiley Interscience)一书中，尤其在255和256页作了介绍。影响拆分的合适的方法也被Jaques等公开。
式(Ⅳ)和(ⅥA)化合物，例如4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲醛是已知的化合物或者可以利用与制备已知化合物，例如在国际专利申请公开号WO 94/01420中公开的化合物的类似的方法来制备。
式(ⅥB)化合物是已知化合物或者它们可以利用与制备已知化合物，例如在《(有机合成》(68卷，83页，1990版J.D.White)中公开的化合物的类似的方法或者另外的类似方法，并与制备酰氯的常规方法相结合来制备。
可以理解，根据常规的化学实践，在任何上述的反应中，可以将作用物中的任何活性基团加以保护。在任何上述的反应中的合适的保护基团是那些在本领域中常常用到的。这些保护基团的形成和脱去的方法是适合于所述分子保护的常用方法。
可以理解，上述式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物的制备是一个立体选择性过程并且式(Ⅰ)化合物是单一的立体异构体。有利的是式(Ⅰ)化合物以与低于50％(w/w)的它的外消旋异构体混合物的形式存在，即当它大于50％旋光纯度时，它适合为80-100％，并且优选90-100％纯度，如90-95％，最优选95-100％，例如95％、96％、97％、98％、99％或99.9％旋光纯度。
优选式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物是以旋光纯的形式存在。
化合物的绝对立体化学可用通常的方法如X衍射结晶学方法确定。
当PPARα和PPARγ激动剂通过一个PPARα激动剂化合物和一个PPARγ激动剂化合物结合提供时，合适的PPARγ激动剂化合物选自EP 0306228和WO 94/05659，这些内容结合到本发明中作为参考。
合适、有利和优选的PPARγ激动剂是那些在EP 0306228和WO94/05659中公开的合适、有利和优选的化合物。
最优选的来自EP 0306228和WO 94/05659的PPARγ激动剂为5-[4-[2-(N-甲基-N-(2-吡啶基)氨基)乙氧基]苄基]噻唑烷-2,4-二酮或其互变异构形式和/或其药学上可接受的盐，尤其是其马来酸盐和/或其药学上可接受的溶剂化物。
另外的PPARγ激动剂包括在欧洲专利申请中公开的噻唑烷二酮，公开号0008203、0139421、0032128、0428312、0489663、0155845、0257781、0208420、0177353、0319189、0332331、0332332、0528734和0508740；及来自国际专利申请的噻唑烷二酮，公开号92/18501、93/02079、93/22445和来自美国的专利号5104888的噻唑烷二酮；这些公开的内容也都包含在这里作为参考。
当PPARα和PPARγ激动剂通过一个PPARα激动剂化合物和一个PPARγ激动剂化合物结合提供时，合适的PPARα激动剂是苯氧异丁酸酯(fibrates)如氯贝丁酯、环丙降脂酸、WY 14643和BR-931(Lalwani等，Biochemical and Biophysical Research commun.,Vol.116,388-393,1983)；这些公开的内容包含在这里作为参考。所述的苯氧异丁酸酯是用制备已知、类似化合物的已知方法或类似方法制备的已知化合物，例如d’Atri等(J.Med.Chem.,Vol 27,1621-1629,1984)的方法一般用于每一个所述苯氧异丁酸酯的制备。
在包括所述专利申请的上述公开内容中所公开的特定实施例也尤其包含在本发明的方法中。
公开于上述公开的专利说明书，包括其中公开的特定实施例可以按照公开于所述专利说明书中的方法方便地制得例如一个选自EP0306228或WO 94/05659中的PPARγ激动剂可以用在EP 0306228和WO 94/05659中所描述的过程制得。
当用在这里时，“X综合症”包括前驱糖尿病抗胰岛素性综合征和其导致的并发症、抗胰岛素性、非胰岛素依赖性糖尿病、脂血紊乱、高血糖、肥胖症和与糖尿病有关的并发症；除非专门另加说明外这里提到的方法、治疗包括以上所述的方法和治疗。
为了避免产生疑虑，本发明的方法和治疗也包括对下列任何一种疾病或其任何合并症的治疗和/或预防前驱糖尿病抗胰岛素性综合征、其导致的并发症、抗胰岛素性、非胰岛素依赖性糖尿病、脂血紊乱、高血糖、肥胖症和与糖尿病有关的并发症。
与糖尿病有关的并发症包括心血管疾病，尤其是动脉粥样硬化、视网膜病、神经病和包括糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾病综合征、高血压性肾硬化和晚期肾病。
当用在这里时，术语“PPARα激动剂”与过氧化物酶体增生剂激活受体的激动剂有关，适合于人类受体，与其α-亚型有关。
当用在这里时，术语“PPARγ激动剂”与过氧化物酶体增生剂激活受体的激动剂有关，适合于人类的受体，与其γ-亚型有关。
PPARα和PPARγ激动剂的活性可以用Lehmann等人在Journal ofBiological Chem.[270,12953-12956(1995)]中公开的方法或相似的方法评定。
在一个方面，PPARα激动剂化合物是这样的一些化合物，它们激发由连接合适的报告基因构成物如荧光素酶或氯霉素乙酰转移酶(CAT)的PPARα配体结合部位组成的PPARα嵌合受体。这一活性可以用Lehmann等人(出处同上)提出的方法验证。
在另一个方面，PPARγ激动剂化合物是这样的一些化合物，它们激发包含连接合适的报造基因构成物如荧光素或氯霉素乙酰转移酶(CAT)的PPARγ配体结合部位的PPARγ嵌合受体。这一活性可以用Lehmann等人在J.Biol.Chem.(出处同上)中的方法验证。
激动剂可以是蛋白质或非蛋白质。
适宜的激动剂是小分子量、非蛋白质的化合物。
检测具有PPARα和PPARγ激动剂活性化合物的方法也包括在本发明之内。
适宜的检测方法包括测定(a)PPARα激动剂活性，是通过检测由连接合适的报告基因构成物的PPARα配体结合部位组成的PPARα嵌合受体的兴奋作用进行的；和(b)PPARγ激动剂活性，是通过检测包含连接合适的报告基因构成物例如荧光素或氯霉素乙酰转移酶(CAT)的PPARγ配体结合部位的PPARγ嵌合受体的兴奋作用进行的。
适宜的PPARα嵌合受体包括所述配体结合结构域的氨基酸，例如融合到gal4酵母转录因子的第1-147氨基酸(DNA结合结构域)中的人类PPARα的第281-468氨基酸。
适宜的PPARγ嵌合受体包括所述配体结合结构域的氨基酸，例如融合到gal4酵母转录因子的第1-147氨基酸(DNA结合结构域)中的人类PPARγ受体的第173-476氨基酸。
适宜的报告基因构成物是荧光素酶或氯霉素乙酰转移酶(CAT)。
适宜的荧光素酶报告基因构成物包含位于HEK-293细胞中的gal 4DNA结合元件。
用于所述检测方法的方法学正如以上所描述的。
本发明也提供用于X综合症的治疗和/或预防的PPARα和PPARγ激动剂。
具体的治疗为高血糖的预防。
具体的治疗为前驱糖尿病抗胰岛素性综合征和其导致的并发症的治疗。
高血糖和/或前驱糖尿病抗胰岛素性综合征和其导致的并发症的治疗和/或预防也包括在本发明中；前提为该治疗不包括给予(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，以便治疗和/或预防以下疾病高血糖，尤其是在Ⅱ型糖尿病中的高血糖、高脂血、高血压、心血管疾病，尤其动脉粥样硬化和肾病的治疗和/或预防，尤其与Ⅱ型糖尿病发展有关的肾病包括糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾病综合征、高血压性肾硬化和晚期肾病及对微蛋白尿向蛋白尿进展的预防、逆转、稳定或阻滞作用。
本发明也提供一种PPARα和PPARγ激动剂，用于制备治疗和/或预防X综合征，尤其治疗和/或预防高血糖和/或前驱糖尿病抗胰岛素性综合征和其导致的并发症的药物；前提为该治疗方法不包括给予(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，以便治疗和/或预防以下疾病高血糖，尤其是在Ⅱ型糖尿病中的高血糖、高脂血、高血压、心血管疾病，尤其动脉粥样硬化和肾病的治疗和/或预防，尤其与Ⅱ型糖尿病发展有关的肾病包括糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾病综合征、高血压性肾硬化和晚期肾病及对微蛋白尿向蛋白尿进展的预防、逆转、稳定或阻滞作用。
认为这是在PPARα和PPARγ上均具有激动剂活性化合物的第一个适应证。具有这种双重活性的其它化合物在X综合征包括高血糖和前驱糖尿病抗胰岛素综合征和其导致的并发症的治疗和/或预防方面也具有特殊的用途。
因而，在另一方面，本发明也提供在PPARα和PPARγ上均有激动剂活性的化合物。
适宜的化合物是独特的，即不知道它们在PPARα和PPARγ上均有激动剂活性或它们本来就是新的化合物。
在一方面，所述在PPARα和PPARγ上均有激动剂活性的化合物不包括(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸。
本发明也提供一种用作PPARα和PPARγ激动剂的化合物。
本发明进一步提供在PPARα和PPARγ上均具有激动剂活性、用作活性治疗物质的化合物；适宜的前提为所述化合物不包括(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸。
在上述的治疗中，给予所述活性化合物本身或优选给予也包括药学上可接受的载体的药用组合物。
因而，本发明也提供包含PPARα和PPARγ激动剂和药学上可接受的载体的药用组合物；适宜的前提为所述激动剂不包括(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸。
另外，提供治疗人类或非人类哺乳动物由需要PPARα和PPARγ所引起症状的方法，该方法包括给予有效、药学上可接受、无毒量的一种PPARα和PPARγ激动剂。
当用在这里时，术语“药学上可接受的”包括人类和兽用的化合物、组合物和成分例如术语“药学上可接受的盐”包括一种兽医学上可接受的盐。
如果需要，该组合物可以为带有书写或印刷的使用说明的包装形式。
虽然也可以设想给予本发明药用组合物的其它途径如注射和透皮吸收，但是通常采用口服给药。
特别适合口服使用的组合物是单位剂量形式如片剂和胶囊。也可以使用其它固定的单位剂量形式，如小囊(sachets)中的粉末。
按照通常的医学实践，所述载体可以包括稀释剂、填料、崩解剂、润湿剂、润滑剂、着色剂、调味剂或其它常规的辅助剂。
典型的载体包括例如微晶纤维素、淀粉、淀粉羟乙酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯聚吡咯烷酮、硬脂酸镁、月桂基硫酸钠或蔗糖。
最好将所述组合物按单位剂量形式配制。该单位剂量通常包含活性成分的量在0.1到1000mg范围内，优选为0.1到500mg，更优选为0.1到250mg。
通常，所述活性成分可以以前述药用组合物的形式给药，这构成本发明的一个具体方面的内容。
在上述治疗方法中，所述活性化合物适合以如上述的剂量给患者服用，日服1到6次，其方式为70kg的成年人每天的总剂量一般是在0.1到6000mg范围内，更优选约为1到1500mg，一般约为0.5到10mg。即在1.429×10-3到85.714mg/kg/天范围内，更优选约1.429×10-2到21.429mg/kg/天，一般约为7.143×10-3到0.1429mg/kg/天。
当一个化合物依照本发明使用时，预期没有不利的毒理学作用。
本发明化合物的活性可以用下述的方法证实。以下的制备实例阐明了式(Ⅰ)化合物的制备方法。式(Ⅰ)化合物的制备制备1(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸
将[2S,N(1S)]-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧乙氧基)-N-(2-羟基-1-苯乙基)丙酰胺(1.846g)在1M硫酸(45ml)和二噁烷/水(1∶1,150ml)混合物中的溶液在90℃下加热56小时，之后加入碳酸氢钠水溶液将反应混合物的pH值调到pH为3。反应混合物用乙酸乙酯萃取，有机层萃取物用水、盐水洗，用MgSO4干燥，蒸发得到一油状物。用硅胶色谱法纯化，用1-5％梯度的甲醇在二氯甲烷中的溶液作为洗脱剂洗脱得到88％e.e.(HPLC)的泡沫状物。使上述产物与(S)-α-甲基苄胺在丙酮中反应，产生的盐在溶于水中之前，用乙酸乙酯-己烷重结晶几次，用稀盐酸酸化后，再用乙酸乙酯萃取，萃取物用MgSO4干燥。蒸发乙酸乙酯溶液得到富集的标题化合物的对映体；[α]25D-28°(c=0.625,CHCl3)；e.e 94％(通过HPLC)；[实测值M+414.1791。C22H26N2O6计算值M+414.1791]；1HNMR光谱与例5描述的完全相同。制备2(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，通过酰胺的水解制备
将[2S,N(1S)]-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-N-(2-羟基-1-苯基乙基)丙酰胺(来自步骤3)通过与制备1中描述的类似的步骤水解。通过硅胶色谱法纯化，用一梯度为0-5％的甲醇在二氯甲烷中的溶液作洗脱剂洗脱，与乙醚-己烷研磨后得到标题化合物，mp 116-7℃；[α]D25-24.6°(c=0.24,CHCl3)；e.e.95％(by HPLC).[实测值C,57.9；H,4.7；N,6.8％；M+438.1403.C21H21F3N2O5计算值C,57.5；H,4.8；N,6.4％；M+438.1403]；δH(DMSO-d6)2.96(2H,m),3.22(3H,s),3.88(2H,m),3.95-4.18(2H,m),4.27(3H,m),6.8-7.37(8H,m)and 12.9(1H,brs，用D2O交换)。制备3(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，通过酰亚胺直接水解制备
将氢氧化钠水溶液(2.5M,65ml,0.1 63mol,2.3eq)加入搅拌下的[3(2S),4S]-3-[3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮(来自步骤10)(42.5g,0.071mol)于HTF(500ml)和水(125ml)溶液中。将该混合物搅拌20分钟，用水(1L)稀释该反应物并用二氯甲烷(3×700ml)萃取。蒸发二氯甲烷溶液，残留物用硅胶色谱法纯化，用5％甲醇在二氯甲烷中的溶液作为洗脱剂洗脱得到(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮。原水溶液用稀盐酸酸化到pH为3.5，之后用二氯甲烷(3×700ml)重新萃取。用MgSO4干燥上述来自酸萃取的二氯甲烷溶液，然后蒸发得到一固体。将该固体从二氯甲烷-乙醚中重结晶得到标题化合物，mp 119.5-120.5℃。[α]D25=-31°(c=2.50,CHCl3)；e.e.99.6％(by HPLC)；[实测值C,57.7；H,4.7；N,6.25％；M+(EI)438.1412.C21H21F3N2O5计算值C,57.5；H,4.8；N,6.4％；M+438.1403]；δH(CDCl3)3.05(1H,dd),3.13(1H,dd),3.31(3H,s),3.72(1H,m),3.89(2H,m),4.04-4.14(3H,m),4.21(1H,dd),6.78(2H,d),7.03-7.40(6H,m)and 11.20(1H,br，用D2O交换)；δF(DMSO-d6)=-72.7(3F,t,3JHF9.3 Hz,CF3).制备4(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，通过甲酯的水解制备
将(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸甲酯(1.256g,2.8×10-3mol)、盐酸水溶液(2.0M,50ml)和二噁烷(50ml)的混合物加热回流7个小时，冷却然后真空浓缩。残留物悬浮于200ml盐水中并且用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。将合并的乙酸乙酯溶液用MgSO4干燥，然后蒸馏得到一蜡状固体。将该固体用己烷研磨，过滤然后在65℃真空干燥得到所需的产物，mp 113-5℃。D25=-32°(c=1.02,CHCl3)；e.e.99.4％(by HPLC)；[实测值C,57.25；H,4.8；N,6.3％.C21H21F3N2O5计算值C,57.5；H,4.8；N,6.4％].该产物的1HNMR光谱与例3中所产生的化合物完全一样。制备5(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酸
将(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酸甲酯以类似于实施例4中所描述的方式水解。将粗的反应混合物用硅胶色谱法纯化，以5％甲醇在二氯甲烷中的溶液作洗脱剂洗脱得到标题化合物，一胶状物。D25=-27°(c=0.73,CHCl3)；e.e.99.8％(by HPLC)；[实测值M+(EI)414.1779.C22H26N2O6计算值M+414.1791]；δH(CDCl3)2.90(1H,dd),3.15(1H,dd),3.33(3H,s),3.37(3H,s),3.40-3.70(4H.m),3.93(2H,t),4.05(1H,dd),4.21(2H,t),6.81(2H,d)和6.95-7.40(6H,m).制备6(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酸
将3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酸甲酯(1.08g,Int.Patent Appl.,公开号WO 9401420)和氢氧化钠(253mg)在甲醇∶水(1∶1,10ml)中的混合物在回流状态下加热2小时。在真空中蒸馏上述反应混合物后，残留物用水稀释，用2M盐酸酸化到pH5，然后用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取物用水洗和用MgSO4干燥，然后蒸馏得到一种油状物的标题化合物，将该化合物用乙醚/己烷研磨结晶。[实测值C,63.8；H,6.5；N,7.0％M+414.1791.C22H26N2O6计算值C,63.8；H,6.3；N,6.8％；M+414.1791]；δH(CDCl3)2.91(1H,dd),3.15(1H,dd),3.34(3H,s),3.38(3H,s),3.41-3.69(4H,m),3.93(2H,t),4.05(1H,dd),4.21(2H,t),6.80(2H,d)和6.83-7.38(6H m).步骤2制备7(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酰氯
将乙二酰氯(92mg)加入(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酸(100mg)在2ml二氯甲烷溶液中。将上述混合物在室温下搅拌16小时，然后蒸发至干得到未进一步纯化就可以使用的胶状标题化合物。制备8[2S,N(1S)]-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)-N-(2-羟基-1-苯基乙基)丙酰胺
将(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酰氯溶解在二氯甲烷(2ml)中并加入(S)-2-苯基甘氨醇(33mg)和干燥的三乙胺(37mg)在二氯甲烷(1ml)形成的混合物中。搅拌5分钟后，加入水，然后用二氯甲烷萃取反应混合物。将有机萃取层用水、盐水洗，MgSO4干燥，然后蒸馏。将残留物用硅胶色谱法纯化，用一梯度为10-50％丙酮在己烷中的溶液作为洗脱剂洗脱，首先得到[2R,N(1S)]-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)-N-(2-羟基-1-苯基乙基)丙酰胺，然后得到为泡沫状的所需要的[2S,N(1S)]-丙酰胺标题化合物。[α]D25-33°(c=1.1,CHCl3)；92.6％d.e.(by HPLC)；[实测值M+533.2526.C30H35N3O5计算值M+533.2526]；δH(CDCl3)2.81(1H,dd),3.07(1H,dd),3.35(3H,s),3.36(3H,s),3.48-3.58(2H,m),3.52-3.62(2H,m),3.71(1H,dd),3.82(1H,dd),3.94(1H,dd),3.93(2H,t),4.22(3H,t),5.05(1H,dt),6.75-7.35(13H,complex),7.54(1H,br，用D2O交换).步骤4制备9(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸
将3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸甲酯(Int.Patent Appl.，公开号WO 9401420)通过与制备5中描述的类似步骤水解得到为固体的标题化合物，mp 116-117℃；[实测值C,57.4；H,4.9；N,6.4％.C21H21F3N2O5计算值C,57.5；H,4.8；N,6.4％]；δH(CDCl3)3.03-3.17(2H,m),3.29(3H,s),3.73-3.83(1H,m),3.85(2H,m),4.02(2H,m),4.04-4.30(2H,m)和6.74-7.40(8H m).步骤5制备10(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰氯
将乙二酰氯(1.1ml)加入(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸(1.72g)在无水苯(30ml)的溶液中。将上述混合物在回流状态下加热2小时，冷却，然后蒸干得到一种胶状的标题化合物，未经进一步纯化用于下一步反应。步骤6制备11[2S,N(1S)]-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-N-(2-羟基-1-苯基乙基)丙酰胺
按照在步骤3中描述的类似步骤，使(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰氯与(S)-2-苯基甘氨醇反应。通过硅胶色谱法用梯度为10-70％乙酸乙酯在已烷中的溶液洗脱，首先得到[2R,N(1S)]-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-N-(2-羟基-1-苯基乙基)丙酰胺，接着得到所需的一种泡沫状的[2S,N(1S)]-丙酰胺标题化合物；[α]D25+14°(c=0.5,MeOH)；99％d.e.(by HPLC)；[实测值M+557.2136.C29H30F3N3O5计算值M+557.2138]；δH(CDCl3)2.35(1H,br，用D2O交换)，2.91(1H,dd),3.13(1H,dd),3.36(3H,s),3.70-3.87(2H,m),3.84(2H,d),3.95(2H,t),4.12(1H,dd),4.22(2H,t),5.01(1H,m),6.75(2H,d),6.97(1H,br s，用D2O交换)和7.01-7.36(11H，复杂多峰).制备12(2,2,2-三氟乙氧基)乙酰氯
将溶于无水二氯甲烷(50ml)中的乙二酰氯(20ml,0.23mol,1.15eq)溶液在室温和搅拌下滴加到(2,2,2-三氟乙氧基)乙酸(Int.Patent Appl.,公开号WO 87/07270,31.6g,0.2mol)和N,N-二甲基甲酰胺(5滴)溶于无水二氯甲烷(400ml)的溶液中。将该混合物再搅拌1小时，然后在回流状态下加热2小时，冷却并且将大量溶剂蒸馏出(bp40-45℃/760mmHg)。将残留物转移到克莱森烧瓶中，然后将剩余溶剂和乙二酰氯通过蒸馏除去(bp 45-60℃/760mmHg)。将残留物减压蒸馏得到所需的产物，bp 50-55℃/25-32mmHg。δH(CDCl3)4.00(2H,q,3JHF8.3)和4.57(2H,S)。步骤8制备13(4S)-4-苄基-3-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙酰基]噁唑烷-2-酮
在氩气保护下，将(4S)-4-苄基噁唑烷-2-酮(5.21g,0.029mol)溶解于无水THF(60ml)中，然后冷却到-70℃。将正丁基锂(18.4ml,1.6M己烷溶液，1.1eq)用10分钟以上时间加到上述溶液中，将产生的混合物在-70℃搅拌20分钟。将(2,2,2-三氟乙氧基)乙酰氯(5.19g,1eq)于无水THF(60ml)中的溶液用多于10分钟时间加入上述反应液中，将反应混合物在-70℃再搅拌30分钟，然后升温到室温过夜。加入盐水(20ml)终止反应然后在真空下浓缩。将残留物用盐水(300ml)稀释，然后用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。将合并的有机物萃取物用MgSO4干燥，蒸馏，然后将残留物用硅胶色谱法纯化，以二氯甲烷作洗脱剂得到一种油状标题化合物。D25=+48°(c=2.55,CHCl3)；e.e.100％(by HPLC)；[实测值(Cl，氨)MH+318.0934.C14H14NO4F3计算值MH+318.0953]；δH(CDCl3)2.82(1H,dd),3.34(1H,dd),4.02(2H,q,3JHF8.6),4.30(2H,m),4.69(1H,m),4.84(2H,s)and 7.15-7.40(5H,m)；δF(CDCl3)=-74.8(3F,t,3JHF8.6,CF3).步骤9制备1 4[3(2S,3R),4S]-3-[3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-3-羟基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮
将(4S)-4-苄基-3-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)乙酰基]噁唑烷-2-酮(31.7g,0.1mol)在氩气保护下溶于无水二氯甲烷(300ml)中，然后冷却到-78℃(溶液内部温度)，用液态氮/丙酮作冷却介质。将三乙胺(16.72ml,1.2eq)加入上述溶液中，接着用近10分钟时间慢慢加入三氟甲磺酸二-正丁基硼(Aldrich化学公司，1.0M于二氯甲烷中的溶液，110ml，1.1eq)，以使反应温度保持在低于-70℃。将上述混合物在-78℃下搅拌50分钟，然后用冰浴代替以前的冷却浴，在重新冷却到-78℃之前将反应混合物在0℃再搅拌50分钟。将溶在无水二氯甲烷(220ml)中的4-[2-[N-[(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯甲醛(29.6g,1.0eq)溶液(预先冷却到-50℃)用大约12分钟时间加入到上述反应液中，以使反应温度保持在-70℃以下。将产生的混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后沿着线性梯度用多于60分钟时间将温度从-78℃升到0℃(升温速率为～1.3℃分钟-1)，接着在0℃下进一步搅拌75分钟。将反应混合物倒入由甲醇(500ml)、pH为7的磷酸盐缓冲液(250ml)和过氧化氢(27.5％(w/v),110ml)组成的一种终止溶液中，然后剧烈搅拌30分钟。加入4L水，分层，水层用二氯甲烷(3×1L)萃取。将该二氯甲烷溶液与原来自反应混合物的二氯甲烷层合并，然后用水(2L)和盐水(2L)洗涤该有机溶液，用MgSO4干燥，蒸馏得到一泡沫状物。这个粗反应混合物的1HNMR证明是所需的3-羟基丁醛产物(3个非对映体，包含95％的主要非对映体)和开始的原料。将该粗的混合物用硅胶色谱法分离，先用包含15％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液(直至所需的产物开始被洗脱出)，然后提高到50％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液梯度洗脱液，完成所需产物的洗脱。没有反应的亚酰胺和醛从较早的组分中出现，接着是大量的不纯产物，然后是标题化合物(包含2种非对映体，然后通过NMR测定比例为97.8:2.2)。[α]D25=+45°(c=2.82,CHCl3).[实测值(EI)M+613.2042.C31H30F3N3O7计算值M+613.2036]；δH(CDCl3，仅记录主要的非对映体)2.75(1H,dd),2.90(1H,d，用D2O交换)，3.25(1H,dd),3.34(3H,s),3.80-4.00(5H,m),4.07(1H,dd),4.24(2H,t),4.45(1H,m),4.99(1H，明显的t)，5.48(1H,d),6.85(2H,d)and 6.95-7.40(11H,m)；δF(CDCl3)=-74.7(3F,t,3JHF8.5,CF3).在纯化过的产物中，主要的非对映体证明是[3(2S,3S),4S]-非对映体。步骤10制备15[3(2S),4S]-3-[3-[4-[2-[N-[(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮，通过去羟基化作用制备
将三乙基硅烷(120ml,0.75mol)用5分钟以上时间加入搅拌下、冰冷的[3(2S,3R),4S]-3-[3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-3-羟基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮(46.23g,7.5×10-2mol)在三氟醋酸(650ml)的溶液中。将该混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下再搅拌60小时。大量的溶剂和剩余的三乙基硅烷通过旋转蒸馏法蒸出，首先在40mmHg真空度下蒸馏，最后在～5mmHg真空度下蒸馏。将残留物溶解在二氯甲烷(800ml)和水(800ml)中，再小心加入碳酸氢钠(～29g)(注意起泡沫！)，期间剧烈搅拌直到水层的pH值为7。分层，水层用二氯甲烷(800ml)萃取。合并的二氯甲烷层用水(600ml)洗涤，用MgSO4干燥，蒸馏。残留物用热己烷研磨并过滤收集产生的固体。从乙醚-己烷中重结晶得到标题化合物，mp 107-109℃，通过1HNMR光谱分析为单一的非对映体。[α]25D=+38°。(c=1.51,CHCl3)；[实测值C,62.1；H,4.9；N,7.2％；M+(EI)597.2089.C31H30N3O6F3计算值C,62.3；H,5.1；N,7.0％；M+597.2087]；δH(CDCl3)2.82(1H,dd),2.96(1H,dd),3.04(1H,dd),3.32(1H,dd),3.34(3H,s),3.70(1H,m),3.88(1H,m),3.94(2H,t),4.12(1H,m),4.18(1H,m),4.25(2H,t),4.57(1H,m),5.34(1H,dd),6.82(2H,d)and 7.00-7.35(11H,m)；δF(CDCl3)=-74.8(3F,t,3JHF8.6,CF3).步骤11制备16[3(2S),4S]-3-[3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮，经非对映体的分离制备
在氩气保护下，将(S)-4-苄基噁唑烷-2-酮(0.291g,1.64×10-3mol)溶于无水THF(10ml)中，然后将形成的溶液冷却到-70℃。加入n-丁基锂(1.6M在己烷中，1.03ml,1.64×10-3mol)，在加入(±)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰氯(通过以上步骤5从0.36g酸制得)在无水THF(15ml)中的溶液以前，将该混合物在-70℃下搅拌10分钟。在用水(200ml)稀释和用乙酸乙酯(2×200ml)萃取以前，将反应物搅拌并温热至室温过夜。将合并的乙酸乙酯萃取层用水(200ml)和盐水(200ml)洗涤，用MgSO4干燥，蒸馏得到褐色胶状物。将该胶状物用硅胶色谱法分离，用梯度从35％到50％乙酸乙酯在己烷中的溶液做洗脱剂洗脱，首先得到(R,S)-非对映体，随后得到标题化合物，一种泡沫状物。该物质光谱学证实与通过3-羟基丁醛途径(步骤10)制得的化合物一致。步骤12制备17(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸甲酯
将甲醇钠[用氢化钠(60％于矿物油中的分散液，138mg,3.41×10-3mol)溶于无水甲醇(3.5ml)中制得]溶液加到冰冷及搅拌的[3(2S),4S]-3-[3-[4-[2-[N-[(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮(1.879g,3.1×10-3mol)的无水甲醇(100ml)的悬浮液中。将上述反应混合物在0℃下搅拌共20分钟，然后通过加入稀盐酸(2.0M,1.75ml)终止反应，并在真空下浓缩。将残留物悬浮于水(100ml)中，用乙酸乙酯(3×200ml)萃取并用盐水(500ml)洗合并的乙酸乙酯溶液，用MgSO4干燥，蒸馏。将产生的胶状物用硅胶色谱法分离，用在二氯甲烷中的4％的乙酸乙酯作为洗脱剂洗脱得到澄清的胶状产物。D25=-17°(c=1.24，CHCl3)；[实测值(EI)M+452.1561.C22H23N2O5F3计算值M+452.1559]；e.e.100％(by HPLC)；δH(CDCl3)3.02(2H,m),3.34(3H,s),3.65(1H,m),3.72(3H,s),3.94(2H,t),4.00(1H,m),4.13(1H,dd),4.24(2H,t),6.80(2H,d)and 6.96-7.40(6H,m).步骤13制备18(4S)-4-苄基-3-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙酰基]噁唑烷-2-酮
标题化合物是通过步骤8中描述的类似方法，从2-(2-甲氧基乙氧基)乙酰氯制得。通过硅胶色谱法分离，用梯度为70-80％在己烷中的乙醚溶液作为洗脱剂洗脱得到一胶状产物。D25=+54°(c=2.70,CHCl3)；[实测值(EI)M+293.1263.C15H19NO5计算值M+293.1264]；δH(CDCl3)2.81(1H,dd),3.33(1H,dd),3.41(3H,s),3.63(2H,t),3.78(2H,t),4.25(2H,m),4.70(1H,m),4.74(1H,d),4.76(1H,d)and 7.10-7.40(5H,m).步骤14制备19[3(2S,3R),4S]-3-[3-[4-[2-[N-[(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-3-羟基-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮
标题化合物是通过在步骤9中描述的类似的方法，从(4S)-4-苄基-3-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙酰基]噁唑烷-2-酮制备的。反应混合物粗品通过硅胶色谱法分离，用梯度为15-40％在二氯甲烷中的乙酸乙酯溶液作洗脱剂洗脱得到一种胶状产物(包括2种非对映体，通过1HNMR分析比例＞99∶1)。[α]D25=+49°(c=1.14,CHCl3).[实测值(FAB,NOBA/Na)MH+590.2472.C32H35N3O8计算值MH+590.2502]；δH(CDCl3，仅主要的非对映体记录下来)2.71(1H,dd),3.25(1H,dd),3.31(3H,s),3.35(3H,s),3.56(2H,m),3.72(2H,m),3.78(1H,d，用D2O交换)，3.85-4.00(4H,m),4.22(2H,t),4.31(1H,m),4.89(1H,dd),5.42(1H,d),6.83(2H,d)and 6.95-7.40(11H,m)；在纯化产物中的主要的非对映体鉴定为[3(2S,3S),4S]-非对映体。步骤15制备20[3(2S),4S]-3-[3-[4-[2-[N-[(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮
用与步骤10中描述的类似的方法使[3(2S,3R),4S]-3-[3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-3-羟基-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮(0.561 g)与三乙基硅烷反应6.25小时。将上述反应混合物用水(200ml)和二氯甲烷(200ml)稀释，然后将固体碳酸氢钠小心地加入直到水层的pH为6.5为止。分层，水层用二氯甲烷(2×300ml)萃取，然后将合并的二氯甲烷溶液用盐水(400ml)洗涤，用MgSO4干燥，最后蒸馏。其残留物通过硅胶色谱法分离，用溶于二氯甲烷的35％乙酸乙酯作洗脱剂洗脱得到一胶状的标题化合物，通过1HNMR分析为单一的非对映体。D25=+45°(c=1.39,CHCl3)；[实测值M+(EI)573.2473.C32H35N3O7计算值M+573.2475]；δH(CDCl3)2.76(1H,dd),2.94(2H,m),3.30(3H,s),3.33(4H,m),3.40-3.70(4H,m),3.93(2H,t),4.00(1H,dd),4.12(1H,dd),4.22(2H,t),4.52(1H,m),5.31(1H,dd),6.79(2H,d)and 6.90-7.40(11H,m).步骤16制备21(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酸甲酯
以在步骤12中所描述的类似方式使[3(2S),4S]-3-[3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基乙氧基)丙酰基]-4-苄基噁唑烷-2-酮与甲醇钠反应。将粗反应混合物用硅胶色谱法分离，用在乙醚中的20％异己烷作洗脱剂洗脱得到标题化合物，为一胶状物。D25=-12°(c=1.26,CHCl3)；[实测值(EI)M+428.1974.C23H28N2O6计算值M+428.1948]；e.e.＞99.8％(by HPLC)；δH(CDCl3)2.95(2H,m),3.29(3H,s),3.34(3H,s),3.35(3H,m),3.69(4H,m),3.93(2H,t),4.05(1H,dd),4.23(2H,t)and 6.75-7.40(8H,m).化合物功效的验证1)h PPARα和PPARγ的激动剂活性的测定化合物激动剂在人体PPARα和PPARγ中的作用是利用反式激活报告基因检测法评定的，该试验以Lehman等人描述的方法为基础。[(1995)J Biol Chem 270,12953-12956]。
结果(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲基氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸在h PPARα和PPARγ中的功效
激发人体PPARα的EC50为2500nM激发人体PPARγ的EC50为70nM2)化合物对于C57 Bl/Ks J db/db小鼠体中血糖和血脂功效的测定遗传性糖尿病C57 Bl/Ks J db/db小鼠显示严重的非胰岛素依赖性糖尿病形式，其特征在于大约8周龄的小鼠发展成严重的高血糖，随代偿性增加水摄取，平行出现糖尿和尿频。循环血清甘油三酯和游离脂肪酸也提高了。
通过与食物混合(粉状的RM3食物)给予化合物14天，在实验期间，以适当的间隔时间从有意识、非禁食小鼠的尾静脉抽取血样测定血糖变化。经过14天处理之后，将小鼠通过颈部扭断法处死并且从切断的颈静脉中采取血样。甘油三酯和非酯化的脂肪酸通过经离心后获得的血清样来测定。(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸对于糖尿病小鼠血糖的功效
结果均值±SD(每组n=9-10)。**P＜0.01,***P＜0.001(与对照组相比)。(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸在遗传性糖尿病小鼠体内对血清脂质的作用。<
治疗14天(以与食物的混合物)以后，取血样测定参数。数值为均值±SD(n=9)。***P＜0.001(与对照组相比)。
权利要求
1．用于治疗和/或预防人类或非人类哺乳动物X综合征的一种方法，该方法包括给予需要此治疗的人类或非人类哺乳动物有效、非毒性和药学上有效量的PPARα和PPARγ激动剂或其药学上可接受的衍生物。
2．根据权利要求1的方法，其中所述PPARα和PPARγ激动剂是同一化合物。
3．根据权利要求1或2的方法，用于高血糖的治疗和/或预防。
4．根据权利要求1-3中任一项的方法，用于前驱糖尿病抗胰岛素性综合征和其导致的并发症的治疗。
5．用于治疗和/或预防人类或非人类哺乳动物的高血糖和/或前驱糖尿病抗胰岛素性综合征和其导致的并发症的方法，该方法包括给予需要此治疗的人类或非人类哺乳动物有效、无毒性和药学上有效量的PPARα和PPARγ激动剂或其药学上可接受的衍生物，前提为该方法不包括给予(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2-甲氧基-乙氧基)丙酸或(S)-3-[4-[2-[N-(2-苯并噁唑基)-N-甲氨基]乙氧基]苯基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)丙酸，以用于治疗和/预防高血糖尤其Ⅱ型糖尿病中的高血糖、高血脂、高血压、心血管疾病尤其动脉粥样硬化及肾病的治疗和/或预防，尤其与Ⅱ型糖尿病的发展有关的肾病包括糖尿病性肾病、肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾病综合征、高血压性肾硬化、晚期肾病和用于对微量蛋白尿向蛋白尿进展的预防、逆转、稳定或阻滞。
6．根据权利要求1-5中任一项的方法，其中所述PPARα和PPARγ激动剂为式(Ⅰ)化合物
或其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的溶剂化物，其中R0代表2-苯并噁唑基或2-吡啶基和R1代表CH2OCH3或CF3。
7．根据权利要求5的方法，其中R0代表2-苯并噁唑基R1代表CH2OCH3或CF3。
8．一种PPARα和PPARγ激动剂，用于X综合征的治疗和/或预防。
9．一种PPARα和PPARγ激动剂，用于制备治疗和/或预防X综合征的药物。
10．在PPARα和PPARγ上具有激动剂活性的一种化合物。
11．在PPARα和PPARγ上具有激动剂活性的化合物用作活性治疗物质。
12．包含PPARα和PPARγ激动剂和药学上可接受的载体的药用组合物。
13．用于检测具有PPARα和PPARγ激动剂活性的化合物的一种方法，该方法包括测定(a)PPARα激动剂活性，是通过检测由连接合适的报告基因构成物的PPARα配体结合部位组成的PPARα嵌合受体的兴奋作用进行的；和(b)PPARγ激动剂活性，是通过检测包含连接合适的报告基因构成物的PPARγ配体结合部位的PPARγ嵌合受体的兴奋作用进行的。
全文摘要
一种用于治疗和/或预防人类或非人类哺乳动物X综合征的方法,该方法包括给予需要此治疗的人类或非人类哺乳动物有效、非毒性和药学上有效量的PPARα和PPARγ激动剂或其药学上可接受的衍生物,以及用于该方法中的某些化合物。
文档编号A61P3/00GK1212622SQ97192711
公开日1999年3月31日 申请日期1997年1月7日 优先权日1996年1月9日
发明者S·A·史密斯 申请人:史密丝克莱恩比彻姆有限公司